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ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity) and F variant (Low Affinity)
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ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity) and F variant (Low Affinity)
ADCC活性をルシフェリンの発光量で測定できる遺伝子改変細胞 ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity) and F variant (Low Affinity)
掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:65365
エフェクター細胞の代わりに、FcγRIIIaの高親和性バリアント(V158)あるいは低親和性バリアント(F158)を恒常的に発現する遺伝子改変Jurkat T細胞です。エフェクター細胞として用いることで、ADCC活性を測定できます。
追加しました。
ADCCとは
ADCC(Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity、抗体依存性細胞傷害活性)とは、エフェクター細胞が関与する免疫防御機構です。がん細胞などの「標的細胞」の抗原に対して、特異的な抗体が結合します。次に、その抗体のFc部分に対し、FcγRレセプター(FcγRIIIa)を持つエフェクター細胞(NK細胞、マクロファージ、好中球など)が結合します。その結果エフェクター細胞が活性化し、最終的にグランザイムなどが放出されて標的細胞を破壊(傷害)します。
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ADCC活性測定概略
- エフェクター細胞の代わりに、遺伝子改変した Jurkat T細胞(#60540, #60541)を使用する。
- FcγIIIaレセプターからのシグナルが、NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) 応答配列の下流に組み込まれたホタルルシフェラーゼ遺伝子を活性化する。
- 生じたルシフェラーゼの多寡を、ルシフェリンを含むOne Step Luciferase Assay System(#60690)を用い、ルミノメーターで測定する。

追加しました。
応用例
■細胞培養の例
- 液体窒素中に保存した遺伝子改変Jurkat T細胞を、バイアルごと速やかに37℃の温水浴で融解し、中身をG418などの抗生物質を含まない10%FBS添加 RPMI1640培地を入れたチューブに移す。
- 細胞を遠心して回収し、温めた上記培地で再懸濁する。
- 細胞をT25フラスコに移し、5% CO2 、37℃の条件下で培養する。遺伝子改変Jurkat T細胞は、通常のJurkat T細胞よりも若干生育が遅い傾向がある。
- 24時間後、抗生物質を含まない10%FBS添加 RPMI1640培地を3~4 ml加える。
- 抗生物質入りのRPMI培地に交換し、2×106 cells/ mlに達しないうちに最初の継代を行う。継代比率は 1:10~1:20 とし、隔週で行う。
■ADCCアッセイ(ヒトCD20に対するキメラ抗体Rituximabの例)
用意するもの
- 細胞:継代培養した遺伝子改変Jurkat T細胞、WIL2-S細胞(ヒトBリンパ芽球細胞で、標的細胞として使用)
- 抗体:Rituximab(Anti-CD20, #71209)、非特異的コントロール抗体(ネガティブコントロール)
- 抗体を含まないアッセイ用培地
- ONE-Step Luciferase reagent (#60690)
- Rituximab、非特異的コントロール抗体、またはアッセイ用培地に、それぞれ遺伝子改変Jurkat T細胞(FcγRIIIa (F158))を加え、さらに標的細胞を添加(あるいは非添加)し、5時間以内の刺激を与えます。
- ONE-Step Luciferase reagentを加え、Fcγレセプター由来のシグナルによるNFATレポーター遺伝子の活性化(ルシフェラーゼの増加)をルミノメーターで計測します。

非特異的抗体に標的細胞を添加した群、あるいはRituximabのみではほとんど発光は見られないが、Rituximabに標的細胞を加えた群では強い発光が観察され、また発光強度は Rituximabの添加量に応じていた。
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細胞株のご購入にあたって
BPS Bioscience社の細胞株のご購入の際には、☞ BPS Bioscience License Disclosureをご確認いただくようお願いいたします。
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価格
ADCCバイオアッセイ用細胞
※ 本製品は別途輸送費が必要です。
[在庫・価格 :2025年05月01日 14時15分現在]
詳細 | 商品名 |
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ADCC Cell Line, Low Affinity |
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ADCC Cell Line, High Affinity |
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[在庫・価格 :2025年05月01日 14時15分現在]
ADCC Cell Line, Low Affinity
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- メーカー:BPS
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- 法規制等:
説明文 | ※別途輸送費(約6万円)が必要な製品です。※ライセンス同意書が必要な製品です。 ※受注発注品。※推奨培地の商品コード:60190,60690,60184,79796,細胞種:Jurkat,由来:human,産生:Jurkat,形状:Each vial contains ~2 x 106 cells in 1 ml of 10% DMSO |
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