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情報伝達経路活性化測定用細胞株(BPS Bioscience社) Cell Signaling Pathway Reporter, Luciferase Recombinant Cell Line

掲載日情報:2023/12/25 現在Webページ番号:63289

各種細胞情報伝達経路(Cell signaling pathway)の活性化や阻害作用のモニタリングに最適な細胞株です。HEK293などの細胞に、シグナル分子に対する応答配列が組み込まれており、情報伝達経路の活性化により、発現レポーター遺伝子の転写が誘導されます。ルシフェラーゼレポーター細胞による応答反応は、ルシフェリン基質(ONE-Step Luciferase Assay System、#60690)による発光量で測定できます。様々な情報伝達経路における活性化物質または阻害物質の探索、評価に有用です。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
マイコプラズマが陰性であることを確認していますが、取り扱いには十分にご注意下さい。
本製品は1回のご注文につき別途輸送費が必要です。詳細は、当社営業担当までお問い合わせ下さい。
お客様における事故・過失による製品の破損、汚染トラブル対策の為、予備1バイアルを含む2バイアルにてご提供します。
企業のお客様も含め、使用に当たりライセンス料は不要です。ご購入に当たっては、こちらの注意事項をまずご確認下さい。

#60651用量応答曲線

左図:NF-κB reporter (Luc)-Jurkat cells(#60651)を用いたTNFαの用量応答曲線
TNFαで約6時間処理した細胞と、TNFα非処理細胞をコントロールとしたルシフェラーゼの発現量の平均値を比較し、倍数誘導およびEC50を決定した。
右図:NF-κB reporter (Luc)-Jurkat cells(#60651)を用いたPMAの用量応答曲線
PMAとionomycinで約3時間処理した細胞と、DMSO処理細胞をコントロールとしたルシフェラーゼの発現量の平均値を比較し、倍数誘導およびEC50を決定した。

製品ラインナップ

価格については当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。

対象経路 ルシフェラーゼの転写誘導 細胞種 包装 商品コード
cAMP/PKA CRE/CREB CHO-K1 2 vials 78568
HEK293 2 vials 60515
Jurkat 2 vials 79636
CGRP receptor CGRPR/CRE HEK293 2 vials 78325
Foxp3 Foxp3 Jurkat 2 vials 60628
GIPR activation GIPR/CREB HEK293 2 vials 78589
GLP-1R GLP-1R/CRE HEK293 2 vials 78176
Glucocorticoid receptor GAL4 HEK293 2 vials 60656
GAL4 DBD-GR HEK293 2 vials 60655
GAL4/UAS Jurkat 2 vials 78525
Hedgehog Gli NIH3T3 2 vials 60409
Hippo TEAD MCF7 2 vials 60618
IFNγ/JAK/STAT1 GAS HeLa 2 vials 79041
IL-15/STAT5 STAT5 Jurkat 2 vials 78402
JAK/STAT ISRE HEK293 2 vials 60510
JNK AP-1 HEK293 2 vials 60405
MAPK/ERK SRE HEK293 2 vials 60406
Myc Myc HCT116 2 vials 60520
A549 2 vials 60625
NF-κB NF-κB CHO-K1 2 vials 60622
HCT116 2 vials 60623
HEK293 2 vials 60650
Jurkat 2 vials 60651
NIH/3T3 2 vials 79469
Raw 264. 7 2 vials 79978
THP-1 2 vials 79645
Notch Notch1/CLS HEK293 2 vials 60652
Nrf2-antioxidant ARE Hep-G2 2 vials 60513
PD-1:PD-L1/2 PD-1(Mouse)/NFAT Jurkat 2 vials 79762
PKC/Ca2+ NFAT CHO-K1 2 vials 78569
HEK293 2 vials 79298
Jurkat 2 vials 60621
THP-1 2 vials 78320
RAR RARα HEK293 2 vials 60503
RARβ HEK293 2 vials 60603
RARγ HEK293 2 vials 60604
STAT3 STAT3 THP-1 2 vials 78498
STAT5 STAT5 Ba/F3 2 vials 79772
U937 2 vials 79941
TGF-β PAI-1 Mv1 Lu 2 vials 60544
TGFβ/SMAD SBE HEK293 2 vials 60653
Wnt TCF/LEF HEK293 2 vials 60501
iPS(pool) 2 vials 78515


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使用例

IFN-αに対する応答

左図:JAK/STAT Signaling Pathway ISRE Reporter-HEK293 Cell Line(#60510)を用いたIFN-αに対する応答の測定
IFN-αを培地に1,000 U/ml添加(+)または非添加(-)してインキュベートし、翌日にOne-Step Luciferase Assay System(図左)および他社製品(図右)を加えて発光度を測定した。One-Step Luciferase Assay Systemは他社製品と比較して、有意に発光が強いことが分かる。

発光時間の計測

右図:JAK/STAT Signaling Pathway ISRE Reporter-HEK293 Cell Line(#60510)を用いたIFN-α添加または非添加処理された細胞での発光時間の計測
One-Step Luciferase Assay Systemは、添加後5分でも強い発光が見られ、減衰することなく少なくとも2時間は継続することが分かった。



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関連製品 ONE-Step Luciferase Assay System
(ルシフェラーゼレポーター細胞活性測定用試薬)

組換え体ルシフェラーゼレポーター細胞株を用いた活性測定および阻害物質のスクリーニングを、ワンステップで簡便、迅速に行う試薬セットです。

測定原理

ルシフェラーゼ反応では、細胞をD-ルシフェリンを含むルシフェラーゼ基質とともに溶解します。レポーター細胞に由来するホタルルシフェラーゼは、ATPと共基質のMg2+を用いて、光を放ちながらD-ルシフェリンのオキシルシフェリンへの変換を触媒します。発光量は反応中のルシフェラーゼの量に比例し、従って遺伝子の活性化と相関します。

ルシフェラーゼ測定原理

ルシフェラーゼレポーター細胞活性測定の操作方法概略

  1. 細胞を37℃のウォーターバス中で素早く解凍し、使用培地に移して2回洗浄する。
  2. 培地に浮遊させT25フラスコに移し、37℃, 5%CO2(使用する培地中の炭酸水素ナトリウム量によって異なる)で培養する。
  3. コンフルエントに達する前に、細胞に適した培地で最初の継代を行う。
  4. 細胞を回収してアッセイ用培地に懸濁し、透明平底の96ウェルプレートに播種する。
  5. 情報伝達経路活性化物質や阻害物質をアッセイ用培地で段階希釈し、細胞に加えて数時間インキュベートする(細胞を含まないコントロールも加える。n=3以上となるように準備する)。
  6. 各ウェルに、ONE-Step luciferase assay system(#60690)から作製したONE-Step Luciferase assay reagent buffer 100μlを加え、室温で10~15分間振とうし、細胞を溶解しながらルシフェリンを浸透させる。
  7. ルミノメーターで測定する。
ルシフェラーゼ操作方法概略

キット内容

  • Luciferase reagent buffer(Component A)
  • Luciferase reagent substrate(Component B)

別途、マイクロプレート用ルミノメーターが必要です。


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細胞株のご購入にあたって

BPS Bioscience社の細胞株のご購入の際には、☞ BPS Bioscience License Disclosureをご確認いただくようお願いいたします。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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