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高感度かつ低バックグラウンドな免疫染色試薬を用いた二重染色法 ImmPRESS® Reagent(酵素標識ポリマー法)を用いた二重染色

掲載日情報:2021/03/22 現在Webページ番号:947

VECTOR LABORATORIES社の酵素標識ポリマー法の免疫染色試薬、ImmPRESS® Reagentを用いた二重染色をご紹介します。染色ステップの少ないImmPRESS® Reagentを用いることで、染色ステップ数を抑えつつ、高感度かつ低バックグラウンドの二重染色が可能です。

あらかじめ2種類の酵素標識マイクロポリマーを結合させた二次抗体(PeroxidaseまたはAP標識ウマ抗IgG抗体)が混合済みで、ワンステップで二重染色が可能なImmPRESS® Duet Double Staining Polymer Kit(一次抗体の免疫動物がマウスおよびウサギ用)もあります。ヒトまたは霊長類以外の組織をご使用の場合、免疫動物がマウスまたはウサギ以外の一次抗体をご使用の場合は、ご使用条件に合わせて適切なImmPRESS® Reagentを選択のうえ、本記事の二重染色法(従来法)をご参照下さい。
VECTOR LABOATORIES社のその他の酵素標識ポリマー法の免疫染色試薬については、ImmPRESS® Reagentをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

ImmPRESS® Reagentを用いた二重染色のプロトコル

酵素標識ポリマー法を用いた二重染色の概略図

図. 二重染色の概略図(第1の抗原検出:1~3、第2の抗原検出:4~6)

免疫染色(免疫組織化学、IHC)特集

第1の抗原検出

  1. 調製済みブロッキング用正常血清を滴下し、20分間反応させる。
  2. 適切なバッファー(2.5% 正常血清または0.1%BSA*1を含む)で希釈した第1の一次抗体を滴下し、反応させる。
  3. バッファーで5分間洗浄する。
  4. ImmPRESS® Reagentを滴下し、30分間反応させる。
  5. バッファーで5分間洗浄する。
  6. 基質溶液*2を滴下し、適切な染色強度が得られるまで反応させる(用いる基質により反応時間が異なる)。
  7. バッファーで5分間洗浄する。

第2の抗原検出

  1. 調製済みブロッキング用正常血清を滴下し、20分間反応させる。
  2. 適切なバッファー(2.5%正常血清または0.1%BSA*1を含む)で希釈した第2の一次抗体を滴下し、反応させる。
  3. バッファーで5分間洗浄する。
  4. ImmPRESS® Reagentを滴下し、30分間反応させる。
  5. バッファーで5分間洗浄する。
  6. 第1の抗原検出とは異なる基質溶液*2を滴下し、適切な染色強度が得られるまで反応させる(用いる基質により反応時間が異なる)。
  7. バッファーで5分間洗浄する。
  8. 対比染色後、脱水・透徹、封入する*3

*1 BSAは免疫組織染色用BSA(#SP-5050)をご使用下さい。
*2 VECTOR LABOATORIES社の酵素基質はEnzyme Substrates for Immunohistochemistryをご覧下さい。
*3 基質により脱水しない場合もあります。
必要に応じてAntigen Unmasking Solution(#H-3300、#H-3301)などを用い、抗原を賦活化させて下さい。
プロトコルの詳細はA Guide to Multiple Antigen Labelingをご確認いただくか、テクニカルサポート部(試薬担当)までお問い合わせ下さい。


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関連動画:ImmPRESS® Reagentを用いたポリマー法の免疫染色

本動画は二重染色についての説明は含まれていません。



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価格

[在庫・価格 :2024年12月11日 00時00分現在]

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ImmPRESS UNIVERSAL Reagent, Anti-Mouse/Rabbit Ig
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説明文
組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
別包装品 別包装品あり
法規制等
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掲載カタログ 免疫染色実験ガイド2019-2020 p.69

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ImmPRESS Reagent, Anti-Mouse IgG
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組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
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ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig
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ImmPRESS Reagent, Anti-Goat Ig
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ImmPRESS UNIVERSAL Reagent, Anti-Mouse/Rabbit Ig

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説明文 組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
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法規制等
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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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