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酵素標識ポリマー法を用いた免疫染色(IHC)試薬 免疫染色システム ImmPRESS® シリーズ

掲載日情報:2019/10/30 現在Webページ番号:607

VECTOR LABORATORIES社のポリマー法の免疫染色システム、ImmPRESS®シリーズをご紹介します。用途や試料に応じて、最適なキットをお選びいただけます。

#MP-7444を用いたヒト扁桃腺組織の免疫組織染色像

図. ヒト扁桃腺組織の免疫組織染色像
一次抗体:抗CD45抗体
二次抗体:ImmPRESS® Reagent HRP(#MP-7444
基質(茶色):ImmPACT® AEC(#SK-4205
対比染色(青色):Hematoxylin QS(#H-3404

免疫染色(免疫組織化学、IHC)特集

目次

ポリマー法とは

ポリマー法は、二次抗体を結合させた酵素標識ポリマーを用いた免疫染色法です。酵素を直接結合させた二次抗体と比べ、ターゲット局在部位により多くの酵素を集中させ、発色基質との反応性を高めることができます。また、アビジン・ビオチンシステムにおいて問題となる内在性アビジン、ビオチンの影響を受けることもありません。

ImmPRESS®シリーズ

ImmPRESS®シリーズは、VECTOR LABORATORIES社独自のポリマーシステムです。高活性のペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼを標識した独自のマイクロポリマーと、アフィニティ精製や吸収処理を施した二次抗体が結合しています。デキストランなど分子量の大きな分子で構成されたポリマーシステムは、一部の組織において浸透性の問題がありましたが、VECTOR LABORATORIES社の独自のマイクロポリマーは、この浸透性の問題を改善しています。また、抗体あたりの酵素密度を高め、ターゲット結合時の立体的な干渉が最小限に押さえられています。少ないステップ数で、高感度かつ低バックグラウンドの染色を可能にします。

酵素標識ポリマー法を用いた免疫染色試薬ImmPRESS 操作法

図. ImmPRESS® Reagentの検出法概略



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ImmPRESS®シリーズのラインナップ

品名をクリックすると各シリーズの製品記事をご覧いただけます。

ImmPRESS®シリーズの大定番:ImmPRESS® Reagent

ImmPRESS® Reagentは、ImmPRESS®シリーズの核となるVECTOR LABORATORIES社独自の酵素マイクロポリマーが結合した二次抗体です。ブロッキング用正常血清とセットになっており、高感度かつ低バックグラウンドの免疫染色が可能です。一次抗体の免疫動物や吸収処理などに応じて幅広いラインナップがあります。


ImmPRESS Reagentの免疫組織染色像と製品画像

キット内容:

  • 酵素マイクロポリマー結合二次抗体
    (ImmPRESS® reagent)
  • ブロッキング用正常血清

Mouse on Mouseにはこちら:M.O.M.® ImmPRESS® Peroxidase Polymer Kit

M.O.M.® ImmPRESS®は、マウスモノクローナルの一次抗体を用いたマウス組織の免疫染色に最適化されています。特別に調製されたブロッキング試薬が内在性マウスイムノグロブリンの非特異的染色を抑え、バックグラウンドを減少させます。


M.O.M. ImmPRESSの免疫組織染色像と製品画像

キット内容:

  • M.O.M.®酵素マイクロポリマー結合二次抗体
    (M.O.M.® ImmPRESS® reagent)
  • M.O.M.® mouse Igブロッキング試薬
  • ブロッキング用正常血清

シグナル増幅用抗体とのセット:ImmPRESS® Excel Amplified Staining Kit

ImmPRESS® Excelはシグナル増幅用抗体(Amplifier Antibody)がセットになった高感度キットです。Amplifier Antibodyを介することによって、より高感度な染色が可能です。


ImmPRESS Excelの免疫組織染色像と製品画像

キット内容:

  • 酵素マイクロポリマー結合二次抗体
    (ImmPRESS® excel polymer reagent)
  • ブロッキング用正常血清
  • シグナル増幅用抗体
  • 内在性酵素ブロッキング試薬
  • ImmPACT® DAB EqV基質

プレミックスされた二重染色用:ImmPRESS® Duet Double Staining Polymer Kit

ImmPRESS® Duetは、あらかじめ2種類の酵素標識マイクロポリマーを結合させた二次抗体を混合した二重染色用のキットです。免疫動物種がマウスとウサギ由来の一次抗体を同時に二重染色することができます。


ImmPRESS Duetの免疫組織染色像と製品画像

キット内容:

  • プレミックス酵素マイクロポリマー結合二次抗体
    (ImmPRESS® duet reagent)
  • ブロッキング用正常血清
  • 内在性酵素ブロッキング試薬
  • ImmPACT® DAB EqV基質
  • ImmPACT® Vector red基質

各種動物組織の染色に:ImmPRESS® VR Polymer Detection Kit

ImmPRESS® VRは、動物種共通の内因性組織要素の吸収処理を行った二次抗体を使用し、免疫染色時のバックグラウンドを抑えた動物組織用のポリマー試薬です。マウス、ラット、ウサギからイヌ、ネコ、そしてウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタまで 幅広い動物組織の染色に使用することができます。


ImmPRESS VRの免疫組織染色像と製品画像

キット内容:

  • 酵素マイクロポリマー結合二次抗体
    (ImmPRESS® reagent)
  • ブロッキング用正常血清

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FAQ

FAQ (クリックで開閉します)

Q-1. ImmPRESS® anti-mouse IgGポリマー試薬(#MP-7402)を用いて、同じ組織切片上の2種類の一次抗体(マウス由来)を一度に二重染色することできますか。
A-1. 二重染色は可能です。ただし、以下の点にご注意下さい。
1)まず初めに、異なる組織切片を用いてそれぞれ単一染色条件(一次抗体から基質発色まで)の最適化を推奨します。それぞれの染色条件が確立されたことを確認したうえで、同一切片上で一次抗体から発色までの操作を行い、二重染色します。
2)適切なコントラストと信頼性の高い標的抗原の局在を検出するため、異なるペルオキシターゼ基質を使用する必要があります。この手法は同一切片上で異なる発現性を示す細胞の検出や同じ細胞の異なる細胞小器官で発現している抗原の検出に最も再現性があり有効です。その他の注意事項に関してはA Guide to Multiple Antigen Labelingを併せてご参照下さい。


Q-2. 免疫動物がヤギの抗マウスおよび抗ウサギIgG ImmPRESS®ポリマー試薬と、免疫動物がウマの抗マウスおよび抗ウサギIgG ImmPRESS®ポリマー試薬の相違点を教えて下さい。
A-2. これらのキットは、感度や特性などの性能に関して特に違いはありません。ご実験にあわせて異なる免疫動物由来のImmPRESS®ポリマー試薬をお選びいただけます。


Q-3. 自動染色装置でImmPRESS®ポリマー試薬を使用することはできますか。自動染色装置へ使用する際のガイドラインやプロトコルはありますか。
A-3. はい、可能です。3種類の自動染色装置(Agilent/Dako Autostainer Plus、Leica Bond RxおよびVentana Discovery Ultra)とImmPRESS® HRPポリマー試薬の適合性について検証し、IHC検出に適していることを確認しています。ImmPRESS®ポリマー試薬とその酵素基質は、各社より提供されている推奨試薬と同等の染色結果が得られます。シグナル - ノイズ比を最適化させるため、ImmPRESS®ポリマー試薬のインキュベーション時間の短縮やインキュベーション後のバッファー洗浄回数の増加など、プロトコルを変更し最適化されている工程があります。詳細はUse of Vector Laboratories ImmPRESS® Polymer IHC Detection Reagents on Open Automated Staining Platformsをご確認下さい。 また、自動染色装置の使用例も併せてご覧下さい。


Q-4. ImmPRESS®ポリマー試薬はready-to-use仕様で提供されていますが、染色条件を最適化するためにどのパラメーターを変更することができますか。
A-4. ほとんどの細胞および組織染色において、染色条件の最適化のために手順を変更する必要はありません。短時間での染色、ホールマウント、あるいは厚い切片に用いる際には、主にインキュベーション時間や温度、インキュベーション間の洗浄の回数と時間を検討・変更する必要があります。


Q-5. ワンステップのペルオキシターゼポリマー検出システムと比較して、ImmPRESS® Excelキットを使用する利点を教えて下さい。
A-5. ImmPRESS® Excelキットは、未標識シグナル増幅用抗体を含む2段階のペルオキシターゼポリマー検出システムです。増幅用抗体を挟むことにより、HRP標識抗体の結合数が増え、感度を少なくとも3~4倍に高めることができます。このような感度の向上は、抗原の発現が弱い場合に有効であり、また高価な一次抗体を更に希釈して利用できますのでコスト節約に繋がります。ImmPRESS® Excelキットには増幅用抗体、希釈済みImmPRESS®ポリマー二次抗体、内在性酵素ブロッキング試薬、ブロッキング用血清、酵素基質(ImmPACT® DAB EqV)が含まれます。他の検出試薬と組み合わせてご使用いただくことも可能です。以下の文献ではImmPRESS® Excel AmplifierキットとImmPACT® NovaRED®を併用しています。

参考文献

  1. Siddiqui, Y.H.,et al., Oncogenesis, 6(1), e293(2017). PMID:28134934
  2. Tan, E.M.S.,et al., Front. Med., 4, 162(2017). PMID:29046873



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図解操作マニュアル等ダウンロード

酵素標識ポリマー法を用いた免疫染色試薬(ImmPRESS® Reagent)の図解操作マニュアルは下記画像をクリックすると入手できます。

ImmPRESS® Reagent
図解操作マニュアル
  ペルオキシダーゼ基質キット
図解操作マニュアル
ImmPRESS Reagentのフライヤー    ImmPRESS Reagent図解操作マニュアル    ペルオキシダーゼ基質キット図解操作マニュアル


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ImmPRESS® Reagent

ImmPRESS® Reagentの特長

  • ImmPRESS® Reagentは、VECTOR LABORATORIES社独自の酵素マイクロポリマーで、高活性かつ高密度の酵素と二次抗体が結合しています。
  • 巨大デキストランや高分子ポリマーを酵素ポリマーの骨格として用いたシステムに比べ、標的となる一次抗体に容易に結合するため、非特異的結合も低く抑えられています。その結果、低バックグラウンドで高感度な染色像が得られます。
  • ペルオキシダーゼ標識およびアルカリホスファターゼ標識の製品があります。いずれもアフィニティ精製済みの高品質な製品です。
  • 吸収処理済みの製品(Rat adsorbed:#MP-7422、Mouse adsorbed:#MP-7444、#MP-5444)もあります。
  • DAB基質、内在性酵素ブロッキング試薬およびウマ血清をセットにしたPLUSキット(#MP-7800、#MP-7801、#MP-7802)もあります。
  • 試薬は便利な滴下瓶に入っており、調製済みのため、希釈する必要はありません。
  • 15 mlで約75~150枚、50 mlで約250~500枚の組織切片を染色可能です。
  • 自動染色装置(オートステイナー)での使用実績もあります。

PLUSキット(ペルオキシダーゼ基質含む)以外にはペルオキシダーゼ基質およびアルカリホスファターゼ基質は含まれていません。Enzyme Substrates for Immunohistochemistryをご覧いただくか、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。

ImmPRESS® Reagentの製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

二次抗体
(一次抗体の免疫動物)
二次抗体の免疫動物 酵 素
ペルオキシダーゼ
(HRP)
アルカリホスファターゼ
(AP)
Anti-Rabbit Ig
(ウサギ)
Horse MP-7401 MP-5401
MP-6401
(Veterinary Reagent*1)
MP-7801
(PLUS Kit*2)
Goat MP-7451
Anti-Mouse Ig
(マウス)
Horse MP-7402 MP-5402
MP-7422
(Rat adsorbed*3)
MP-6402
(Veterinary Reagent*1)
MP-7802
(PLUS Kit*2)
Goat MP-7452
Universal
Anti-Mouse / Rabbit Ig
(マウス / ウサギ)
Horse MP-7500
MP-7800
(PLUS Kit*2)
Anti-Rat Ig
(ラット)
Goat MP-7404 MP-5404
MP-7444
(Mouse adsorbed*4)
MP-5444
(Mouse adsorbed*4)
Anti-Goat Ig
(ヤギ)
Horse MP-7405 MP-5405

*1 Veterinary Reagent:動物種共通の内因性組織要素で吸収済み。家畜、イヌ、ネコ、ウサギなどの動物組織の染色にお勧めです。詳細はImmPRESS® VR Polymer Detection Kitをご覧下さい。
*2 PLUS Kit:ブロッキング試薬、DAB基質をセットにしたキット製品です。
*3 Rat Adsorbed:ラットで吸収処理済み。
*4 Mouse Adsorbed:マウスで吸収処理済み。
マウス由来の一次抗体でマウス組織を染色される場合は、M.O.M.® ImmPRESS® Peroxidase Reagentをご使用下さい。

ImmPRESS® Reagentの使用例

ImmPRESS Reagentを用いた胸部組織の免疫組織染色

図. 胸部組織の免疫組織染色像
一次抗体:抗p53抗体
二次抗体:ImmPRESS® Reagent HRP(#MP-7401
基質(茶色):DAB
対比染色(青色):Hematoxylin QS(#H-3404


ImmPRESS Reagentを用いた胸部組織の免疫組織染色

図. 扁桃腺組織の免疫組織染色像
一次抗体:抗Ki63抗体
二次抗体:ImmPRESS® UNIVERSAL Reagent HRP(#MP-7500
基質(茶色):DAB
対比染色(青色):Hematoxylin QS(#H-3404


ImmPRESS Reagentを用いた小腸組織の免疫組織染色

図. 小腸組織の免疫組織染色像
一次抗体:抗Cytokeratin 8/18抗体
二次抗体:ImmPRESS® Reagent HRP(#MP-7452
基質(茶色):DAB
対比染色(青色):Hematoxylin QS(#H-3404

自動染色装置(オートステイナー)での使用実績

Dako社 Autostainer Plus、Leica社 Bond Rx、およびVentana社 Discovery Ultraで使用実績があります。
詳細はImmPRESS® Polymer IHC Detection Reagentの自動染色装置の使用例をご覧下さい。


ペルオキシダーゼ標識ポリマーImmPRESS® Reagentの価格

15 ml包装 (クリックで開閉します)

[在庫・価格 :2024年05月30日 00時00分現在]

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納期 文献数
ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig
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組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
別包装品 別包装品あり
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組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ヤギ血清添付。
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組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ヤギ血清添付。SKU:MP-7404-50
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組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。SKU:MP-7405-50
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ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig

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説明文 組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
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説明文 組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ヤギ血清添付。
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説明文 組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ヤギ血清添付。SKU:MP-7404-50
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ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig

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ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig, Goat, Peroxidase

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ImmPRESS-Alkaline Phosphatase Polymer Reagent, Anti-Rabbit IgG
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ImmPRESS-Alkaline Phosphatase Polymer Reagent, Anti-Mouse IgG
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組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。SKU:MP-5402-15
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組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5%正常ヤギ血清添付。
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ImmPRESS-Alkaline Phosphatase Polymer Reagent, Anti-Rabbit IgG

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免疫染色実験ガイド2019-2020 p.85

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ImmPRESS-Alkaline Phosphatase Polymer Reagent, Anti-Mouse IgG

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ImmPRESS-AP Anti-Rat IgG Reagent, made in goat

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ImmPRESS-AP Anti-Rat IgG (Mouse Adsorbed) Polymer Detection Kit, made in goat, Alkaline Phosphatse

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ImmPRESS-AP Anti-Goat IgG Polymer Detection Kit, made in horse, Alkaline Phosphatse

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ImmPRESS-AP Reagent, Anti-Rabbit Ig, Horse, Alkaline Phosphatase
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ImmPRESS-AP Reagent, Anti-Mouse, Horse, Alkaline Phosphatse
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ImmPRESS-AP Anti-Goat IgG Polymer Detection Kit, made in horse, Alkaline Phosphatse
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ImmPRESS-AP Reagent, Anti-Rabbit Ig, Horse, Alkaline Phosphatase

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別包装品 別包装品あり
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製品記事 免疫染色(免疫組織化学染色、IHC)選択ガイド
ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
免疫染色(IHC)用封入剤選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
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ImmPRESS-AP Reagent, Anti-Mouse, Horse, Alkaline Phosphatse

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説明文 組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5%正常ウマ血清添付。
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ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
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ImmPRESS-AP Anti-Goat IgG Polymer Detection Kit, made in horse, Alkaline Phosphatse

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ペルオキシダーゼ基質付きキット(ImmPRESS® PLUS Polymer Kit, Peroxidase)

ready-to-useタイプのImmPRESS® Reagentに、ブロッキング用ウマ血清、内在性酵素ブロッキング溶液、DAB基質をセットにした便利なキットです。

ImmPRESS PLUS Polymer Kit

ImmPRESS® PLUSキットの使用例

ImmPRESS<sup>®</sup> PLUS Polymer Kit染色例

図. 扁桃腺組織の免疫組織染色像
一次抗体:マウス抗Ki67モノクローナル抗体
二次抗体ImmPRESS® Horse Anti-Mouse IgG PLUS Polymer Kit(#MP-7802


ImmPRESS PLUS Polymer Kit染色例

図. 扁桃腺組織の免疫組織染色像
一次抗体:ウサギ抗CD3モノクローナル抗体
二次抗体::ImmPRESS® Horse Anti-Rabbit IgG PLUS Polymer Kit(#MP-7801


ImmPRESS PLUS Polymer Kit染色例

図. ヒト結腸組織の免疫組織染色像
一次抗体:抗Cytokeratin 8/18抗体
二次抗体::ImmPRESS® Horse Anti-Mouse/Rabbit IgG Polymer Kit(#MP-7800

ImmPRESS® PLUSキットのキット内容

ImmPRESS® PLUSキットのキット構成品の別売品については、それぞれの項目をクリックすると価格表をご覧になれます。

ImmPRESS® PLUSキットの価格

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IMMPRESS HORSE ANTI-RABBIT IgG PLUS, POLYMER KIT, Peroxidase 15ml
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組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Rabbit IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-rabbit IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7801-15
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製品記事 免疫染色(免疫組織化学染色、IHC)選択ガイド
ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
免疫染色(IHC)用封入剤選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
関連製品(対比染色液/ブロッキング試薬/コントロール/抗原賦活化溶液) - 免疫染色(IHC)特集
はじめての免疫染色
関連記事
IMMPRESS HORSE ANTI-MOUSE IgG PLUS, POLYMER KIT, Peroxidase 15ml
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Mouse IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-mouse IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7802-15
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ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
免疫染色(IHC)用封入剤選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
関連製品(対比染色液/ブロッキング試薬/コントロール/抗原賦活化溶液) - 免疫染色(IHC)特集
はじめての免疫染色
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ImmPRESS Universal PLUS Polymer Kit, Peroxidase (Horse Anti-Mouse/Rabbit IgG) 15ml
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Mouse/Rabbit IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-mouse/rabbit IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7800-15
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ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
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IMMPRESS HORSE ANTI-RABBIT IgG PLUS, POLYMER KIT, Peroxidase 15ml

文献数: 0

説明文 組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Rabbit IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-rabbit IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7801-15
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ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
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IMMPRESS HORSE ANTI-MOUSE IgG PLUS, POLYMER KIT, Peroxidase 15ml

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説明文 組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Mouse IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-mouse IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7802-15
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ImmPRESS® Reagent(ポリマー法)選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
免疫染色(IHC)用封入剤選択ガイド - 免疫染色(IHC)特集
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ImmPRESS Universal PLUS Polymer Kit, Peroxidase (Horse Anti-Mouse/Rabbit IgG) 15ml

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説明文 組織切片約150枚分。ImmPRESS Horse Anti-Mouse/Rabbit IgG Reagentに,ブロッキング用ウマ血清,内在性酵素ブロッキング溶液,DAB基質をセットにした便利なキット。キット内容:ImmPRESS horse anti-mouse/rabbit IgG polymer reagent (15 ml), Normal horse serum for blocking (ready-to-use) (15 ml), BLOXALL blocking solution(15 ml), ImmPACT DAB EqV reagent 1/2。SKU:MP-7800-15
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