免疫染色（IHC）用オートステイナーへの適用の検討 ImmPRESS® Polymer IHC Detection Reagentの自動染色装置の使用例
掲載日情報：2019/11/29 現在Webページ番号：69199
Vector Laboratories社の酵素標識ポリマー法を用いた免疫染色（IHC）試薬ImmPRESS® Polymer IHC Detection Reagentは、Dako社、Leica社、Ventana社の自動染色装置（オートステイナー）への使用実績があります。
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- 使用例
- 自動染色装置（オートステイナー）のプロトコル例
- Vector Laboratories社の免疫染色試薬
- Dako社 Autostainer Plus
- Leica社 Bond Rx
- Ventana社 Discovery Ultra
- BioCare社 intelliPATH FLXプラットフォーム
- 引用文献
- アプリケーションノートダウンロード
- 価格
使用例
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自動染色装置（オートステイナー）のプロトコル例
自動染色装置の種別をクリックすると、それぞれの適用例をご覧いただけます。
| 社名 | Agilent/Dako | Leica | Ventana | BioCare |
|---|---|---|---|---|
| 自動染色（オートステイナー）プラットフォーム名 | Autostainer Plus | Bond Rx | Discovery RUO Universal Automated | intelliPATH instrument |
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Vector Laboratories社の免疫染色試薬
品名をクリックすると商品の詳細を、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 製品概要 | 包装 | 商品コード |
|---|---|---|---|
| BLOXALL® (HRP/AP Enzyme Quencher) | 内在性アルカリホスファターゼ（AP）活性とペルオキシダーゼ（PO）活性の両者を一度に不活性化できる酵素活性ブロッキング溶液。 | 100 ml | SP-6000 |
| ImmPRESS® HRP Anti-Rabbit IgG Polymer with 2.5% Normal Horse Serum | 二次抗体を結合させた酵素標識マイクロポリマー法を用いた免疫染色プラットフォーム。わずか2ステップで、高感度かつ低バックグラウンドの免疫染色を行える。 | 15 ml | MP-7401-15 |
| 50 ml | MP-7401-50 | ||
| ImmPACT® DAB EqV Substrate | 2種類の溶液を等量混合して使用する、高感度のペルオキシダーゼ基質。3～5分で鮮明な濃茶色を呈する。 | 1 kit | SK-4103 |
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Dako社 Autostainer Plus
Dako社 EnVision Flexとの比較例
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionを使用した場合、Dako EnVision Flex試薬と同等の染色度（矢印、褐色のDAB染色部）を得るために必要な一次抗体の使用量をかなり低減できた。一方で、一次抗体を用いず、二次抗体のみでネガティブ染色を行ったところ、どちらの場合もバックグラウンドは検出されなかった。
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionの改変プロトコル例
| ワークフロー | ImmPRESS®用改変プロトコル例 | Dako社推奨プロトコル |
|---|---|---|
| 脱パラフィン／抗原賦活化 | PT Link 3 in 1 Module | |
| バッファー洗浄 | Dako Envision Flex wash | |
| ペルオキシダーゼブロッキング | Vector社 BLOXALL®; 10分間 | Dako Envision Flex Block; 10分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄（×2） | |
| タンパク質のブロッキング | Vector 2.5% Horse Serum, 20分間 | Dako Protein Block; 10分間 |
| バッファー洗浄 | 風乾 | |
| 一次抗体インキュベーション | Rabbit Anti-vWF; 30分間 (Horse Serum as diluent) | Rabbit Anti-vWF; 30分間 (Dako antibody diluent) |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄（×2） | |
| 二次抗体インキュベーション | Vector ImmPRESS® HRP anti-rabbit IgG; 7.5分間 | Dako Envision Flex anti-rabbit HRP; 20分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄（×5） | 自動洗浄（×2） |
| 基質を加えて発色 | Vector ImmPACT® DAB EqV; 5分間 | Dako Envision Flex DAB; 10分間 |
| 洗浄 | dH2O（×3） | |
| 対比染色 | ヘマトキシリン＋H2O洗浄 | |
| 脱水／透徹処理（マニュアル） | 90％EtOH → 99％EtOH → キシレン | |
| 封入剤処理（マニュアル） | DePex | |
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Leica社 Bond Rx
Leica社 Bond Polymer Refine Detectionとの比較例
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionを使用した場合、一次抗体濃度が等濃度でLeica社 Bond Polymer Refine Detectionプラットフォームと同等の染色度が得られた。一方で、一次抗体を用いず、二次抗体のみでネガティブ染色を行ったところ、どちらの場合もバックグラウンドは検出されなかった。
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionの改変プロトコル例
| ワークフロー | ImmPRESS®用改変プロトコル例 | Leica社推奨プロトコル |
|---|---|---|
| 脱パラフィン／抗原賦活化 | Leica ER1 solution; 20分間, 95 ℃(Dewax/Retrieval) | |
| バッファー洗浄 | Leica/Bond wash | |
| ペルオキシダーゼブロッキング | Vector社 BLOXALL®; 10分間 | Leica Refine Block; 8分間 |
| バッファー洗浄 | Leica/Bond washes (2×2分間 + 1×brief rinse) | |
| タンパク質のブロッキング | Vector 2.5% Horse Serum, 20分間 | Dako Protein Block; 20分間 |
| バッファー洗浄 | なし | |
| 一次抗体インキュベーション | Rabbit Anti-vWF; 30分間 (Horse Serum as diluent) | Rabbit Anti-vWF; 30分間 (Leica antibody diluent) |
| バッファー洗浄 | Leica/Bond washes (2× 2分間 + 1×brief rinse) | |
| 二次抗体インキュベーション | Vector ImmPRESS® HRP Anti-Rabbit IgG; 7.5分間 | Leica Polymer Refine Anti-Rabbit HRP; 20分間 |
| バッファー洗浄 | Leica/Bond washes (5×2分間 + 1 rinse + 1×dH20) | |
| 基質を加えて発色 | Vector ImmPACT® DAB EqV; 5分間 | Leica Polymer Refine DAB; 10分間 |
| 洗浄 | 3×dH2O | 4×dH2O + Bond wash |
| 対比染色 | ヘマトキシリン＋H2O洗浄 | |
| 脱水／透徹処理（マニュアル） | 90％EtOH → 99％EtOH → キシレン | |
| 封入剤処理（マニュアル） | DePex | |
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Ventana社 Discovery Ultra
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionを使用した場合、一次抗体濃度が等濃度でVentana社 Discovery Ultraプラットフォームと同等の染色度が得られた。一方で、一次抗体を用いず、二次抗体のみでネガティブ染色を行ったところ、どちらの場合もバックグラウンドは検出されなかった。
Ventana社 OmniMapとの比較例
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionの改変プロトコル例
| ワークフロー | ImmPRESS®用改変プロトコル例 | Ventana社推奨プロトコル |
|---|---|---|
| 脱パラフィン／抗原賦活化 | Ventana Cell Conditioning Solution (CC2); 32分間 | |
| バッファー洗浄 | Ventana Buffer | |
| ペルオキシダーゼブロッキング | Vector BLOXALL®; 8分間 | Ventana Inhibitor CM; 8分間 |
| バッファー洗浄 | Program specific | |
| タンパク質のブロッキング | Vector 2.5% Horse Serum, 20分間 | なし |
| バッファー洗浄 | Program specific | なし |
| 一次抗体インキュベーション | Rabbit Anti-vWF; 30分間(Horse Serum as diluent） | Rabbit anti-vWF; 30分間 (Leica antibody diluent) |
| バッファー洗浄 | Program specific | |
| 二次抗体インキュベーション | Vector ImmPRESS® HRP Anti-Rabbit IgG; 32分間 | Ventana OmniMap Anti-Rabbit HRP; 16分間 |
| バッファー洗浄 | Program specific | |
| 基質を加えて発色 | Vector ImmPACT® DAB EqV; 4分間 | ChromoMap DAB; 4分間 |
| 洗浄 | Program Specific | |
| 対比染色 | ヘマトキシリン | |
| 脱水／透徹処理（マニュアル） | 90％EtOH → 99％EtOH → キシレン | |
| 封入剤処理（マニュアル） | DePex | |
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BioCare社 intelliPATH FLXプラットフォーム
BioCare社 intelliPATH FLXは、すべての試薬が使用できるようなフレキシブルなプラットフォームになっています。Vector Laboratories社は、この機器を研究目的ではなく、製品開発に使用しています。以下の使用例は、その標準的なプロトコルを参考例として示したものです。
BioCare社 intelliPATH FLXプラットフォームを用いた場合の使用例
Vector ImmPRESS® Polymer/ImmPACT® DAB Detectionの改変プロトコル例
| ワークフロー | ImmPRESS®用改変プロトコル例 |
|---|---|
| 脱パラフィン／抗原賦活化 | Offline Pressure Cooker using Antigen Unmasking Solution (#H-3300), 1分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄 (1×), 5分間 (バッファー = PBS + 0.05% Tween 20, pH 7.4 ) |
| ペルオキシダーゼブロッキング | Vector BLOXALL®; 10分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄(1×), 5分間 |
| タンパク質のブロッキング | Vector 2.5% Horse Serum, 20分間 |
| バッファー洗浄 | 風乾 |
| 一次抗体インキュベーション | 30分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄(1×), 各5分間 |
| 二次抗体インキュベーション | Vector ImmPRESS® HRP Anti-Rabbit IgG; 30分間 |
| バッファー洗浄 | 自動洗浄(2×), 5分間 |
| 基質を加えて発色 | Vector ImmPACT® DAB, 8分間 |
| 洗浄 | 自動洗浄(1×), 5分間 |
| 対比染色 | なし／オプション |
| 脱水／透徹処理（マニュアル） | 95％EtOH → 100％EtOH → キシレン |
| 封入剤処理（マニュアル） | Vectamount |
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引用文献
- Hercher, C., et al., J. Psychiatry Neurosci., 39(6), 376～385 (2014).
- Ma, Z., et al., Diagnostic Pathology, 12, 69 (2017).
- Habiel, D. M., et al., Scientific Reports, 7, 15444 (2017).
- Brajkovic, S., et al., Lab. Invest., 97(8), 983～991 (2017).
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アプリケーションノートダウンロード
下の画像をクリックすると、ImmPRESS® Polymer IHC Detection Reagentの各社オートステイナーへの使用例の詳細（PDF）をご覧いただけます。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月27日 00時00分現在]
[在庫・価格 ：2024年04月27日 00時00分現在]
ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig
文献数： 0
- 商品コード：MP-7401-15
- メーカー：VEC
- 包装：15ml
- 価格：¥38,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
組織切片約150枚分。ブロッキング用2.5％正常ウマ血清添付。 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,凍結禁止 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
ニュース2023年2月15日号 p.11 免疫染色実験ガイド2019-2020 p.69
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| 製品記事 |
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ImmPRESS Reagent, Anti-Rabbit Ig
文献数： 0
- 商品コード：MP-7401-50
- メーカー：VEC
- 包装：50ml
- 価格：¥101,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
組織切片約500枚分。ブロッキング用2.5％正常ウマ血清添付。 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,凍結禁止 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
免疫染色実験ガイド2019-2020 p.69
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Endogenous Peroxidase and Alkaline Phosphatase Blocking Solution, BLOXALL
文献数： 5
- 商品コード：SP-6000
- メーカー：VEC
- 包装：100ml
- 価格：¥32,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
内在性アルカリホスファターゼ（AP）活性およびペルオキシダーゼ（PO）活性を一度に不活性化できるReady-to-useの酵素活性ブロッキング溶液。SKU：SP-6000-100 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2017年12月15日号 p.20 免疫染色実験ガイド2019-2020 p.130 ニュース2023年4月1日号 p.10
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DAB EqV Peroxidase Substrate Kit, ImmPACT (for 400ml)
文献数： 0
- 商品コード：SK-4103
- メーカー：VEC
- 包装：1set
- 価格：¥112,000
- 在庫：1個
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
免疫組織染色およびナイロン／PVDFメンブレンでのウエスタンブロッティングに使用可能。従来のDAB基質（#SK-4100）より高感度で鮮明な発色を示す。400 mlの基質溶液を調製するのに十分なストック溶液を含む。濃茶色に染色。SKU：SK-4103-400 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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DAB EqV Peroxidase Substrate Kit, ImmPACT (for 100ml)
文献数： 0
- 商品コード：SK-4103-100
- メーカー：VEC
- 包装：1set
- 価格：¥35,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||||||
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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Antigen Unmasking Solution
文献数： 2
- 商品コード：H-3300
- メーカー：VEC
- 包装：250ml
- 価格：¥39,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
ホルマリン固定のパラフィン包埋した組織から,高温処理法を用いて抗原を露出させるのに有効な,クエン酸をベースにした溶液。SKU：H-3300-250 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2017年12月15日号 p.18 免疫染色実験ガイド2019-2020 p.122
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VectaFluor R.T.U. DyLight標識二次抗体シリーズ Antigen Unmasking Solution（Vector社） 免疫染色(免疫組織化学染色、IHC)選択ガイド 関連製品(対比染色液／ブロッキング試薬／コントロール／抗原賦活化溶液) - 免疫染色(IHC)特集 はじめての免疫染色 |
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製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。