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免疫組織染色用HRP/AP酵素基質(Vector Laboratories社) Enzyme Substrates for Immunohistochemistry

掲載日情報:2025/05/13 現在Webページ番号:759

Vector Laboratories社では、ペルオキシダーゼ(HRP)およびアルカリホスファターゼ(AP)検出システム用の多くの酵素基質キットを提供しています。基質キットの試薬はすべて簡便なスポイトボトルで提供され、ImmPACT® Substrate Kitには最適化された希釈液も含まれています。
検出システムに適合する基質をご選択下さい。

免疫組織染色例

画像をクリックすると画像の説明、品名をクリックすると対象商品の特性、商品コード(#以下の英数字)をクリックすると価格表をご覧いただけます。

HRP基質の使用例(二次抗体:ImmPRESS® Reagent(HRP)使用)

HRP-A

A: 色:Brown

HRP-B

B: 色:Gray-Black

HRP-C

C: 色:Red

HRP-D

D: 色:Purple

HRP-E

E: 色:Blue-gray

HRP-F

F: 色:Red

AP基質の使用例(二次抗体:ImmPRESS®-AP Reagent使用)

AP-A

A: 色:Magenta

AP-B

B: 色:Blue

AP-C

C: 色:Indigo

DABとImmPACT® DABの比較

DAB

色:Brown

ImmPACT DAB

色:Brown

ヒト扁桃腺の連続切片におけるCD20の免疫組織染色像

ヒト扁桃腺組織切片におけるCD20の染色にマウス抗CD20抗体、および二次抗体としてImmPRESS® Anti-Mouse HRP Polymer Kitを使用した。次に、発色基質として標準のDAB(#SK-4100)、またはImmPACT® DAB(#SK-4105)を用い、他は同条件で免疫組織染色を実施した。ImmPACT® DABは、標準のDABに比べてより発色度が向上する。そのため、低発現の抗原の検出、また一次抗体のさらなる希釈による抗体の節約、周囲の組織要素とのより高いコントラスト、および標的抗原の染色をより鮮明にすることが可能となる。


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免疫染色(IHC)用製品選択ガイド

目的に応じた免疫染色(IHC)用製品をご検索いただけます。

免疫染色特集トップ
免疫染色キット(ABC法) 免疫染色キット(ポリマー法) HRP / AP基質 封 入 剤
対比染色液 ブロッキング用正常血清 ネガティブコントロール 抗原賦活化溶液


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免疫組織染色における酵素基質による感度の比較表

HRPの基質はImmPRESS® (HRP) Polymer Detection Reagent、APの基質はAPの基質はImmPRESS® (AP)Polymer Detection Reagentを用いて免疫染色を行った際の感度を比較したものです。図中のVector Laboratories社製品の各品名をクリックすると、詳細な製品情報をご覧いただけます。

免疫組織染色における酵素基質による感度の比較表
Vector SG ImmPACT SG DAB with Nickel DAB ImmPACT DAB ImmPACT DAB EqV Vector VIP ImmPACT VIP Vector NovaRED ImmPACT NovaRED AEC ImmPACT AEC ImmPACT AMEC Red Vector Red ImmPACT Red Vector Blue BCIP/NBT Vector Black

* AECとAMEC基質は、水溶性封入剤を使用する必要があります。
** インキュベーション時間をより長くすることで、感度が向上します。

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免疫組織染色における多重染色ガイド

確立された二次検出システムと酵素基質の組み合わせを免疫組織化学(IHC)で使用することにより、同じ組織切片で発現する2つ以上の標的抗原を確実かつ再現性よく可視化することができます。Vector Laboratories社のラボ担当者による長年にわたる勤勉な研究開発をもとに、IHCを初めて使用する研究者、複数の抗原標識を含むIHCのアプリケーションを拡張する研究機関、および同じ組織切片での二重または三重抗原染色を合理化する方法を探している研究者を支援するためのリソースとして作成されました。

二重および三重抗原染色には別法もあります。しかし、左下のパンフレットに記載されている手順と製品は、標的抗原の明確ではっきりした局在性が示されます。左下の画像をクリックすると、詳細をご覧いただけます。

IHC Multiplexing Guide

IHC Multiplexing Guide

免疫染色(免疫組織化学、IHC)特集

免疫染色実験ガイドカタログバナー

特に明記されていない限り、このパンフレットに掲載されているすべての画像は、Vector Laboratories社内で同じ手順を使用して作製されたものです。

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推奨される二重染色の組み合わせ

2つの着色された沈殿物の順序は、染色切片の各抗原の品質、色、および標識パターンに大きく影響する可能性があります。以下の酵素基質の組み合わせチャートは、最適な多重標識の参照用として作製されたものです。本チャートに従い、最適化された標識方法を用いることで標識反応後に明瞭な色が視認できます。各商品コード(SK-xxxx)をクリックすると、詳細な製品情報をご覧いただけます。

二重染色における基質間の互換表
SK-5105 SK-5100 SK-5300 SK-5400 SK-4605 SK-4600 SK-4105 SK-4103 SK-4100 SK-4100 SK-4805 SK-4800 SK-4705 SK-4700 SK-4205 SK-4285 SK-4200 SK-5105 SK-5100 SK-5300 SK-5400 SK-4605 SK-4600 SK-4105 SK-4103 SK-4100 SK-4100 SK-4805 SK-4800 SK-4705 SK-4700 SK-4205 SK-4285 SK-4200

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製品ラインナップ

ペルオキシダーゼ(HRP)用基質選択表、価格

商品コードをクリックすると各製品の価格表、品名をクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。
永久封入が可能な封入剤をお求めの方は、EcoMount Mounting Mediumをご覧下さい。

基質品名 呈色 商品コード 対応顕微鏡 VectaMount® Mounting Medium 色素沈着
のある組織
多重
染色
熱耐性
明視野 暗視野 電子 蛍光 スペクトル
画像解析
AQ
水溶性
#H-5501
Permanent
非水溶性
#H-5000
(販売終了品)
Express
非水溶性
#H-5700-60
Vector DAB
+Ni
Gray-Black SK-4100
Vector DAB Brown
ImmPACT®
DAB
Brown SK-4105
ImmPACT®
DAB EqV
Brown SK-4103
Vector VIP Purple SK-4600
ImmPACT®
VIP
Purple SK-4605
Vector SG Blue-Gray SK-4700
ImmPACT® SG Blue-Gray SK-4705
Vector®
NovaRED®
Red SK-4800
ImmPACT®
NovaRED®
Red SK-4805
Vector AEC Red SK-4200
ImmPACT®
AEC
Red SK-4205
ImmPACT®
AMECRed
Red SK-4285
TMB Blue SK-4400

アルカリフォスファターゼ(AP)用基質選択表、価格

商品コードをクリックすると各製品の価格表、品名をクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。
永久封入が可能な封入剤をお求めの方は、EcoMount Mounting Mediumをご覧下さい。

基質品名 呈色 商品コード 対応顕微鏡 VectaMount® Mounting Medium 色素沈着
のある組織
多重
染色
熱耐性
明視野 暗視野 電子 蛍光 スペクトル
画像解析
AQ
水溶性

#H-5501
Permanent
非水溶性

#H-5000
(販売終了品)
Express
非水溶性

#H-5700-60
Vector Red Magenta SK-5100
ImmPACT®
Vector Red
Magenta SK-5105
Vector Blue Blue SK-5300
Vector Black Brown-Black SK-5200
BCIP/NBT Indigo SK-5400


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比較例

HRP基質とAP基質を用いた染色像の比較

一般的に、HRP基質は、AP基質と比較してより鮮明で密度の高い反応生成物(沈殿物)を生成します。この特性は、標的が細胞内に点状で発現している場合、あるいは非常に明確な局在が求められる場合において有用です。一方で、AP基質の沈殿物はより拡散し、半透明です。標的抗原が広範囲に発現している場合や、その下にある組織構造を可視化したい場合に有用です。

小腸の免疫組織染色像

小腸の免疫組織染色像

HRP基質は濃く沈着しており、それぞれの標的抗原が鮮明に局在しているのがわかる。

メラノーマの免疫組織染色像

メラノーマの免疫組織染色像

組織中の褐色色素との色彩コントラストにおいて、AP基質はより透明に見え、その下にある組織構造を詳細に観察することができる。

図をクリックすると拡大します(🔍)


DAB(HRP)基質の感度の比較

一次抗体に抗CD20抗体(1:300希釈)、二次抗体にImmPRESS®-HRP Anti-Mouse IgG(#MP-7402)、検出にImmPACT® DAB(#SK-4105)および他社DAB基質を用い、ヒト扁桃腺(FFPE連続切片)の免疫組織染色を行った。
ImmPACT® DABは、他社DAB基質と比較して、バックグラウンドが低かった。

ImmPACT DAB A社DAB基質 B社DAB基質
ImmPACT DAB A社DAB基質 B社DAB基質
C社DAB基質 D社DAB基質 E社DAB基質
C社DAB基質 D社DAB基質 E社DAB基質

図をクリックすると拡大します(🔍)


ImmPACT® DAB(#SK-4105)は他のDAB基質と比較して高感度であるため、一部の標的抗原において、一次抗体を2~4倍希釈しても適切な染色強度が得られる可能性があります。そのため、長期的な使用により免疫組織染色に要するコストの大幅な節約が期待できます。

DAB(HRP)基質の感度の比較

図をクリックすると拡大します(🔍)


Red(AP)基質の感度の比較

一次抗体に抗サイトケラチン抗体(1:250希釈)、二次抗体にImmPRESS®-AP Anti-Mouse IgG(#MP-5402)、検出にImmPACT® Vector Red(#SK-5105)および他社AP基質を用い、ヒト前立腺(FFPE連続切片)の免疫組織染色を行った。
ImmPACT® Vector Redは他社AP基質と比較して、バックグラウンドをほとんど発生させることなく、最も堅牢で鮮明な染色強度(最高感度)を示した。

ImmPACT Vector Red A社AP基質 B社AP基質①
B社AP基質② C社AP基質 D社AP基質

図をクリックすると拡大します(🔍)


希釈液の安定性の比較

ImmPACT® DAB(#SK-4105)は安定性が高く基質を用事調整する必要がないため、労力が省け、利便性の向上や廃棄物の削減、加えてアッセイの再現性の向上に寄与します。特に多くのスライドの処理や、マニュアルや自動染色プラットフォームで免疫組織染色を実施する場合に有用です。

希釈液(使用濃度)の安定性の比較


時間経過とともにバックグラウンド染色の増加、およびS/N比の減少が見られた。


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操作方法のガイド

動画編

DAB

ImmPACT® DAB

Vector® NovaRED®

Vector VIP

Vector SG

AEC

ペルオキシダーゼ基質キット(HRP) 図解操作マニュアル

下図をクリックすると、ペルオキシダーゼ基質キット(HRP) 図解操作マニュアルをご覧いただけます。

HRP-1

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ギャラリー

画像をクリックすると拡大図とキャプションをご覧いただけます。

Expressing the Art of Life Sciences with Immunohistochemistry

二重染色例

ImmPRESS® HRP Polymer Reagents × HRP substrates

HRP-1
HRP-2
HRP-3
HRP-4
HRP-5
HRP-6

ImmPRESS® HRP/AP Polymer Reagents × HRP/AP substrates

HRP/AP-1
HRP/AP-2
HRP/AP-3
HRP/AP-4

ImmPRESS® AP Polymer Reagents × AP substrates

AP-1

VECTASTAIN Elite ABC HRP Kit × HRP substrates

VE-HRP-1
VE-HRP-2
VE-HRP-3
VE-HRP-4

VECTASTAIN ABC AP/HRP Kit × AP/HRP substrates

VE-HRP-1
V-AP/HRP-2
V-AP/HRP-3
V-AP/HRP-4

VECTASTAIN Universal ABC AP Kit × 2 AP substrates

VU-AP-1
VU-AP-2

VECTASTAIN ABC AP Kit/ImmPRESS® HRP Reagent × AP/HRP substrates

VE-AP/ImmPRESS HRP-1
VE-AP/ImmPRESS HRP-2
VE-AP/ImmPRESS HRP-3
VE-AP/ImmPRESS HRP-4
VE-AP/ImmPRESS HRP-5
VE-AP/ImmPRESS HRP-6

M.O.M Peroxidase Kit × 2 HRP substrates

MOM-1
MOM-2

三重染色例

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。