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RNA試料中のN6-メチルアデノシン(m6A)を定量するキット EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kits

掲載日情報:2022/03/08 現在Webページ番号:8593

ELISAに類似した方法を用いて、様々な生物またはウイルスから分離したRNA中のN6-メチルアデノシン(m6Aまたは6mA)を、比色法または蛍光法により簡便、迅速かつ高感度で定量できるキットです。

DNA中のN6-メチルアデノシン(m6A)を定量するキットについては、MethylFlash m6A DNA Methylation ELISA Kit(#P-9010)をご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

様々な試料(200 ng)中のm6A RNAメチル化の定量例

様々な試料(200 ng)中のm6A RNAメチル化の定量例

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N6-メチルアデノシン(m6A:N6-methyladenosine)とは

N6-メチルアデノシン(m6A)は、真核生物において最も一般的かつ豊富に存在するRNA分子の修飾です。m6A修飾は、メチルトランスフェラーゼ複合体METTL3によって触媒され、α-ケトグルタル酸(α-KG)およびFe2+に依存し、最近発見されたm6A脱メチル化を触媒するFTOとALKBH5のm6A RNAデメチラーゼによって除去されます。METTL3、FTOおよびALKBH5は、発達、代謝から受精能に至るまでの多くの生物学的過程において重要な役割を果たしています。m6AはすべてのRNA塩基メチル化の80%以上を占め、様々な種に存在しています。m6Aは主にmRNAに分布し、tRNA、rRNA、snRNAなどのノンコーディングRNAにも存在しています。mRNA転写物中のm6Aの相対的存在量は、スプライシング、核外輸送、翻訳能力および安定性およびRNA転写などのRNA代謝プロセスに影響を及ぼします。m6A RNAメチラーゼおよびデメチラーゼの欠陥によるm6Aメチル化レベルの異常により、RNAの機能不全をもたらし、肥満などの疾患を引き起こす可能性があります。RNA上の動的かつ可逆的な化学的m6A修飾は、新規のエピジェネティックマーカーとしても役立つ可能性があります。したがって、m6A RNAメチル化レベルやRNA転写産物分布の理解は、疾患の診断および治療にも有益と考えられます。

m6Aの可逆的メチル化反応

mRNAにおけるm6Aの可逆的メチル化反応

Niu, Y., et al., "N6-methyl-adenosine (m6A) in RNA: an old modification with a novel epigenetic function", Genomics, Proteomics & Bioinformatics, 11(1), 8~17 (2013). [PMID:23453015]

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特長

  • ストリップウェルプレートを使用するため、マニュアル操作と自動化処理のいずれにも適しています。
  • 特殊なBinding solutionにより、>70 ntのRNAがウェルに結合します(mRNAやncRNA(tRNA, rRNA, snRNA)など)。
  • 測定に必要なRNA試料量:100~300 ng(200 ngを推奨)

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製品の種類

検量線をクリックすると拡大図、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit
測定方法 Colorimetric(比色) Fluorometric(蛍光)
検量線例 EpiQuik m6A RNA Methylation Colorimetric Quantification Kit(#P-9005)検量線例

図をクリックすると拡大します(拡大図

EpiQuik m6A RNA Methylation Fluorometric Quantification Kit(#P-9008)検量線例

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測定波長 450 nm 励起 530 nm/蛍光 590 nm
アッセイ数 48 reactions 96 reactions 48 reactions 96 reactions
商品コード P-9005-48 P-9005-96 P-9008-48 P-9008-96
測定試料 哺乳動物、植物、真菌類、細菌、ウイルス由来の全RNA
検量線範囲 0.01~0.5 ng/μl
検出感度 10 pg 5 pg
測定時間 3時間45分
使用文献
(メーカー製品ページ)
EPG_logo EPG_logo
キット内容 Wash buffer
Binding solution
Negative control
Positive control
Capture antibody
Detection antibody
Enhancer solution
Developer solution
Stop solution
Fluoro developer
Fluoro enhancer
Dilution buffer
8-well assay strips

使用文献情報の閲覧方法のご案内

メーカーサイトの各製品情報のページの上部「Citations」または中央の「Product Citations」のタブをクリックすると、製品の最新の使用文献情報をご覧いただけます。

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操作方法概略

動画による操作方法解説

ワークフロー

操作方法概略

EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kitの操作方法概略

  1. total RNAを分離する。
  2. ウェルにRNAを結合させる。
  3. ウェルを洗浄後、捕捉抗体を加える。
  4. ウェルを洗浄後、検出抗体とエンハンサーを加える。
  5. EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit(Colorimetric(#P-9005):発色基質を加え、吸光度(OD 450 nm)を測定する。
    EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit(Fluorometric(#P-9008):蛍光基質を加え、蛍光強度(530ex/590em nm)を測定する。

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FAQ

Q-1. mRNAに使用できますか?

A-1. はい。mRNA、およびノンコーディングRNA(tRNA、rRNA、snRNA)の両方に使用することができます。


Q-2. 使用するRNAはどれくらいの品質が必要ですか?

A-2. 使用するRNAは、260/280比が>2.0で、DNAのコンタミネーションが最小限か、ほとんど含んでいない高純度のものを使用する必要があります。残留DNA除去のため、RNA溶出後にDNaseⅠ処理を行う場合があります。


Q-3. 使用に適したRNA精製方法を教えて下さい。

A-3. RNAの精製には、任意の方法を使用することができます。Epigentek社では、哺乳動物の細胞・組織からカラムまたは磁性ビーズを用いて高品質なtotal RNAを40分以内で簡便に抽出・精製できるEpiQuik RNA Isolation Kitシリーズをお勧めします。


Q-4. RNAの濃縮は必要ですか?

A-4. 1回あたり、total RNA量が100~300 ngの範囲であれば濃縮は必要ありません。1回あたりtotal RNAで200 ngが最適な量です。


Q-5. EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit(Colorimetric(#P-9005)のポジティブコントロールをMethylflash m6A DNA Methylation ELISA Kit(Colorimetric(#P-9010)に使用できますか?

A-5. いいえ。EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit(Colorimetric(#P-9005)に含まれているポジティブコントロールは、濃度が異なるためにMethylflash m6A DNA Methylation ELISA Kit(Colorimetric(#P-9010)には使用できません。


Q-6. MethylFlash m6A DNA Methylation ELISA Kit(Colorimetric(#P-9010)とEpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit(Colorimetric(#P-9005)のBinding solutionは同じものですか?

A-6. はい、その通りです。

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関連製品

品名をクリックすると製品の詳細を、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 測定
対象
測定法 測定波長 商品コード 測定数 製品概要
MethylFlash 5-mC RNA Methylation ELISA Easy Kit 5-mC 蛍光 励起 530 nm
/蛍光 590 nm
P-9009-48 48 reactions 各種の生物試料から単離・精製した全RNA中の5-メチルシトシン (5-mC:5-methlcytosine)濃度をELISAと類似した測定原理を用いて蛍光法により定量するキット。
P-9009-96 96 reactions
EpiNext 5-mC RNA Bisulfite-Seq Easy Kit (Illumina) P-9007-12 12 reactions RNAバイサルファイト変換、ライゲーション、洗浄、サイズ選択およびライブラリー増幅までの一連の操作に必要なすべての試薬を含んだキット。
P-9007-24 24 reactions
EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit m6A 比色 450 nm P-9005-48 48 reactions ELISAに類似した方法を用いて、RNA試料中のN6-メチルアデノシン(m6A)を比色法または蛍光法により定量するキット。
P-9005-96 96 reactions
蛍光 励起530 nm/
蛍光590 nm
P-9008-48 48 reactions
P-9008-96 96 reactions
MethylFlash Urine N6-methyladenosine (m6A) Quantification Kit 比色 450 nm P-9015-48 48 reactions 競合EIA法により、尿中のm6Aを比色定量するキット。
P-9015-96 96 reactions
Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit 比色 450 nm P-9013-48 48 reactions 核抽出物またはFTOおよびALKBH5などの精製m6Aデメチラーゼを用いて、全m6Aデメチラーゼの酵素活性/阻害活性を比色法により測定するキット。
P-9013-96 96 reactions
Methylamp RNA Bisulfite Conversion Kit P-9003-050 50 reactions 試料RNAをバイサルファイト処理(亜硫酸水素塩処理)し、迅速に非メチル化シトシンをウラシルに変換するキット。

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価格表

[在庫・価格 :2024年04月19日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
m6A RNA Methylation Quantification Kit, Colorimetric, EpiQuik(48 reactions)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 131
説明文
ELISAに類似した方法を用いて,様々な生物またはウイルスから分離したRNA中のN6-メチルアデノシン(m6Aまたは6mA)を,比色により簡便,迅速かつ高感度で定量できるキット。測定試料:哺乳動物,植物,真菌類,細菌,ウイルス由来の全RNA,検量線範囲:0.01~0.5 ng/μl。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ 100周年ありがとうキャンペーン p.58

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ELISAに類似した方法を用いて,様々な生物またはウイルスから分離したRNA中のN6-メチルアデノシン(m6Aまたは6mA)を,比色により簡便,迅速かつ高感度で定量できるキット。測定試料:哺乳動物,植物,真菌類,細菌,ウイルス由来の全RNA,検量線範囲:0.01~0.5 ng/μl。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年11月1日号 p.20
100周年ありがとうキャンペーン p.58

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別包装品 別包装品あり
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別包装品 別包装品あり
法規制等
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掲載カタログ ニュース2022年11月1日号 p.20
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法規制等
保存条件 4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ 100周年ありがとうキャンペーン p.58

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法規制等
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。