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RNA試料中の5-メチルシトシン (5-mC)を定量するキット MethylFlash 5-mC RNA Methylation ELISA Easy Kit (Fluorometric)

掲載日情報:2016/09/28 現在Webページ番号:65323

各種の生物試料から単離・精製した全RNA中の5-メチルシトシン (5-mC:5-methlcytosine)濃度をELISAと類似した測定原理を用いて蛍光法により定量するキットです。

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ELISA検量線とMS-LS法

左: 5-mCの検量線
右:ヒトおよびマウス大脳組織由来の全RNA中の5-mCを本キットおよびMS-LC法で測定した。
本キットを用いた測定結果は,MS-LS法の測定結果と高い相関関係が確認できる。

RNAメチル化関連研究用キットの製品ラインナップ

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品名 商品コード 包装 測定
フォーマット
製品概要
Methylamp RNA Bisulfite Conversion Kit P-9003-050 50 reactions Columns/
Tubes
RNA試料をバイサルファイト処理し,迅速に非メチル化シトシンをウラシルに変換するキット。
EpiNext Hi-Fi cDNA
Synthesis Kit
P-9004-20 20 samples Columns/
Tubes
亜硫酸水素塩処理RNAや濃縮RNA,全RNAからcDNAを高効率で合成できるキット。
EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit (Colorimetric) P-9005-48 48 reactions 96-well plate RNA試料中のN6-メチルアデノシン(m6A)をELISAに類似した方法を用いて比色法により定量するキット。
P-9005-96 96 reactions
EpiNext 5-mC RNA Bisulfite-Seq Easy Kit (Illumina) P-9007-12 12 reactions 96-well plate RNAバイサルファイト変換,ライゲーション,洗浄,サイズ選択およびライブラリー増幅までの一連の操作に必要なすべての試薬を含んだキット。
P-9007-24 24 reactions
MethylFlash 5-mC RNA Methylation ELISA Easy Kit (Fluorometric) P-9009-48 48 reactions 96-well plate 各種の生物試料から単離・精製した全RNA中の5-メチルシトシン (5-mC:5-methlcytosine)濃度をELISAと類似した測定原理を用いて蛍光法により定量するキット。
P-9009-96 96 reactions


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MEMO 5-メチルシトシン(5-mC)とは

5-メチルシトシン(5-mC)とは(クリックで開閉します)

MEMO

5-メチルシトシン(5-mC)とは


DNA中の5-メチルシトシン(5-mC)は,DNAメチルトランスフェラーゼによりシトシン環5位の炭素にメチル基が共有結合的付加することよって起こります。このよく知られるプロセスは,遺伝子発現抑制と関連します。また,ヒトではtRNA,rRNA,mRNAおよび非コードRNA(ncRNA)などの様々なRNA分子で5-mCが発生することが明らかとなってきました。

5-mCとは

二つの異なるメチルトランスフェラーゼのNSUN2とDNMT2は,真核生物RNAの5-mC修飾を触媒することが知られています。最近のデータで,RNAのシトシンメチル化はRNAの安定性やmRNA翻訳など,様々な生物学的プロセス調節に影響することが強く示唆されています。候補部位の大部分(83%)は,mRNA中に見出されました。転写物においては,5-mCはタンパク質コード配列内ではほとんど見られませんが,5 'および3'UTRにおいて多く存在します。vault RNAにおける5-mCの損失は,micro RNAとして機能するアルゴノート関連small RNA断片に対する異常処理の原因となり,NSun2欠損に関連するヒトの疾患の病因につながる可能性があります。



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特長

  • 約2時間40分でアッセイが完了します。
  • 測定範囲が広く,また高い再現性が得られます。
  • 低バックグラウンドのため,プレートのブロッキング操作は必要ありません。
  • 非メチル化シトシンや5-mCと5-hmCの交差はほとんどありません。
  • キットにはポジティブおよびネガテティブコントロールが含まれており,生物種に関わらず5-mC RNAのメチル化を検出することができます。
  • 最適化されたポジティブコントロールによって,RNAのメチル化度をパーセンテージで解析でき,またHPLC-MS分析測定値と高い相関性が得られます。
  • 96ウェルプレートフォーマットでハイスループット分析にも適しています。
  • 測定試料:全生物種(哺乳動物,植物,真菌,細菌およびウイルスなど)の組織,細胞,血清・血漿,生体液から単離・精製した全RNA*
  • 測定試料量:全RNA 50~300 ng(推奨試料量:全RNA 200 ng)
  • 検出限界:0.02% 5-mC RNA (推奨試料量の全RNA 200 ngを用いた場合)

* 本アッセイに用いる,試料の全RNAは,DNAフリーの精製度の高いRNA(260/280値:>2.0)を用いて下さい。DNase Ⅰを用いることでDNAを除去することができます。RNAの抽出にはRNase free waterを用いて下さい。

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測定原理

高純度の精製全RNAを,キットに含まれる核酸に高親和性処理を行ったストリップウェルに結合させます。5-mCに特異的な捕捉抗体を全RNA中の5-mC RNAと結合させ,次いで検出用二次抗体と蛍光基質を用いて蛍光シグナルを測定します。試料中の5-mC RNAのパーセンテージは蛍光強度に比例します。

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操作方法概略

操作方法概略

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キット内容

  • Wash buffer
  • Binding solution
  • Negative/Positive control
  • 5-mC antibody
  • Signal indicator
  • Enhancer solution
  • Fluoro developer/enhancer
  • Dilution buffer
  • 8-Well assay strips(with frame)

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価格

[在庫・価格 :2019年10月16日 09時51分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
MethylFlash 5-mC RNA Methylation ELISA Easy Kit(Fluorometric)(48 reactions)
10日程度  2
説明文
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年4月1日号 p.7
ニュース2018年5月1日号 p.6

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説明文
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年4月1日号 p.7
ニュース2018年5月1日号 p.6

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[在庫・価格 :2019年10月16日 09時51分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

MethylFlash 5-mC RNA Methylation ELISA Easy Kit(Fluorometric)(48 reactions)

文献数:2

  • 商品コード:P-9009-48
  • メーカー:EPG
  • 包装:1kit
  • 価格:¥63,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

説明文
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年4月1日号 p.7
ニュース2018年5月1日号 p.6

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文献数:2

  • 商品コード:P-9009-96
  • メーカー:EPG
  • 包装:1kit
  • 価格:¥103,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

説明文
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年4月1日号 p.7
ニュース2018年5月1日号 p.6

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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