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m6Aデメチラーゼ活性/阻害活性を簡便、迅速に測定するキット Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric)

掲載日情報:2017/09/13 現在Webページ番号:67558

哺乳動物、植物、真菌および細菌など幅広い生物種の培養細胞や新鮮/凍結組織由来のm6A脱メチル化酵素(デメチラーゼ)(核抽出物、精製FTOまたはALKBH5など)活性または阻害活性を、ELISAに類似した方法により簡便、迅速かつ高感度で比色定量できるキットです。

m6A demethylase活性

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本製品を用いて、組換え体FTOのm6A demethylase活性を測定した。上表は、OD測定データで、FTO酵素活性に反比例する。

検量線

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非脱メチル化m6Aの検量線例

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N6-メチルアデノシンとは

N6-メチルアデノシン(m6A:N6-methyladenosine)は、真核生物において最も一般的かつ豊富に存在するRNA分子の修飾です。DNA m6Aは、Caenorhabditis elegansおよびDrosophila melanogasterを含む多細胞真核生物にも見られ、さらに植物、マウスおよびヒト細胞などの高等真核生物においても同定されました。m6Aは、DNA複製、転位、転写、および細胞防御の調節において重要な役割を果たしています。

ヒトにおけるDNA m6A修飾は、主にメチルトランスフェラーゼ複合体METTL3によって触媒され、ALKBH5およびTET様酵素などのα-ケトグルタル酸(α-KG)およびFe2+依存性ジオキシゲナーゼによって除去されます。METTL3およびα-KG / Fe2+依存性ジオキシゲナーゼは、発生および代謝から受精能に至るまでの多くの生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たします。DNA上の動的かつ可逆的な化学的m6A修飾は、難解な生物学的意義の新規のエピジェネティックマーカーとしても役立つ可能性があります。

m6Aの可逆的メチル化反応

m6Aの可逆的メチル化反応

正常コントロールとの比較により、まずヒトのがん細胞/組織におけるm6A修飾の下方制御が特徴付けされました。m6Aは、がんにおいて最も統制されたDNA修飾です。がん細胞における調節に加え、極めて低量のDNA m6A(<0.001%)を含んでいる初代細胞/組織に比べて、in vitro のヒト培養細胞(0.03~0.22%)では100倍高いm6A修飾の存在が確認されました。従って、m6A DNAのメチル化レベルとDNA上における分布の同定は、ゲノムレベルでの生物学的プロセスのエピジェネティックな制御の理解を助け、疾患の診断や治療法の研究に有用です。

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特長

  • バックグラウンドが最小化されており、簡便で精度、信頼性に優れた測定結果が得られます。
  • 細胞/組織の核抽出物と精製タンパク質を用い、in vivo またはin vitro の測定に適応しています。
  • キットにはアッセイスタンダード含まれています。
  • 96ストリップウェルフォーマットで、ハイスループットアッセイにも最適です。
  • 必要試料量:核抽出物:2~20μg(5~10μg)、精製酵素:20 ng~1μg (50~500 ng)
  • 測定時間:5時間
  • 測定波長:450 nm(補正波長 655 nm)
  • 測定生物種:哺乳動物、植物、真菌類、細菌など
  • 測定試料:培養細胞または組織(新鮮/凍結)などからの核抽出物または精製酵素

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測定原理

ウェル上にコートされた基質に活性型m6A脱メチル化酵素を結合させ、脱メチル化します。非脱メチル化m6Aを抗m6A抗体で捕捉し、比色定量します。得られた酵素活性の割合または定量値は、m6Aデメチラーゼ活性に反比例します。

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キット内容

  • Wash buffer
  • Demethylase buffer
  • m6A substrate
  • Binding solution
  • Assay standard
  • Capture antibody
  • Detection antibody
  • Enhancer solution
  • Developer solution
  • Stop solution
  • Co-factor 1/2/3
  • 8-well assay strips

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価格表

[在庫・価格 :2024年04月24日 14時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit(Colorimetric), 48 assays
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
説明文
法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月15日号 p.12

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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
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法規制等
保存条件 室温,4℃,-20℃ 法規備考
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Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit(Colorimetric), 48 assays

文献数: 2

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文献数: 2

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保存条件 室温,4℃,-20℃ 法規備考
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EPIGENTEK社のDNA Methyltransferase/Demethylase Assay Kitの種類

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 測定法 測定波長 商品コード 包装 製品概要
EpiQuik Dnmt1 Assay Kit 比色 450 nm P-3011-2 48 assays 核抽出物中のDNA メチルトランスフェラーゼ(Dnmt1, Dnmt3a, Dnmt3b)量を比色法により、簡単かつ迅速に定量するキット
P-3011-3 96 assays
EpiQuik Dnmt3A Assay Kit P-3012-2 48 assays
P-3012-3 96 assays
EpiQuik Dnmt3B Assay Kit P-3013-2 48 assays
P-3013-3 96 assays
EpiQuik DNMT1 Activity/Inhibitor Screening Assay Core Kit 比色 450 nm P-3006A-48 48 assays DNAメチルトランスフェラーゼ(Dnmt1, Dnmt3B)の阻害物質を比色法によりスクリーニングするキット
P-3006A-96 96 assays
EpiQuik DNMT3B Activity/Inhibitor Screening Assay Core Kit P-3007A-48 48 assays
P-3007A-96 96 assays
EpiQuik DNMT1 Activity/Inhibitor Screening Assay Core Kit 比色 450 nm P-3008-48 48 assays 核抽出物中のDNA脱メチル化酵素(DNA Demethylase)の活性を比色法により、簡単かつ迅速に測定するキット
P-3008-96 96 assays
EpiQuik DNMT Activity/Inhibition Assay Ultra Kit 比色 450 nm P-3009-48 48 assays 核抽出物中および精製酵素中のDNAメチルトランスフェラーゼ(DNMT)活性の総量を比色または蛍光により測定するキット
P-3009-96 96 assays
蛍光 励起530 nm/
蛍光590 nm
P-3010-48 48 assays
P-3010-96 96 assays
Epigenase 5mC-Hydroxylase TET Activity/Inhibition Assay Kit 比色 450 nm P-3086-48 48 assays 5-メチル化シトシン(5-mC)の水酸化酵素であるTETの活性を、比色または蛍光により測定するキット
P-3086-96 96 assays
蛍光 励起530 nm/
蛍光590 nm
P-3087-48 48 assays
P-3087-96 96 assays
Epigenase Thymine DNA Glycosylase (TDG) Activity/Inhibition Assay Kit 比色 450 nm P-3094-48 48 assays チミジンDNAグリコシラーゼ(TDG)の活性を、比色により測定するキット
P-3094-96 96 assays
Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit 比色 450 nm P-9013-48 48 assays m6A脱メチル化酵素(核抽出物、精製FTOまたはALKBH5など)活性または阻害活性を、簡便、迅速かつ高感度で比色定量できるキット
P-9013-96 96 assays


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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。