細胞生理機能の経時観察に有用です！ 生細胞用オルガネライメージング試薬

NucleoSeeingはDNA特異的に結合し緑色蛍光を発するライブイメージング用核染色試薬です。動物細胞・組織のみならず，シロイヌナズナの葉細胞においても高いS/N比を示し，生細胞における核動態観察に優れています。また，核内pHセンシングへの応用も可能です。
※ 本製品は名古屋工業大学の研究成果を元に製品化されました。
※ 製品の詳細は，「NucleoSeeing ＜Live Nucleus Green＞」をご覧下さい。

長時間タイムラプスイメージング
HeLa細胞をガラスボトムディッシュに播種し20時間後，0.5μM NucleoSeeing in DMEM (+10%FBS)で1.5時間処理し，未洗浄条件下にて10分間隔で計20時間，共焦点レーザー顕微鏡にてタイムラプスイメージングを行った（励起／蛍光波長：488 nm/500～600 nm, 60x oil lens）。有糸染色体分裂の様子が観察され，細胞が増殖する過程が観察できた。
※注意：本試薬で長時間ライムラプスイメージングを行う際は，培地交換をせず，本試薬を培地に含んだ状態で観察することを推奨しています。

⇒動画を再生できない場合は，こちらをご参照ください。

ERseeingは，生細胞イメージング用の不可逆的ER染色試薬です。従来の蛍光標識Glibenclamide系ER染色試薬に比べ，細胞機能への薬理作用が小さく，不可逆的のため培地交換後も観察が可能です。励起／蛍光波長：509 nm/524 nm（一般的な緑色色素FITCの観察条件が利用可能です。）
※本製品は京都大学工学研究科浜地格教授・田村朋則講師の研究成果をもとにフナコシ株式会社が製品化・販売しています。
※ 製品の詳細は，「ERseeing ＜Endoplasmic Reticulum Green＞」をご覧下さい。

細胞内滞留性の評価
HeLa細胞にERseeingおよび従来の蛍光標識Glibenclamideを無血清培地に添加し，15分間染色後に観察した（左）。その後，10%FBS含有培地に交換し再度観察した。蛍光標識Glibenclamideは洗浄後に著しく蛍光シグナルの消失が見られたが，ERseeingは不可逆的に染色するため洗浄後でも十分なシグナルが観察された。ERseeingを用いることで，ER染色後FBS含有培地で培養が可能で様々なイメージングに発展できる。

CytoSeeingは，培地に添加するだけで生細胞の細胞質を迅速に染色する新規の細胞質染色試薬です。細胞質を蛍光観察した後，培地交換するだけで，細胞内から容易に蛍光染色を除去できます。一時的な細胞の形態観察に有用です。
※ 本製品は，北海道大学大学院理学研究科の研究成果を元に製品化されました。
※ 製品の詳細は，「CytoSeeing ＜Reversible Cytoplasm Blue＞」をご覧下さい。

A549細胞におけるCytoSeeingの時間依存的な取り込みと分布
a) CytoSeeing（10μM）を細胞に添加し，インキュベートした。9分で十分にCytoSeeingが細胞内に取り込まれていることがわかる。
b) CytoSeeing（10μM）での細胞染色後，CytoSeeingを含まない培地に交換してインキュベートした。30分でCytoSeeingが細胞から抜けていることがわかる。

Ap3は，SHGシグナルイメージングにおいて障害となる蛍光を発しない，初の無蛍光性SHG色素です。蛍光性膜染色色素とは異なり，細胞膜上のシグナルのみが観察できるため，正確な膜位置の解析が可能です。またシグナル強度と膜電位に相関があり，膜電位イメージングにも利用できます。
※本製品は，慶應義塾大学医学部 薬理学教室，並びに筑波大学数理物質系（学際物質科学研究センター）の研究成果を元に製品化されました。
Nuriya M., et al, Nat. Commun., 7:11557 (2016).
※慶應義塾大学医学部 薬理学教室 塗谷先生のインタビュー記事についてはこちらをご覧下さい。
※ 製品の詳細は，「Ap3, SHG Imaging Dye」をご覧下さい。

マルチモダル2光子顕微鏡を用いた形質膜直下の小胞動態とチューブリンの解析
Tubulin Trackerで微小管を染色した細胞において，エンドサイトーシス後の小胞を10kDa-Dextran Alexa 594で，形質膜をAp3でそれぞれ染色し，これらをマルチモダル2光子顕微鏡により同時に可視化した。
形質膜特異的でありかつ蛍光シグナルと完全に分離可能なAp3-SHGによる形質膜位置の正確な同定から，形質膜から微小管，また，形質膜の直下で動く小胞までの正確な距離の計測が可能となる。
Mizuguchi T., et al, iScience., Nov 30 ; 9 :359～366 (2018).

長時間の生細胞イメージングに優れた高感度な脂肪滴染色試薬です。高い脂肪滴特異性に加え，低毒性かつ極めて高い光安定性を誇り，数日単位の長時間観察や脂肪滴融合・分解プロセスの生細胞イメージング，超高解像度顕微鏡での超微小脂肪滴の可視化に有用です。
※本製品は名古屋大学 トランスフォーマティブ生命分子研究所 山口茂弘教授，多喜正泰特任准教授の研究成果をもとに，フナコシ株式会社が製品化し，販売しています。
Taki, M., et al., ACS Mater. Lett., in press

※ 製品の詳細は，「LipiDye^®Ⅱ」をご覧下さい。

脂肪滴分解・新生プロセスの経時的観察

分化誘導した3T3-L1細胞にアデニル酸シクラーゼ活性化物質であるForskolin（10μM）およびホスホジエステラーゼ阻害物質IBMX（100 nM）を添加し，トリアシルグリセロール分解に伴う脂肪滴の縮小過程をLipiDye^®Ⅱを用いたタイムラプスイメージング（Z-stackイメージング）で観察した（共焦点レーザー顕微鏡：励起473 nm／蛍光490～540 nm，800分間，4分毎の撮影，Z-stack 15枚／回）。もともと存在した大きな脂肪滴（白矢印参照）は時間依存的に小さくなっていることが確認できる。また，時間依存的に小さな脂肪滴（黄色三角）が多数生成していることが分かる。
LipiDye^®Ⅱは極めて高い光安定性を有することにより退色の心配がなく，高いS / N比を示すことにより微小の新生脂肪滴も観察できるため，脂肪滴の増減を定量的に観察可能であることが示された。