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TruePrime Apoptic Amplification Kit
アポトーシス細胞由来のセルフリーDNAの増幅を行えるキット TruePrime Apoptic Amplification Kit
掲載日情報：2020/07/14 現在Webページ番号：69905
4basebio社のTruePrime法を用い、合成ランダムプライマーを使用せずにセルフリーDNA（cfDNA）を増幅するキットです。本製品は、アポトーシス由来、長さ160～170 bpの断片化されたcfDNAを増幅することができます。
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使用例
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特長
- 測定試料：血漿、血清、尿、脳脊髄液、その他体液のcfDNA
- 160～170 bpのcfDNA増幅に最適です。
- 高感度で、pgレベルから150 ngまたは50μlまでのcfDNAを増幅できます。
- Phi29 DNAポリメラーゼを採用しており、高いfidelityで増幅が行えます。
- 合成ランダムプライマー由来のアーティファクトを含みません。
- 合理的なワークフローで操作時間の短縮が見込めます。
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TruePrime法とは
Phi29 DNAポリメラーゼを用いたDNA増幅方法はMultiple strand Displacement Amplification (MDA) 法と呼ばれ、単一細胞からの均一なDNA増幅が可能な方法として注目されています。しかし、合成ランダムプライマーを使用することから、プライマー由来のバイアスが生じることが知られています。
4basebio社は、Phi29 DNAポリメラーゼと新規のDNAプライマーゼTthPrimPolを組み合わせ、ランダムプライマーによるアーティファクトや、外部DNA汚染の影響を低減したキットを開発しました。
- TthPrimPol (赤四角■) が変性DNAの異なる部位に結合する。
- TthPrimPolが、短いDNAプライマーを合成する。
- Phi29 DNAポリメラーゼ (青丸●) がTthPrimPolと置き換わり、合成を開始する。
- Phi29 DNAポリメラーゼが、鎖置換を起こす。
- TthPrimPolが新生DNAに結合し、新しいDNAプライマーを合成する。
- Phi29 DNAポリメラーゼがTthPrimPolと置き換わり、DNAプライマーと結合し、合成を開始する。
参考文献
- Zafar M. K., et al, Biochemistry, 53 (41), 6584～6594 (2014).
- Helleday T., Nat. Struct. Mol. Biol., 20, 1348～1350 (2013).
- Garcia-Gomez S., et al, Mol. cell, 52 (4), 541～553 (2013).
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増幅原理
- DNA末端を平滑化する。
- 5’末端にリン酸基を、3’末端にヒドロキシ基を付加し、さらに3’末端にdAを付加する。
- 両末端にヘアピン構造のアダプターをライゲートする。
- TthPrimPolがヘアピン構造を認識しプライマーを合成する。
- 強い鎖置換能力を有するPhi29 DNAポリメラーゼがプライマーを認識しDNAを伸長する。(TruePrime法)
- TthPrimPolが新たに作られたヘアピン構造を認識しプライマーを合成する。ローリングサークル型複製によってcfDNAが増幅される。
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TruePrimeキットシリーズ
※各製品の詳細は品名をクリックして下さい。
| 品名 | 用途 |
|---|---|
| TruePrime Necrotic Cell-free / Exosomal DNA Amplification Kit | ネクローシス細胞やエクソソーム由来の少量の精製cfDNAを増幅するキット |
| TruePrime Apoptic Amplification Kit | アポトーシス由来の長さ160～170 bpの断片化されたcfDNAを増幅するするキット |
| TruePrime WGA Kit | 少量の精製DNAから全ゲノム増幅するキット |
| TruePrime Single Cell WGA Kit | シングルセルから全ゲノム増幅するキット |
| TruePrime RCA Kit | 一本鎖または二本鎖環状DNAの増幅を行えるキット |
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キット内容
- End-repair enzyme mix
- End-repair reaction buffer
- Ligation mix
- Enhancer
- Adaptor
- Reaction buffer
- dNTPs
- Nuclease-free water
- Enzyme 1/2
※セルフリーDNAを抽出するキット等が別途必要です。
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4basebio社製品ご購入のご注意
本製品は、ご注文時に専用のMTA（Material Transfer Agreement）が必要です。必要事項をご記入の上、販売店担当者にお渡し下さい。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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TruePrime apoptic amplification kit (5reactions) |
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TruePrime apoptic amplification kit (20reactions) |
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[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
TruePrime apoptic amplification kit (5reactions)
文献数： 0
- 商品コード：340005
- メーカー：SYN
- 包装：1kit
- 価格：¥229,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※MTAが必要です。※輸入諸費用(120,000円)を別途いただく製品です。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -80℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年1月合併号 p.22
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| 製品記事 |
次世代シークエンス（NGS）関連製品特集 |
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TruePrime apoptic amplification kit (20reactions)
文献数： 0
- 商品コード：340020
- メーカー：SYN
- 包装：1kit
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※MTAが必要です。※輸入諸費用(120,000円)を別途いただく製品です。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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