HOME
>
試薬
>
遺伝子工学
>
ゲノミクス
>
遺伝子の検出・定量
>
TruePrime Necrotic Cell-free / Exosomal DNA Amplification Kit
HOME
>
試薬
>
遺伝子工学
>
PCR・シークエンシング
>
シークエンシング
>
TruePrime Necrotic Cell-free / Exosomal DNA Amplification Kit
少量の精製セルフリーDNAの増幅を行えるキット TruePrime Necrotic Cell-free / Exosomal DNA Amplification Kit
掲載日情報：2018/01/30 現在Webページ番号：68004
血漿、血清、尿、脳脊髄液などの液体生検試料（Liquid Biopsy）から精製したセルフリーDNAの増幅を行えるキットです。セルフリーDNA中に含まれる腫瘍細胞由来の長鎖DNA断片（循環腫瘍細胞由来DNA：ctDNAが主成分）を優先的に増幅するため、本キットで増幅したDNAを用いての腫瘍マーカーDNAの解析に有用です（下記、使用例参照）。
追加しました。
使用例
S状結腸未分化腺がん（ステージ：T4a M1a L1 G4）患者の腫瘍生検由来DNAおよびセルフリーDNAを用いて、がん関連50遺伝子についてSNV（一塩基多様性）をシークエンシングにより確認した。
未増幅のセルフリーDNA（右）と比べて、本キットで増幅したセルフリーDNA（左）は、検出された腫瘍生検由来DNAの割合、カバー率が高いことが判る。
追加しました。
特長
- ネクローシスを起こした細胞や細胞外小胞由来の1kb以上の長鎖DNAの増幅に適しています。
- 100 pgのセルフリーDNAから、再現性高く増幅DNAを得られます。
- 合成ランダムプライマーを用いないため、これに起因する不規則な伸張反応による影響がありません（MEMO参照）。
- バイアスが少なく、かつゲノムのカバー率が高い増幅DNAが得られ、PCR、次世代シークエンシングでの使用に適しています。
- 得られた増幅DNAは異なるシークエンシング法を用いて解析しても、SNV（一塩基多様性）および各SNVの存在頻度が保たれています。
- がん発生、がん再発検出用の新規マーカー候補となりうる、血漿試料中に含まれる未知の腫瘍由来DNAの探索にも有用です。
追加しました。
TruePrime法とは
Phi29 DNA polymeraseを用いたDNA増幅方法はMultiple strand Displacement Amplification （MDA）法と呼ばれ、単一細胞からの均一なDNA増幅が可能な方法として注目されています。しかし、合成ランダムプライマーを使用することから、プライマー由来のバイアスが生じることが知られています。
4basebio社は、Phi29 DNA polymerasと新規のDNAプライマーゼTthPrimPolを組み合わせ、ランダムプライマーによるアーティファクトや、外部DNA汚染の影響を低減したキットを開発しました。
- TthPrimPol (赤四角■) が変性DNAの異なる部位に結合する。
- TthPrimPolが、短いDNAプライマーを合成する。
- Phi29 DNAポリメラーゼ (青丸●) がTthPrimPolと置き換わり、合成を開始する。
- Phi29 DNAポリメラーゼが、鎖置換を起こす。
- TthPrimPolが新生DNAに結合し、新しいDNAプライマーを合成する。
- Phi29 DNAポリメラーゼがTthPrimPolと置き換わり、DNAプライマーと結合し、合成を開始する。
参考文献
- Zafar M. K., et al, Biochemistry, 53 (41), 6584-6594 (2014).
- Helleday T., Nat. Struct. Mol. Biol., 20, 1348-1350 (2013).
- Garcia-Gomez S., et al, Mol. cell, 52 (4), 541-553 (2013).
追加しました。
操作方法概略
- 精製DNA試料とLysis bufferを加える。
- 室温で3分間インキュベートする。
- Neutralization bufferを加え中和する。
- Amplification mixを加える。
- 30℃で3時間インキュベーションする。
- 65℃で10分加熱し酵素を失活させる。
追加しました。
TruePrimeキットシリーズ
※各製品の詳細は品名をクリックして下さい。
| 品名 | 用途 |
|---|---|
| TruePrime Necrotic Cell-free / Exosomal DNA Amplification Kit | ネクローシス細胞やエクソソーム由来の少量の精製cfDNAを増幅するキット |
| TruePrime Apoptic Amplification Kit | アポトーシス由来の長さ160～170 bpの断片化されたcfDNAを増幅するするキット |
| TruePrime WGA Kit | 少量の精製DNAから全ゲノム増幅するキット |
| TruePrime Single Cell WGA Kit | シングルセルから全ゲノム増幅するキット |
| TruePrime RCA Kit | 一本鎖または二本鎖環状DNAの増幅を行えるキット |
追加しました。
キット内容
- Buffer D, N
- Reaction buffer
- dNTPs
- H2O
- Enzyme 1, 2
※ 液体生検試料からセルフリーDNAを精製するキットおよび、本キットで増幅したDNAの定量に用いるキット・装置等が別途必要です。
追加しました。
4basebio社製品ご購入のご注意
本製品は、ご注文時に専用のMTA（Material Transfer Agreement）が必要です。必要事項をご記入の上、販売店担当者にお渡し下さい。
追加しました。
価格
[在庫・価格 ：2025年04月25日 16時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
TruePrime Necrotic cell-free/exosomal DNA amplification kit (25 reactions) |
|
0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[在庫・価格 ：2025年04月25日 16時35分現在]
TruePrime Necrotic cell-free/exosomal DNA amplification kit (25 reactions)
文献数： 0
- 商品コード：330025
- メーカー：SYN
- 包装：1kit
- 価格：¥223,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※MTAが必要です。※輸入諸費用(120,000円)を別途いただく製品です。 血漿，血清，尿，脳脊髄液などの液体生検試料（Liquid Biopsy）から精製したセルフリーDNA(約1kb以上の長鎖DNA)の増幅を行えるキット。ランダムプライマーを用いないため，ランダムプライマーによるアーティファクトや外部DNA汚染の影響を低減できる。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年12月1日号 p.3 ニュース2022年10月15日号 p.35
|
||
| 製品記事 | |||
| 関連記事 | 次世代シークエンス（NGS）関連製品特集 リキッドバイオプシー（Liquid Biopsy）研究用製品特集 |
||
追加しました。
関連製品：CovCheck
全ゲノム増幅（WGA）率を迅速に確認できるPCRキットです。
- Ready-to-useの96ウェルフォーマットです。
- キットにはエンドポイントPCRプライマーとホットスタートTaqポリメラーゼが含まれます。
- ヒト染色体の各領域を増幅する24種類のプライマーセットが含まれ、一度に4つのゲノムが検定できます。
- 結果はアガロース電気泳動などで簡単に確認できます。
- 商品コード
- メーカー
- 包装
- 価格
- 在庫
- 法規制等
- CVC0004
-
SYNフォーベースバイオ
4basebio S.L.U - 1 kit
- ¥162,000
- 無 (未発注)
- 商品コード：CVC0004
- メーカー：SYN
- 包装：1kit
- 価格：¥162,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
■ CovCheckの使用例
TruePrime Single Cell WGA Kitを用いてヒトゲノムDNA（上）とHEK293細胞（下）を鋳型としたPCRを行い、電気泳動したところ、300～400 bpの増幅産物が得られた。用いたHEK293細胞は女性由来だったため、Y染色体部分の増幅が見られない。
CovCheckの価格
[在庫・価格 ：2025年04月25日 16時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
CovCheck Kit (4reactions) |
|
0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[在庫・価格 ：2025年04月25日 16時35分現在]
CovCheck Kit (4reactions)
文献数： 0
| 説明文 | ※MTAが必要です。※輸入諸費用(120,000円)を別途いただく製品です。 全ゲノム増幅（WGA）率を迅速に確認できるPCRキット。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年3月1日号 p.19 ニュース2017年12月1日号 p.9
|
||
| 製品記事 | TruePrime Single Cell WGA Kit |
||
| 関連記事 | |||
追加しました。
製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。