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small RNA導入用トランスフェクション試薬 DharmaFECT 1~4 Transfection Reagent

掲載日情報:2019/10/28 現在Webページ番号:67997

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DharmaFECT 1~4は、細胞にあわせて最適条件で使い分ける4種類のsmall RNA (siRNA, microRNA, crRNA, tracrRNA)用トランスフェクション試薬シリーズです。高いsmall RNA導入効率、低い細胞毒性、再現性のある結果を実現します。miRIDIAN microRNA MimicおよびHairpin Inhibitorの導入にも使用できます。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
Dharmacon製品(メーカー略称:DHA)につきまして、2023年4月1日より製品ご注文時にHandling Fee(手数料)を本体価格とは別にご請求させていただきます。詳細は「Handling Feeについてのご案内」をご確認下さい。
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RNAiカタログ

RNAi研究用試薬カタログ


特長

  • さまざまな細胞へ効率良くsmall RNA (siRNA, microRNA, crRNA, tracrRNA)を導入するために至適化された4種類のトランスフェクション試薬があります。
  • 低濃度のsmall RNAを効率良く細胞へ導入できます。
  • 幅広い条件で使えるため、条件検討が容易です。
  • 細胞毒性が低く抑えられています。
  • DharmaFECT 1~4をセットにしたDharmaFECT Set of 4もあります。

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DharmaFECT Transfection Reagentシリーズ

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DharmaFECT Transfection Reagentシリーズ
DharmaFECT 1~4 DharmaFECT Duo DharmaFECT kb DNA
small RNA導入用 small RNAとプラスミドの同時導入用 プラスミドDNA導入用

small RNAとプラスミドを同時にトランスフェクションする場合は、DharmaFECT Duo Transfection Reagent
プラスミドDNAあるいはshRNAをトランスフェクションする場合は、DharmaFECT kb DNA Transfection Reagent
をご使用下さい。

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製品ラインナップ

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品名 DharmaFECT 1 DharmaFECT 2 DharmaFECT 3 DharmaFECT 4 DharmaFECT Set of 4
製品概要 評価済み細胞の80%以上でノックダウン効果が高く、また毒性が低い万能タイプ DharmaFECT 1よりも幅広い種類の細胞でノックダウン効果の高いタイプ DharmaFECT 1~4のセット
導入確認済みの細胞例 HCT116, HEK293, UMRなど A549など Huh7, XMD5など HeLa, SKOV3, MDA-MB-231など
容量 0.2 ml T-2001-01 T-2002-01 T-2003-01 T-2004-01 T-2005-01
0.75 ml T-2001-02 T-2002-02 T-2003-02 T-2004-02 T-2005-02
1.5 ml T-2001-03 T-2002-03 T-2003-03 T-2004-03 T-2005-03
5×1.5 ml T-2001-04 T-2002-04 T-2003-04 T-2004-04


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使用例

比較例

DharmaFECTと他社トランスフェクション試薬の比較データ
DharmaFECT 1あるいは他社製トランスフェクション試薬を用いて、Cyclophilin B(PPIB)またはMAPK1遺伝子をターゲットとしたSMARTpool siRNAをHeLa細胞にトランスフェクションした。mRNA発現量は、branched DNA assay(Panomics社)によって、細胞生存率はalamarBlue Reagent(Biosource International社)を用いて評価した。

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導入確認済みの細胞

細胞株 細胞名 推奨する
DharmaFECT
DharmaFECTの量
(μl/well)
播種細胞密度
(cells/well)
その他の適応可能なDharmaFECT
ヒト
786-0 Kidney adenocarcinoma 1 0.4 5×103 2
A549 Lung carcinoma 1 0.2 1×104 2, 3, 4
ARPE-19 Retinal pigment epithelial 4 0.2 1×104 1, 2
BxPC3 Pancreas adenocarcinoma 2 0.2 5×103 1, 3, 4
DLD-1 Colorectal adenocarcinoma 2 0.4 5×103 1, 3
DU 145 Prostate carcinoma 1 0.2 1×104 2, 3, 4
NCI-H1299 Lung carcinoma 2 0.2 1×104 4
HCT-116 Colorectal carcinoma 2 0.1 5×103 4
HEK293 Kidney transformed embryonic cells 1 0.2 1×104 2, 4
HeLa Cervical epithelial adenocarcinoma 1 0.2 5×103 2, 3, 4
HeLa S3 Cervical epithelial adenocarcinoma 4 0.4 5×103 1, 2, 3
Hep G2 Hepatocellular carcinoma 4 0.4 1×104 1, 2
hMSC Mesenchymal stem cells 1 0.4 5×103 2, 3, 4
HT-29 Colorectal carcinoma 1 0.2 5×103 2, 3, 4
HT1080 Fibrosarcoma 4 0.2 5×103 1, 2, 3
Huh7 Hepatocarcinoma 4 0.05 5×103 1, 2
HUVEC Umbilical vein endothelial cells 4 0.2 2×104 1, 2
JEG-3 Placenta, choriocarcinoma, epithelial 3 0.2 1×104
MCF Breast adenocarcinoma 1 0.2 1×104 2, 4
MCF 10A Breast adenocarcinoma 1 0.2 1×104 2
MDA-MB-453 Breast adenocarcinoma 2 0.2 1×104 1, 3, 4
MDA-MB-231 Breast adenocarcinoma 4 0.1 5×103 1
OVCAR3 Ovarian adenocarcinoma 1 0.1 5×103 2, 3, 4
PC-3 Prostate carcinoma 2 0.2 1×104 3
Saos-2 Bone, osteosarcoma, epithelial 1 0.05 1×104 2, 3, 4
SK-BR-3 Breast adenocarcinoma 2 0.2 1×104 1, 3, 4
SKOV-3 Ovarian adenocarcinoma 3 0.4 1×104 1, 2, 4
U-87 MG Brain glioblastoma 1 0.1 5×103 2, 3, 4
げっ歯類
A7r5 Rat aortic smooth muscle 2 0.1 5×103 1
C2C12 Mouse myoblasts 1 0.2 5×103 2, 3, 4
CHO K1 Chinese hamster ovary 4 0.8 1×104 1, 2
ES-D3 Mouse embryonic stem cells 1 0.2 2×103 2
ES-E14TG2a Mouse embryonic stem cells 1 0.2 2×103 2
H9c2 Rat myoblasts 1 0.2 1×104 2, 3, 4
J774A.1 Mouse macrophages 4 0.2 1×104
NIH/3T3 Mouse embryonic fibroblasts 1 0.2 1×104 3
NRK-49F Rat kidney fibroblasts 2 0.2 1×104 1, 4
Rat2 Rat fibroblasts 1 0.2 2×104 2
3T3-L1 Mouse embryonic fibroblasts 1 0.2 5×103 3
その他
COS-7 African green monkey kidney 2 0.4 5×103 1, 3, 4

ハウスキーピング遺伝子GAPDHあるいはPPIBのノックダウン効果をトランスフェクション効率の指標として、siRNAの効率的な導入条件を検討しました。
GAPDHあるいはPPIBをターゲットとするコントロールsiRNA(これらのsiRNAは、至適化されたトランスフェクション条件ではmRNA発現レベルで90%以上のノックダウン効果が確認されています)を終濃度25~100 nMで用い、各々の細胞株について、プレーティング細胞密度(ウェルあたり2×103、5×103、1×104、2.5×104個の細胞)、DharmaFECTの4種類、DharmaFECTの量(0.05~0.8μl/ウェル)を試しました(トランスフェクション時間は24時間)。
これら3つのパラメーターについて、最もsiRNAトランスフェクション効率の高かった組み合わせ(いずれもmRNA発現レベルで80%以上のノックダウン効果を確認)を示しています。
多くの細胞株において、「推奨するDharmaFECT」に示したDharmaFECT以外の種類のDharmaFECTを用いてもトランスフェクションが可能です。
これらのデータは、細胞株ごとのトランスフェクション条件を至適化する際の初期目安としてご使用下さい。


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価格表

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■DharmaFECT 3 Transfection Reagent

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DharmaFECT Set of 4 Transfection Reagents

文献数: 0

説明文 製品価格とは別にHandling fee(手数料)が発生いたします。
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
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掲載カタログ ニュース2022年9月1日号 p.15

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