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small RNAとプラスミドの同時トランスフェクション用試薬 DharmaFECT Duo Transfection Reagent

掲載日情報:2019/10/28 現在Webページ番号:67998

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DharmaFECT Duoは、small RNAとプラスミドDNAを同時に効率よく細胞へ導入するためのトランスフェクション試薬です。ターゲットmRNAの発現を抑制すると同時に発現プラスミドベクターからインサートDNAを発現したい場合に使用します。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
Dharmacon製品(メーカー略称:DHA)につきまして、2023年4月1日より製品ご注文時にHandling Fee(手数料)を本体価格とは別にご請求させていただきます。詳細は「Handling Feeについてのご案内」をご確認下さい。
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RNAiカタログ

RNAi研究用試薬カタログ


適用

使用例 使用例


使用例

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特長

  • small RNA(siRNA, microRNA, crRNA, tracrRNA)とプラスミドを同時にトランスフェクションするための試薬です。
  • 細胞生存率を維持しながら高い導入効率が得られます。
  • プラスミドベクターから発現する遺伝子とsmall RNAの機能解析に使用可能です。

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DharmaFECT Transfection Reagentシリーズ

DharmaFECT Transfection Reagentシリーズ
DharmaFECT 1~4 DharmaFECT Duo DharmaFECT kb DNA
small RNA導入用 small RNAとプラスミドの同時導入用 プラスミドDNA導入用

small RNAのみをトランスフェクションする場合は、DharmaFECT 1~4
プラスミドDNAあるいはshRNAをトランスフェクションする場合は、DharmaFECT kb DNA Transfection Reagent
をご使用下さい。

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製品ラインナップ

品名 DharmaFECT Duo
製品概要 siRNAとプラスミドの同時導入用
導入確認済みの細胞例 ES-D3, HeLa, Hep G2, Jurkat, MCF7, MCF10a, NIH/3T3
容量 0.2 ml T-2010-01
0.75 ml T-2010-02
1.5 ml T-2010-03
5×1.5 ml T-2010-04


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導入確認済みの細胞

細胞株 最終的な細胞量
(cells/well)
細胞ストック密度
(cells/ml)
DharmaFECT Duo
添加量(μl)
Serum-free
Medium量(μl)
DharmaFECT Duo
の終濃度(μl/well)
細胞生存率
(%)
遺伝子抑制率(%)
ES-D32.0×1042.0×1054.2135.80.38797
HeLa2.0×1042.0×1051.4138.60.17981
Hep G22.0×1042.0×1050.7139.30.057291
Jurkat6.0×1046.0×1058.4131.60.68996
MCF71.0×1041.0×1052.8137.20.28099
MCF10a1.0×1041.0×1052.8137.20.27898
NIH/3T31.0×1041.0×1055.6134.40.48397

96ウェルプレートでそれぞれの細胞を表に記載の量で培養し、Renillaルシフェラーゼ発現ベクター(100 ng/well)とその抑制siRNA(100 ng)を、表に記載の量のDharmaFECT Duoで導入した。48時間後にルシフェラーゼアッセイによりmRNAの抑制度合いを測定した。同じ時間に細胞生存率を測定した。

これらのデータは、細胞株ごとのトランスフェクション条件を至適化する際の初期目安としてご使用下さい。

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使用例

使用例

HEK293T細胞へのEdit-R Cas9ヌクレアーゼmRNA導入によるVEGFA遺伝子の編集
96ウェルプレートで20,000 cells/wellに培養したHEK293T細胞に、各トランスフェクション試薬を用いて、200 ngのEdit-R Cas9 mRNAと化学合成したVEGFA標的のcrRNA:tracrRNAを共導入した。導入72時間後に細胞を回収して、T7 EndonucleaseⅠを用いたDNAミスマッチ検出アッセイにより、遺伝子編集が行われた割合を求めた。
DF1:DharmaFECT 1, Duo:DharmaFECT Duo, UT:untreated sample, MW:FastRuler Low Range DNA Ladder (Thermo Scientific).


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価格表

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