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高効率かつ低毒性プラスミドDNA導入用試薬 DharmaFECT kb DNA Transfection Reagent

掲載日情報:2019/10/28 現在Webページ番号:67999

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DharmaFECT kb DNA Transfection Reagentは、プラスミドDNAを効率良く細胞へ導入するためのトランスフェクション試薬です。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
Dharmacon製品(メーカー略称:DHA)につきまして、2023年4月1日より製品ご注文時にHandling Fee(手数料)を本体価格とは別にご請求させていただきます。詳細は「Handling Feeについてのご案内」をご確認下さい。
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特長

  • HeLa, HEK293T, U2OS, MCF-7を含む幅広い細胞種で、プラスミドDNAの高い導入効率が得られます。
  • 細胞毒性が低く抑えられています。
  • Cas9ヌクレアーゼとsgRNA発現の各プラスミドの共導入(コトランスフェクション)に使用可能です。
  • 培地中の血清の有無に関わらずトランスフェクション可能です。
DharmaFECT Transfection Reagentシリーズ
DharmaFECT 1~4 DharmaFECT Duo DharmaFECT kb DNA
small RNA導入用 small RNAとプラスミドの同時導入用 プラスミドDNA導入用

small RNAのみをトランスフェクションする場合は、DharmaFECT 1~4
small RNAとプラスミドを同時にトランスフェクションする場合は、DharmaFECT Duoをご使用下さい。

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トランスフェクションのスケールアップ例

細胞培養容器 培養領域面積
(cm2/well)
培地量
(ml)
導入前日に播種する細胞数
接着細胞(浮遊細胞)*
DNA量 DharmaFECT kb
の量(μl)
μg** μl*** 推奨量 添加範囲
96-well plate 0.3 0.1 0.5~1.2×104(2.0×104) 0.2 10 0.6 0.4~1.0
48-well plate 0.7 0.25 1.0~3.0×104(5.0×104) 0.5 25 1.5 0.8~2.2
24-well plate 2.0 0.5 2.0~6.0×104(1.0×105) 1.0 50 3.0 2.0~5.0
12-well plate 4.0 1.0 0.4~1.2×105(2.0×105) 2.0 100 6.0 3.9~9.0
6-well plate 9.5 2.0 0.8~2.4×105(4.0×105) 4.0 200 9.0 6.0~12.0
60 mm dish 20 3.0 2.0~6.3×105(1.0×106) 6.0 300 18 12.0~24.0

* 記載の細胞数は、HEK293TおよびU2OSの場合です。細胞種により適した細胞数は異なります。
** DNA量およびDharmaFECT kbの量は、最適化が必要な場合もあります。
*** 希釈したDNAを用いる場合は、DNA溶液の量は培地の1/10量までとして下さい。

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使用例

使用例

本製品を用いたEdit-R Lentiviral sgRNAとCas9発現プラスミドの共導入によるCRISPR-Cas9遺伝子編集
96ウェルフォーマットで培養したU2OS細胞に、等量のEdit-R hCMV-mKate2-Cas9 Expression plasmid (#U-004100-120) とEdit-R Human PPIB Lentiviral sgRNA plasmidを一過的に導入した。総DNA量50~200 ngにおいて、0.2~0.8μl/wellのDharmaFECT kb Transfection Reagent (#T-2006-01)を用いた。遺伝子編集が行われた割合は、導入72時間後に、T7EⅠとゲル吸光度法を用いたDNAミスマッチ検出アッセイから求めた。

使用例

本製品を用いたSMARTvector lentiviral shRNAプラスミド導入によるTurboGFPの発現
24ウェルフォーマットで培養したHEK293T細胞に、1μgのSMARTvector Human AKT1 Lentiviral shRNA plasmid (Cat #V3SH11240-224972267)を3μl/wellのDharmaFECT kb Transfection Reagent (Cat #T-2006-01)を用いて一過的に導入し、48時間後に撮影した。

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DharmaFECT kb DNA transfection reagent
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製品価格とは別にHandling fee(手数料)が発生いたします。
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年9月15日号 p.15

製品記事 cDNA/ORFクローンコレクション・ライブラリー
Edit-R™ ゲノム編集 遺伝子ノックアウト/ノックイン試薬
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DharmaFECT kb DNA transfection reagent

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