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トランスフェクションが困難な細胞へmRNAを導入する試薬 jetMESSENGER®
掲載日情報：2022/11/30 現在Webページ番号：65373
穏和な条件下で、幅広い細胞に高効率でmRNAを導入できるトランスフェクション試薬です。神経細胞、幹細胞、免疫細胞、線維芽細胞など、特にトランスフェクションが困難な種々の細胞にも高い効率で導入可能です。mRNAのトランスフェクションがDNAと同じくらい容易で、mRNAが発現のために細胞核に到達する必要がなく、また効率的な遺伝子発現のために細胞分裂も必要としません。そのため特別な機構を持つ細胞の遺伝子発現に有用です。
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2022/11/21
試薬 サンプル
- mRNAトランスフェクションとは
- 特長
- 各種細胞へのmRNAトランスフェクション効率
- キット内容
- 操作方法概略
- 使用例（GFP mRNAのトランスフェクション）
- メーカー動画
- メーカーポスター
- Polyplus社トランスフェクション試薬製品のラインナップ
- 文献データベース
- 価格
mRNAトランスフェクションとは
mRNAトランスフェクションは、プラスミドDNAを用いた核酸導入に代わるトランスフェクション法として利用が拡大しつつあります。mRNAトランスフェクションでは、分裂が遅い細胞や、分裂していない細胞で妨げられるDNAの核移行の必要性を回避することができ、様々な細胞で再現性のある高いトランスフェクション効率が得られます1。この方法には、細胞の分裂速度に関係なく高い割合でトランスフェクションできること、mRNAがゲノムに組み込まれるリスクがなくより早く、より制御されたタンパク質発現ができることなど、DNAトランスフェクションに比べて多くの利点があります。また、サイトゾルに導入されたmRNAによって誘導される毒性と免疫応答が、最新の修飾mRNAにより軽減されました。2,3。
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）
jetMESSENGERを使用したmRNAトランスフェクションとjetPRIMEを使用したDNAトランスフェクションの比較
参考文献
- Yamamoto, A., et al., "Current prospects for mRNA gene delivery", Eur. J. Pharm. Biopharm., 71（3）, 484～489 （2009）. [PMID：18948192]
- Karikó, K., et al., "Incorporation of pseudouridine into mRNA yields superior nonimmunogenic vector with increased translational capacity and biological stability", Mol. Ther., 16（11）, 1833～1840 （2008）. [PMID：18797453]
- Uchida, S, et al, "Screening of mRNA Chemical Modification to Maximize Protein Expression with Reduced Immunogenicity", Pharmaceutics, 7（3）, 137～151 （2015） [PMID：26213960].
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特長
- 通常トランスフェクションが困難な、初代細胞、神経細胞、浮遊細胞および種々のがん細胞株に対しても高いトランスフェクション効率が得られます。
- mRNAを用いることで、 DNAに比べてトランスフェクション効率が向上します。
- 細胞に非常に優しい試薬です。
- mRNAがゲノムに組み込まれるリスクはありません。
- CRISPR/Cas9の遺伝子編集、iPS細胞の作製、幹細胞分化および免疫療法研究に最適です。
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各種細胞へのmRNAトランスフェクション効率
| 分類 | 細胞名 | トランスフェクション効率 | 分類 | 細胞名 | トランスフェクション効率 |
|---|---|---|---|---|---|
| 脳細胞 Brain Cells |
U-87MG | ＞90％ | 肝細胞 Hepatocytes |
Hep G2 | ＞90％ |
| Cortex neurons | 40～60％ | リンパ球 Lymphocytes |
Jurkat | 50～70％ | |
| 上皮細胞 Epithelial cells |
Caco-2 | ＞90％ | K562 | 40～60％ | |
| MCF-7 | ＞90％ | マクロファージ | Macrophages | 50～70％ | |
| MDCK | 40～60％ | 単球 Monocytes |
Primary monocytes | 10～30％ | |
| 繊維芽細胞 Fibroblasts |
BJ | ＞90％ | THP-1 | 80～90％ | |
| Primary fibroblasts | 70～90％ | 幹細胞 Stem cells |
hMSC | ＞90％ | |
| IMR-90 | ＞90％ | mES | 50～70％ | ||
| MEF | 60～80％ |
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キット内容
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操作方法概略
- ①：50 μlのmRNA bufferに0.5 μgのmRNAを加え、軽くボルテックスする。
- ②：1 μlのjetMESSENGERを加える。
- ③：軽くボルテックスし、15分間インキュベートする。
- ④：細胞を培養している培地に加える。
- ⑤：37℃でインキュベートし、mRNAの発現を測定する。
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使用例（GFP mRNAのトランスフェクション）
jetMESSENGERを用いた様々なタイプのニューロンのトランスフェクション例
eGFPをコードするmRNA（EGFP-mRNA）をjetMESSENGERでトランスフェクトし、トランスフェクションの4時間後にeGFP発現を蛍光顕微鏡で評価した。
jetMESSENGERを用いた各種ニューロンへのトランスフェクション効率の比較
アストロサイトは、トランスフェクションの24 時間後にフローサイトメトリーによって評価した。皮質、海馬、およびドーパニューロンについては、蛍光顕微鏡で解析した。
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各種ニューロンへのトランスフェクション効率の比較
初代ラット皮質ニューロン、ヒトHepG2細胞、マウス幹細胞へのeGFP mRNAのトランスフェクションの比較例
jetMESSENGERを用いて、初代ラット皮質ニューロン（上）、ヒトHepG2細胞（中）およびマウス幹細胞（下）にeGFP mRNA（5meC, pseudo-uridine, Trilink）をトランスフェクションし、48時間後に明視野および蛍光顕微鏡により解析した。
| jetMESSENGER/mRNA （eGFP mRNA） |
他社トランスフェクション試薬A （L2K/eGFPプラスミドDNA） |
|
| 初代ラット皮質ニューロン |  |
 |
| ヒトHep G2細胞 |  |
 |
| マウス幹細胞 |  |
 |
jetMESSENGERと他社トランスフェクション試薬Aとのトランスフェクション効率の比較
それぞれのトランスフェクション試薬を用いてeGFP mRNA（5meC, pseudo-uridine, TriLink）またはeGFPをコードするプラスミドDNAを表記細胞株にトランスフェクションし、24時間後にフローサイトメトリー（FACS分析）により効率を評価した。
Jurkat細胞へのmRNAのトランスフェクション24時間後のGFPの発現の比較
eGFP mRNAをjetMESSENGERおよび他社トランスフェクション試薬を用いてJurkat細胞にトランスフェクションし、24時間後に蛍光顕微鏡により導入効率を比較した。
初代マウス肺内皮細胞へのGFP / mCherry RNAの導入例
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※ 画像提供：Itkin, T., Weill Cornell Medicine, USA
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メーカー動画
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メーカーポスター
下の画像をクリックすると、PolyPlus-transfection社のjetMESSENGERに関するポスター（
）をご覧いただけます。
アプリケーションノート
- 神経幹細胞へのmRNAトランスフェクション／DNAトランスフェクション比較
- 神経幹細胞塊（neurosphere）培養
下の画像をクリックすると、アプリケーションノート（<）ダウンロードできます。
Efficient transient gene expression in neurosphere with jetMESSENGER mRNA transfection Reagent
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Polyplus社トランスフェクション試薬製品のラインナップ
品名をクリックすると、製品の詳細をご覧いただけます。
| 方法 | 品名 | Plasmid DNA |
オリゴ ヌクレオチド |
mRNA | タンパク質 | 接着 細胞 |
浮遊 細胞 |
製品概要 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| in vitro | jetMESSENGER | － | － | ● | － | ＋＋＋ | ＋＋＋ | トランスフェクションが特に困難な細胞に有効 |
| jetPEI | ● | － | － | － | ＋＋ | ＋ | HTS | |
| PEIpro | ● | － | － | － | ＋＋ | ＋＋ | HEK-293用 | |
| FectoPRO | ● | － | － | － | － | ＋＋＋ | CHOおよびHEK-293浮遊細胞用 | |
| jetPRIME | ● | ● | － | － | ＋＋＋ | － | HeLa、HEK-293、CHO細胞などの接着細胞用 | |
| INTERFERin | － | ● | － | － | ＋＋＋ | ＋＋＋ | RNA阻害に有用 | |
| PULSin | － | － | － | ● | ＋＋＋ | ＋＋＋ | タンパク質トランスフェクション用 | |
| in vivo | in vivo -jetPEI | ● | ● | ● | － | － | － | 全臓器に適応可 |
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文献データベース
☞ Polyplus transfection 文献データベース（メーカーサイトにリンクします）
ユーザーレビュー
“We were very happy with the performance of jetMESSENGER and ☞ in vivo-jetRNA in delivering our antigen-expressing mRNA to a variety of cells in vitro and in vivo. The response achieved in relation to dose exceeded our expectations, without any observable adverse effect from the formulation.”
Remi C., Columbia University, New York, NY
“Application of jetMESSENGER reagent to introduce modified RNA molecules into primary lung mouse endothelial cells （a cell population which is generally hard-to-transfect with DNA/RNA using non-viral methodology） resulted with the highest transfection rate （>70%） and with the lowest toxicity effects as compared to other tested RNA/DNA transfection reagents.”
Itkin T., Weill Cornell Medicine, New York, United States
“jetMESSENGER appears as a very effective reagent for RNA transfection in human cancer cells of various origins. The expression level intensity and the transfected cells proportion were very impressive as compared to conventional DNA transfection reagents, without any sign of cytotoxicity.”
Brotin E., Abeilard E., Denoyelle C., Poulain L. Inserm U1199 （BioTICLA）, Caen, France
“The protocol and handling of jetMESSENGER Kit was very simple and easy to use in comparison to other mRNA kits we tested. In our hands, jetMESSENGER is the only component that resulted in 60% transfection efficiency in peritoneal macrophages, in less than 9h while not affecting cell viability.”
Herb M., University of Cologne, Germany
“The jetMESSENGER kit makes mRNA transfections very easy. The one step protocol is easy to use and can be combined with media comprising serum. It is a great tool!”
Pollet J., Baylor College of Medicine （BCM）, USA
“The experiments I did were really good, the transfection worked greatly and I did also a comparison with another transfection kit from a competitor, I have to say yours is much better.”
Stefano C., Baseclick GmbH, Germany
“I obtained a very good transfection efficiency using jetMESSENGER. It is easy to use and the protocol is well described."
Kathleen S., Pharmaceutical company, Germany
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価格
[在庫・価格 ：2024年12月11日 20時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
jetMESSENGER (0.1ml) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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|
jetMESSENGER (0.75ml) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年12月11日 20時35分現在]
jetMESSENGER (0.1ml)
文献数： 0
- 商品コード：101000056
- メーカー：PPU
- 包装：1kit
- 価格：¥24,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 幅広い細胞に高効率でmRNAを導入できるトランスフェクション試薬。包装：0.1ml。旧商品コード：150-01 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
ニュース2024年8月合併号 p.19 ニュース2023年9月15日号 p.18
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| 製品記事 | |||||||
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jetMESSENGER (0.75ml)
文献数： 0
- 商品コード：101000005
- メーカー：PPU
- 包装：1kit
- 価格：¥133,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 幅広い細胞に高効率でmRNAを導入できるトランスフェクション試薬。包装：0.75ml。旧商品コード：150-07 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
ニュース2023年9月15日号 p.18 ニュース2022年9月1日号 p.9
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