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DynaMarker® Protein MultiColor Ladder Marker, Stable
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DynaMarker® Protein MultiColor Ladder Marker, Stable
冷蔵保存できる着色済みタンパク質分子量マーカー DynaMarker® Protein MultiColor Ladder Marker, Stable
掲載日情報：2019/12/24 現在Webページ番号：5167
4℃で1年間保存可能な，天然タンパク質由来の着色済みタンパク質分子量ラダーマーカーです。独自のタンパク質着色技術により高い安定性を実現し，冷蔵庫で保存できます。分子量範囲の異なる2つのタイプ(Broad Range, Low Range)があります。
※ ワイドレンジでの分離が可能なSDS-PAGE泳動バッファー：AllView PAGE Buffer®についてはこちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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タンパク質分子量マーカー選択ガイド
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製品一覧
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| 品名 | Protein MultiColor StableⅡ | Protein MultiColor Stable, Low Range | ||
|---|---|---|---|---|
| 分子量範囲 | 8.4～230 kDa | 1.7～47 kDa | ||
| 電気泳動図 |  |
 |
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| 適用バッファー |
|
Tris-Tricine SDS Buffer | ||
| 商品コード | DM660 | DM660L | DM670 | DM670L |
| サイズ | 120ロード | 600ロード | 40ロード | 120ロード |
| 包装 | 1.2 ml | 5×1.2 ml | 200μl | 3×200μl |
※ ロット毎の正確な分子量は製品添付のデータシートをご覧下さい。
追加しました。
特長
- 従来のタンパク質分子量マーカーの多くは凍結保存の必要がありましたが，本製品は4℃で長期間安定なため，凍結・融解の操作は不要で，冷蔵庫で保存できます。
- 4℃で均一な溶液です。あらかじめサンプルバッファーに溶解してありReady-to-useのため，そのままアプライできます。
- すべてのバンドでシャープかつ強い色調を示します。
- 電気泳動やエレクトロブロッティングのモニターに適しています。
■高い保存安定性
Protein MultiColor Stableシリーズは高い保存安定性を持つため，4℃での保存が可能です。
タンパク質安定性の検証
マーカーを37℃で3週間保存した後，SDS-PAGEでバンドの状態を確認した。
過酷条件で保存しても泳動像に変化がなかったため，高い保存安定性を持つことが分かる。
■正確な分子量
Protein MultiColor Stableシリーズの記載分子量は，分子量既知のタンパク質を基準とし，電気泳動的な移動度の差を基に算出しているため，正確な分子量を示します。
β-Amyloid（1-42）検出実験
Protein MultiColor Stable, Low Rangeと4.5 kDaのβ-Amyloid（1-42）をポリアクリルアミドゲルで電気泳動後，ニトロセルロース膜へ転写した（セミドライ法）。転写した膜をβ-Amyloidモノクローナル抗体と反応させ，DAB発色により検出を行った。
本マーカーは検出工程を通して着色バンドが退色することなく，高い視認性を維持していた。また，分子量数千Daの低分子量域においても，正確な分子量を表していることが分かる。
※ メンブレン湿潤状態で画像取得
追加しました。
ポリアクリルアミドゲルの調製～電気泳動までの流れ（SDS-PAGE）
Laemmli法
※ Protein MultiColor Stable, Low Range（#DM670）はTrice-Tricine SDS-PAGE用です。Trice-Tricine SDS-PAGEのゲル組成，泳動バッファー組成はこちら「Tris-Tricine SDS-PAGE」をご覧下さい。
準備する試薬
＜ポリアクリルアミドゲル＞
- 1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)
- 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)
- 30％ アクリルアミド/ビス溶液：冷暗所保存
- 10％ SDS (sodium dodecyl sulfate：ドデシル硫酸ナトリウム)
- 10％ APS (ammonium persulfate：過硫酸アンモニウム)：用事調製
- TEMED (N,N,N’,N’-tetramethyl ethylenediamine)
＜泳動バッファー＞
- Tris-Glycine SDS buffer：25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1％ SDS
＜2×サンプルバッファー＞
- 125 mM Tris-HCl（pH6.8）, 4% SDS, 20% glycerol, 10% 2-mercaptoethanol（もしくは200 mM DTT）, 0.02% BPB
試薬の調製
| 1.5M Tris-HCl (pH 8.8) | トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：18.2 g 超純水に溶解，塩酸(HCl)で pH 8.8 に調製し，100 mlとする |
| 0.5M Tris-HCl (pH 6.8) | トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：6.1 g 超純水に溶解，塩酸(HCl)で pH 6.8 に調製し，100 mlとする |
| 30％ アクリルアミド／ビス溶液（C:5％）：冷暗所保存 | アクリルアミド：28.5 g ※アクリルアミドの取り扱いには十分に注意すること。 N,N’- メチレンビスアクリルアミド：1.5 g 超純水に溶解し，100 mlとする この溶液を0.22～0.45μmのフィルターで吸引ろ過する |
| 10％ SDS (sodium dodecyl sulfate) | SDS（sodium dodecyl sulfate）：10 g 超純水に溶解し，100 mlとする |
| 10％ APS（ammonium persulfate）：用事調製 | APS（ammonium persulfate）：0.1 g 超純水1 mlに溶解する |
| 10×Tris-Glycine SDS buffer ※ 使用時は超純水で10倍希釈する |
トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：30.28 g Glycine：144.13 g SDS（sodium dodecyl sulfate）：10 g 超純水に溶解し，1 L とする（pH 調整は不要） |
| 2×サンプルバッファー ※ ストック溶液は分注して-80℃で保存する |
0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)：2.5 ml 10% SDS ：4 ml グリセロール：2 ml 2-メルカプエタノール：1 ml（もしくはDTT：0.3 g） 1% BPB溶液 ：0.2 ml 超純水で溶解し，10 mlとする |
手順
①プレートの組み立て
 |
プレート，コーム，シールガスケットは70％ エタノールで清拭してから組み立てる。 汚れているとゲルがうまく固まらず，綺麗な泳動像が得られない。 |
②分離ゲル溶液の調製
泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。
表1．分離ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
| 分離ゲル濃度 | 6％ | 7.5％ | 10％ | 12.5％ | 15％ |
|---|---|---|---|---|---|
| 超純水（ml） | 8.05 | 7.3 | 6.05 | 4.8 | 3.55 |
| 1.5 M Tris-HCl (pH 8.8) | 3.75 | 3.75 | 3.75 | 3.75 | 3.75 |
| 30％ アクリルアミド／ビス溶液 | 3.0 | 3.75 | 5.0 | 6.25 | 7.5 |
| 10％ SDS | 0.15 | 0.15 | 0.15 | 0.15 | 0.15 |
| TEMED | 0.00375 （3.75μl） |
0.00375 （3.75μl） |
0.00375 （3.75μl） |
0.00375 （3.75μl） |
0.00375 （3.75μl） |
| 10％ APS | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
③分離ゲルの重合（1時間以上）
- 調製した分離ゲル溶液をプレートに注ぐ
- 注いだ分離ゲル溶液の上に蒸留水を静かに重層する
- ゲルが固まるまで静置する
|
分離ゲル濃度が高い場合は，蒸留水ではなく，1-ブタノールを重層すると綺麗な境界面が得られる。 |
④濃縮ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。
表2．濃縮ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
| 濃縮ゲル濃度 | 3％ | 4％ | 5％ |
|---|---|---|---|
| 超純水（ml） | 3.9 | 3.7 | 3.5 |
| 0.5M Tris-HCl（pH 6.8） | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 30％ アクリルアミド／ビス溶液 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
| 10％ SDS | 0.06 | 0.06 | 0.06 |
| TEMED | 0.003 （3μl） |
0.003 （3μl） |
0.003 （3μl） |
| 10％ APS | 0.06 | 0.06 | 0.06 |
⑤濃縮ゲルの重合（1時間以上）
- 重層した蒸留水またはを1-ブタノールを取り除く
- 調製した濃縮ゲル溶液を注ぐ
- 空気が入らないように注意しながらコームを挿し込む
- ゲルが固まるまで静置する
⑥試料の調製
- 分析するタンパク質溶液と 2×サンプルバッファーを1:1で混合する
- 95℃で5分間加熱した後、氷上に置く
⑦泳動槽へゲルをセット
- シールガスケット、クリップ、コームを外す
- 泳動槽へゲルをセットする
- 泳動バッファーを注ぐ
|
泳動の乱れを防止するために，ゲル板の下の気泡をしっかり除去すること。 |
⑧電気泳動
タンパク質分子量マーカー，調製した試料をアプライし，泳動スタート。
|
・アプライする直前にウェルをピペッターなどで軽く洗浄し，ゲルの破片などの泳動の妨げとなるものを取り除く。 ・ゲルの両端のレーンは泳動が乱れやすいのでなるべく使用しない。 |
| オススメ！ | |
| 分離がワイドレンジになるSDS-PAGE用泳動バッファー AllView PAGE Buffer® (#DS520) いつもの泳動バッファーをAllViewに替えるだけ。自作ゲルでグラジエントゲルのような泳動が可能。 |
|
⑨バンドの確認
CBB染色や銀染色によりバンドを確認する。またはウエスタンブロッティングなどの次の実験に進む。
| オススメ！ | |
| CBB染色の時間を短縮したい，酢酸の刺激臭が苦手という方はこちら！ 酢酸・アルコールフリー，短時間かつ高感度にCBB染色できるQuickBlue Staining Solution (#DS500) |
|
Tris-Tricine SDS-PAGE
準備する試薬
＜ポリアクリルアミドゲル＞
- 49.5％ アクリルアミド/ビス溶液（C:3% )：冷暗所保存
- 3 M Tris-HCl（pH 8.45）, 0.3％ SDS
- 10％ APS（ammonium persulfate：過硫酸アンモニウム）
- TEMED（N,N,N’,N’-tetramethyl ethylenediamine）
＜泳動バッファー＞
- 陽極側バッファー：0.1 M Tris-HCl（pH 8.9）
- 陰極側バッファー：0.1 M Tris, 0.1 M Tricine, 0.1 M SDS
＜4×サンプルバッファー＞
- 150 mM Tris-HCl（pH7.0）, 12% SDS, 6% 2-mercaptoethanol（もしくは400 mM DTT）, 30% Glycerol, 0.05% CBB
試薬の調製
| 49.5％ アクリルアミド／ビス溶液（C:5％）：冷暗所保存 | アクリルアミド：48 g ※アクリルアミドの取り扱いには十分に注意すること。 N,N’- メチレンビスアクリルアミド：1.5 g 超純水に溶解し，100 mlとする この溶液を0.22～0.45μmのフィルターで吸引ろ過する |
| 3 M Tris-HCl（pH8.45）, 0.3％ SDS | トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：36.4 g SDS（sodium dodecyl sulfate）：0.3 g（0.3％） 超純水に溶解，塩酸（HCl）でpH 8.45に調製し，100 mlとする |
| 10％ APS（ammonium persulfate）：用事調製 | APS（ammonium persulfate）：0.1 g 超純水1 mlに溶解する |
| 10×陽極側バッファー ※ 使用時は超純水で10倍希釈する |
トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：121.14 g 超純水に溶解，塩酸（HCl）でpH 8.9に調製し，1 Lとする |
| 10×陰極側バッファー ※ 使用時は超純水で10倍希釈する |
トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Tris）：121.14 g Tricine：179.17 g SDS（sodium dodecyl sulfate）：10 g 超純水に溶解し，1 Lとする（pH 調整は不要） |
| 4×サンプルバッファー ※ ストック溶液は分注して-80℃で保存する |
0.5 M Tris-HCl（pH 7.0）：3 ml SDS（sodium dodecyl sulfate）：1.2 g グリセロール： 3 ml 2-メルカプエタノール：0.6 ml（もしくはDTT 0.6 g ） 1% CBB溶液：0.5 ml 超純水で溶解し，10 mlとする |
手順
①プレートの組み立て
|
プレート，コーム，シールガスケットは70％ エタノールで清拭してから組み立てる。 汚れているとゲルがうまく固まらず，綺麗な泳動像が得られない。 |
②分離ゲル溶液の調製
表3．分離ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
| 分離ゲル濃度 | 16.5％ |
|---|---|
| 超純水 | 7.6 ml |
| 3 M Tris-HCl（pH8.45）, 0.3％ SDS | 10 |
| 49.5％ アクリルアミド／ビス溶液 | 10 |
| グリセロール | 2.4 |
| TEMED | 0.01 （10μl） |
| 10％ APS | 0.1 |
③分離ゲルの重合（1時間以上）
- 調製した分離ゲル溶液をプレートに注ぐ
- 注いだ分離ゲル溶液の上に蒸留水を静かに重層する
- ゲルが固まるまで静置する
|
分離ゲル濃度が高い場合は，蒸留水ではなく，1-ブタノールを重層すると綺麗な境界面が得られる。 |
④濃縮ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。
表4．濃縮ゲル溶液の調製（ミニゲル2枚の場合）
| 濃縮ゲル濃度 | 4％ |
|---|---|
| 超純水 | 8 ml |
| 3 M Tris-HCl（pH8.45）, 0.3％ SDS | 3 |
| 49.5％ アクリルアミド／ビス溶液 | 1 |
| 10％ SDS | 0.06 |
| TEMED | 0.009 （9μl） |
| 10％ APS | 0.09 |
⑤濃縮ゲルの重合（1時間以上）
- 重層した蒸留水またはを1-ブタノールを取り除く
- 調製した濃縮ゲル溶液を注ぐ
- 空気が入らないように注意しながらコームを挿し込む
- ゲルが固まるまで静置する
⑥試料の調製
- 分析するタンパク質溶液と 4×サンプルバッファーを3:1で混合する。
- 95℃で5分間加熱*1した後，氷上に置く
*1 SDS存在下において加熱すると凝集するタンパク質は，40℃で30～60分とする。
⑦泳動槽へゲルをセット
- シールガスケット、クリップ、コームを外す
- 泳動槽へゲルをセットする
- 泳動バッファーを注ぐ*2
*2 下部バッファー槽に陽極側バッファーを，上部バッファー槽には陰極バッファーをそれぞれ注ぐ。
|
泳動の乱れを防止するために，ゲル板の下の気泡をしっかり除去すること。 |
⑧電気泳動
タンパク質分子量マーカー，調製した試料をアプライし，泳動スタート。
|
・アプライする直前にウェルをピペッターなどで軽く洗浄し，ゲルの破片などの泳動の妨げとなるものを取り除く。 ・ゲルの両端のレーンは泳動が乱れやすいのでなるべく使用しない。 |
⑨バンドの確認
CBB染色や銀染色によりバンドを確認する。またはウエスタンブロッティングなどの次の実験に進む。
| オススメ！ | |
| CBB染色の時間を短縮したい，酢酸の刺激臭が苦手という方はこちら！ 酢酸・アルコールフリー，短時間かつ高感度にCBB染色できるQuickBlue Staining Solution (#DS500) |
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追加しました。
価格
[在庫・価格 ：2021年10月22日 13時51分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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Protein MultiColor, Stable II, DynaMarker |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Protein MultiColor, Stable II, DynaMarker, Large |
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DynaMarker Protein MultiColor Stable, Low Range |
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DynaMarker Protein MultiColor Stable, Low Range |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2021年10月22日 13時51分現在]
Protein MultiColor, Stable II, DynaMarker
文献数：0
- 商品コード：DM660
- メーカー：BDL
- 包装：1.2ml
- 価格：¥18,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
4℃で長期保存可能な，5色で着色済みのタンパク質分子量ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は230 kDa, 141 kDa, 100 kDa, 71 kDa, 45 kDa, 30 kDa, 25 kDa, 17 kDa, 8.4 kDa。ミニゲル約120レーン分。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2020年9月15日号 p.17
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| 製品記事 |
バイオダイナミクス研究所 製品特集 電気泳動(SDS-PAGE) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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Protein MultiColor, Stable II, DynaMarker, Large
文献数：0
- 商品コード：DM660L
- メーカー：BDL
- 包装：5x1.2ml
- 価格：¥78,500
- 在庫：3個以上
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
4℃で長期保存可能な，5色で着色済みのタンパク質分子量ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は230 kDa, 141 kDa, 100 kDa, 71 kDa, 45 kDa, 30 kDa, 25 kDa, 17 kDa, 8.4 kDa。ミニゲル約600レーン分。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年11月15日号 p.32
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バイオダイナミクス研究所 製品特集 電気泳動(SDS-PAGE) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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DynaMarker Protein MultiColor Stable, Low Range
文献数：0
- 商品コード：DM670
- メーカー：BDL
- 包装：200μl
- 価格：¥14,500
- 在庫：3個以上
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
4℃で長期保存可能な，4色で着色済みのタンパク質低分子量用ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は，47 kDa，31 kDa，22 kDa，17 kDa，8.8 kDa，3.8 kDa，1.7 kDa。ミニゲル約40レーン分。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年4月1日号 p.21
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DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range バイオダイナミクス研究所 製品特集 電気泳動(SDS-PAGE) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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DynaMarker Protein MultiColor Stable, Low Range
文献数：0
- 商品コード：DM670L
- メーカー：BDL
- 包装：3x200μl
- 価格：¥38,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
4℃で長期保存可能な，4色で着色済みのタンパク質低分子量用ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は，47 kDa，31 kDa，22 kDa，17 kDa，8.8 kDa，3.8 kDa，1.7 kDa。ミニゲル約120レーン分。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2018年12月15日号 p.32
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| 製品記事 |
DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range バイオダイナミクス研究所 製品特集 電気泳動(SDS-PAGE) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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