E. coli でのタンパク質高発現を簡便にできるpETベクターとコンピテントセルのセット pET Expression Pack
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：3877
pET発現ベクターのDynaVectorと、発現用のZipコンピテントセルBL21(DE3)をセットにした製品です。
DynaVector
発現効率が高い T7 プロモーターにより E. coli で目的タンパク質を発現できるpET発現ベクターです。高コピー数ベクター、中程度コピー数ベクター、および LacI による発現のコントロールが可能なベクターがあり、それぞれについてアンピシリンまたはカナマイシンに対する薬剤耐性遺伝子を組み込んだ製品があります。
Zip Competent Cell BL21(DE3)
追加しました。
- pETシステムについて
- DynaVectorの特長
- Zip Competent Cell BL21 (DE3)の特長
- DynaVector と Zip Competent Cell BL21 (DE3)を用いた各種タンパク質発現例
- セット内容
- 価格
pETシステムについて
T7発現システムはT7プロモーターを有するpET発現ベクターと、BL21(DE3)大腸菌株などのT7 RNAポリメラーゼ遺伝子が組み込まれたバクテリオファージλDE3の溶原菌を宿主として用いた、強力な発現システムです。
BL21(DE3)大腸菌ゲノム中のlac UV5プロモーター支配下にあるT7 RNAポリメラーゼ遺伝子は、isopropyl-1-thio-β-D-galactopyranoside (IPTG)添加により発現誘導されます。発現したT7 RNAポリメラーゼは、pETベクターのT7プロモーターを認識し、T7プロモーター下流に導入された目的タンパク質配列を強力に発現させます。
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DynaVectorの特長
- 6 種類のベクターのマルチクローニングサイトはすべて共通です。そのため、DynaVector のシリーズ間で、他のベクターへのサブクローニングが容易に行えます。
- ベクターのサイズが小さいため、大きなサイズのインサートを挿入しても高効率の形質転換が期待できます。
- N 末端に His タグを融合したタンパク質を発現できます。また、クローニングサイト中の Nde I 部位に目的遺伝子を挿入すると、タグなしのタンパク質を発現できます。
各ベクターの特長
| ベクター名 | pETUA (#DS255UA) | pETBA (#DS255BA) | pETIA (#DS255IA) | pETUK (#DS255UK) | pETBK (#DS255BK) | pETIK (#DS255IK) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 薬剤耐性遺伝子 | アンピシリン（Ampicillin） | カナマイシン(Kanamycin) | ||||
| 複製起点（Replicon） | pUC | pMB1 | pUC | pMB1 | ||
| プラスミドのコピー数 | 高コピー(500～700個) | 中程度(10～20個) | 高コピー(500～700個) | 中程度(10～20個) | ||
| 6×His tagの付加（N末端） | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ |
| 非誘導時発現抑制 | － | － | ○ | － | － | ○ |
|
特長・用途 | プラスミドの精製が容易。宿主に毒性のないタンパク質の発現に適している。 | 幅広い種類のタンパク質発現に使用できる。 | 非誘導時の発現を抑制できるため、宿主に毒性を有するタンパク質の発現に適している。 | プラスミドの精製が容易。宿主に毒性のないタンパク質の発現に適している。 | 幅広い種類のタンパク質発現に使用できる。 | 非誘導時の発現を抑制できるため、宿主に毒性を有するタンパク質の発現に適している。 |
| サイズ | 2,741 bp | 3,269 bp | 4,012 bp | 2,695 bp | 3,223 bp | 3,966 bp |
※発現させるタンパク質の宿主大腸菌への影響が明らかでないとき、またベクターの選択に迷ったときはpETBAをお試し下さい。非誘導時の発現を抑えたいときはpETIAの使用が考えられます。発現させるタンパク質が宿主大腸菌にあまり影響を与えないときは、pETUAを使用するとプラスミドのコピー数が多いため、ミニプレップ、シークエンシングなどをしやすいメリットがあります。
※カナマイシン耐性遺伝子を有するpETUK、pETBK、pETIKは、それぞれpETUA、pETBA、pETIAと同様の特長があります。これらのベクターは、アンピシリン耐性のクローニングベクターからのサブクローニングに有用です。
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Zip Competent Cell BL21 (DE3)の特長
- 約 5 分で形質転換操作を終了でき、操作時間の大幅な短縮が可能です。
- 形質転換効率：≧ 2 × 106 cfu/μg (pUC19)
- 1 回の操作で使い切れるように 100 μl ずつチューブに分注されています。
Zip Competent Cell BL21 (DE3)の操作法概略
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DynaVector と Zip Competent Cell BL21 (DE3)を用いた各種タンパク質発現例
 | M : DynaMarker Protein Eco (#DM610) 1 : pETUK（ 65 kDa のタンパク質） 2 : pETBA（ 65 kDa のタンパク質） 3 : pETUA（ 45 kDa のタンパク質） 4 : pETBA（ 44 kDa のタンパク質） 5 : pETBK（ 44 kDa のタンパク質） 6 : pETIK （30 kDa のタンパク質） |
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セット内容
- DynaVector（1種類）
- Zip Competent Cell BL21(DE3)（100 μl×3本）
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月16日 20時15分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETUA) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETBA) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETIA) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETUK) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETBK) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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pET Expression Pack (pETIK) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年04月16日 20時15分現在]
pET Expression Pack (pETUA)
文献数： 0
- 商品コード：DS255UA
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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pET Expression Pack (pETBA)
文献数： 0
- 商品コード：DS255BA
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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pET Expression Pack (pETIA)
文献数： 0
- 商品コード：DS255IA
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
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pET Expression Pack (pETUK)
文献数： 0
- 商品コード：DS255UK
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
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pET Expression Pack (pETBK)
文献数： 0
- 商品コード：DS255BK
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
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pET Expression Pack (pETIK)
文献数： 0
- 商品コード：DS255IK
- メーカー：BDL
- 包装：1set
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
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■ Zip Competent Cell BL21 (DE3)の単独製品
[在庫・価格 ：2024年04月16日 20時15分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年04月16日 20時15分現在]
DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
文献数： 0
- 商品コード：DS255
- メーカー：BDL
- 包装：10x100μl
- 価格：¥20,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
約5分で形質転換が完了する発現用E. coliコンピテントセルBL21(DE3)(Competent Cell BL21(DE3))。形質転換効率：＞2×106 cfu/μg(pUC19) |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -80℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
100周年ありがとうキャンペーン p.50 ニュース2023年4月15日号 p.18
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| 製品記事 |
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