Q-1. 保存条件について

A-1. コンピテントセルは温度の変化によって品質が低下します。納品時にはドライアイス同梱の容器から直接-80℃のディープフリーザーに移して下さい。

Q-2. DNA純度について

A-2. エタノール沈殿，カラム精製キットなどでできるだけ不純物を除いて下さい。エレクトロポレーションを行う場合は特に脱塩が大切です。ライゲーション産物などを導入する際，（DNA量に余裕がある場合は）フェノール／クロロホルム処理およびエタノール沈殿を行うことにより形質転換効率が上昇する場合があります。

Q-3. DNA量について

A-3. トランスフォーメーションに用いるDNA量を増やすと，得られるコロニーの数が増加します。ただし，コロニー数の増加はDNA量に比例しないため，過剰にDNAを用いると見かけ上のコンピテンシーが低くなることがあります。

Q-4. 凍結融解について

A-4. 氷上で融解し，融解した後すぐに使用して下さい。ただし，JetGiga DH5α（#DS230）については融解・分注しての再凍結が可能です。

Q-5. DNA添加後の撹拌について

A-5. コンピテントセルにDNAを加えた後すぐに撹拌して下さい。撹拌が激しすぎると形質転換効率が低下するものの，均一に撹拌されることも必要です。そのため，10回程度チューブを指ではじくようにしての撹拌をお勧めします。

Q-6. ヒートショックについて

A-6. ヒートショックの温度および時間は厳密に守って下さい。規定の温度および時間以外では形質転換効率が低下します。

Q-7. 形質転換を行った細胞の希釈について

A-7. プレーティングの際にコンピテントセルを希釈する場合は，SOC, SOB, LBなどを使用して下さい。水などで希釈を行うと形質転換効率が低下します

会員ID：
パスワード：

キーワード	：

キーワード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
製品区分	：	中止製品	：

キーワード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
中止製品	：

抗原種ヘルプ	：	交差性ヘルプ	：	免疫動物ヘルプ	：
標識ヘルプ	：	適用ヘルプ	：	性状ヘルプ	：
吸収処理ヘルプ	：	クラスヘルプ	：	クローンヘルプ	：

製品区分	：	一致条件	：	中止製品	：

メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：
メーカー	：選択	商品コード	：

CAS番号	：

メーカー	：選択	中止製品	：

メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
キーワード	：

WEBページ番号検索	：

HOME> 試薬> 遺伝子工学> 形質転換・培地> E.coliコンピテントセル> ダイナコンピテントセル（DynaCompetent Cells）選択ガイド

ダイナコンピテントセル（DynaCompetent Cells）選択ガイド

掲載日情報：2020/11/13 現在Webページ番号：8342

バイオダイナミクス /
BioDynamics Laboratory Inc.（株式会社バイオダイナミクス研究所）

BioDynamics Labolatory社（バイオダイナミクス研究所）の迅速・安価・高効率なコンピテントセル（DynaCompetent Cells）をご紹介します。クローニング用，タンパク質発現用それぞれに，特長ある製品を取りそろえています。
併せて，コンピテントセル使用時の注意点とトラブルシューティングを掲載しています。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

⇒BioDynamics Labolatory社製品特集へ戻る

クローニング用コンピテントセルお勧め製品
タンパク質発現用コンピテントセルお勧め製品
クローニング・ライブラリー作製用コンピテントセル各製品の特長
タンパク質発現用コンピテントセル各製品の特長
コンピテントセル使用時の注意点とトラブルシューティング
コンピテントセル使用時に推奨される培地等の調製方法

クローニング用コンピテントセルお勧め製品

プラスミドが傷つきにくい	低コスト	操作時間	高効率
DS410 DynaCompetent Cells LowInSeq 大腸菌ゲノム中のDNA型転移因子が低活性	DS230 DynaCompetent Cells JetGiga DH5α 分注・再凍結可能 (50本に分注で420円／本)	DS230 DynaCompetent Cells JetGiga DH5α 操作時間：6分	DS230 DynaCompetent Cells JetGiga DH5α 1×10⁹ cfu/μg
		DS225 DynaCompetent Cells Jet DH5α 操作時間：10分 (ヒートショックなし)	DS228 DynaCompetent Cells DH5α for Electroporation 2×10⁹ cfu/μg
			DS218 DynaCompetent Cells JM109 for Electroporation 2×10⁹ cfu/μg

目次に戻る

タンパク質発現用コンピテントセルお勧め製品

DS255 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)	短時間(5分, ヒートショックなし） T7発現系
DS250 DynaCompetent Cells BL21(DE3)	スタンダードコンピテントセル T7発現系
DS258 DynaCompetent Cells BL21(DE3) for Electroporation	エレクトロポレーション T7発現系
DS260 DynaCompetent Cells BL21(DE3)pLysS	T7リゾチームによる発現制御

目次に戻る

クローニング・ライブラリー作製用コンピテントセル各製品の特長

商品コードをクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。

用　途	クローニング・ライブラリー作製用コンピテントセル
品　名	DynaCompetent Cells LowInSeq	DynaCompetent Cells JetGiga DH5α	DynaCompetent Cells Jet DH5α	DynaCompetent Cells DH5α	DynaCompetent Cells JM109	DynaCompetent Cells DH5α/JM109 for Electroporation
商品コード	DS410	DS230	DS225	DS220	DS210	DS228	DS218
特　長	プラスミドが傷つきにくい	安価迅速高効率	迅速	スタンダード	スタンダード	高効率	高効率
E. coli株	LowInSeq	DH5 α			JM109	DH5 α	JM109
形質転換効率（pUC19）	＞ 1 × 108	＞ 1 × 109	＞ 2 × 108	＞ 5 × 108	＞ 5 × 108	＞ 2 × 109
操作時間	約65分	約6分	約10分	約80分	約80分	-
ヒートショック	必要	必要	不要	必要	必要	-
回復培養	必要	不要	不要	必要	必要	必要
青白スクリーニング	×	◎（IPTG の添加不要）			○	◎	○

目次に戻る

タンパク質発現用コンピテントセル各製品の特長

商品コードをクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。

用　途	タンパク質発現用コンピテントセル
品　名	DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)	DynaCompetent Cells BL21(DE3)	DynaCompetent Cells BL21(DE3) for Electroporation	DynaCompetent Cells BL21(DE3)pLysS
商品コード	DS255	DS250	DS258	DS260
E. coli 株	BL21（ DE3 ）			BL21（ DE3 ） pLysS
形質転換効率（pUC19）	≧ 2 × 106	≧ 5 × 107	＞ 2 × 109	≧ 5 × 107
操作時間	約 5 分	約80分	-	約80分
ヒートショック	不要	必要	-	必要
回復培養	不要	必要	必要	必要
誘導発現	IPTG添加
特　長	lon proteaseとompT membrane protease遺伝子の欠損により発現タンパク質の分解を防止
	IPTGによるT7 RNAポリメラーゼ誘導
	―			T7リゾチームにより，バックグラウンドタンパク質の発現レベルを低下

目次に戻る

コンピテントセル使用時の注意点とトラブルシューティング

コンピテントセルの形質転換（transformation）とは，コンピテントセルにプラスミドDNAを導入する操作です。日常的に行われる実験操作ではありますが，小さなポイントに不備があると，「コロニーが出ない」「コロニーが少ない」などの問題が生じることがあります。以下の点についてご注意いただき，コンピテントセルをご使用下さい。

項　目	注意点
保存条件	コンピテントセルは温度の変化によって品質が低下します。納品時にはドライアイス同梱の容器から直接-80℃のディープフリーザーに移して下さい。
DNA純度	エタノール沈殿，カラム精製キットなどでできるだけ不純物を除いて下さい。エレクトロポレーションを行う場合は特に脱塩が大切です。
DNA純度	ライゲーション産物などを導入する際，（DNA量に余裕がある場合は）フェノール／クロロホルム処理およびエタノール沈殿を行うことにより形質転換効率が上昇する場合があります。
DNA量	トランスフォーメーションに用いるDNA量を増やすと，得られるコロニーの数が増加します。ただし，コロニー数の増加はDNA量に比例しないため，過剰にDNAを用いると見かけ上のコンピテンシーが低くなることがあります。
凍結融解	氷上で融解し，融解した後すぐに使用して下さい。ただし，JetGiga DH5α（#DS230）については融解・分注しての再凍結が可能です。
DNA添加後の撹拌	コンピテントセルにDNAを加えた後すぐに撹拌して下さい。撹拌が激しすぎると形質転換効率が低下するものの，均一に撹拌されることも必要です。そのため，10回程度チューブを指ではじくようにしての撹拌をお勧めします。
ヒートショック	ヒートショックの温度および時間は厳密に守って下さい。規定の温度および時間以外では形質転換効率が低下します。
形質転換を行った細胞の希釈	プレーティングの際にコンピテントセルを希釈する場合は，SOC, SOB, LBなどを使用して下さい。水などで希釈を行うと形質転換効率が低下します。

目次に戻る

コンピテントセル使用時に推奨される培地等の調製方法

LB培地（液体）

トリプトン（Tryptone）	10 g
酵母エキス（Yeast Extract）	5 g
塩化ナトリウム	10 g

上記を精製水1 Lに加える
5N NaOHを用いてpHを7.0に調整
121℃で15分間オートクレーブ
室温または4℃で保存

LB培地（寒天）

トリプトン（Tryptone）	10 g
酵母エキス（Yeast Extract）	5 g
塩化ナトリウム	10 g

上記を精製水1 Lに加える
5N NaOHを用いてpHを7.0に調整
培地用寒天（Agar） 14 gを加える
121℃で15分間オートクレーブ
50℃程度まで冷却（必要に応じて抗生物質を添加）
プレートに分注
室温で静置
固まったらプレートを裏返して4℃で保存

IPTG（Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside）溶液

IPTG 0.238 gを10 mlの精製水に溶解（終濃度100 mM）
ろ過滅菌
分注して-20℃で保存

X-Gal（5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside）溶液

20 mg/mlになるようにdimethylformamide（DMF）に溶解
遮光して-20℃で保存

目次に戻る

お問い合わせ先

（テクニカルサポート試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。