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厳密な発現誘導ができるレンチウイルスベクター SparQ Cumate Switch Inducible System

掲載日情報:2018/05/29 現在Webページ番号:4984

レンチウイルスベクターを用いて,目的遺伝子またはmiRNAを厳密かつ可逆的に発現誘導できるシステムです。目的遺伝子発現用ベクターと,CymRリプレッサー発現用ベクターを細胞に導入し,発現誘導物質Cumateの添加により誘導を行います。

※ご注意
目的遺伝子を誘導発現させるCumate switch promoterを持つベクターは,レンチウイルス粒子によって目的細胞に導入してください。トランスフェクションによってプラスミドのまま導入させますと,上流のRSV promoterによって恒常的に発現してしまうことがございます。


特長

  • 強力なCMV5プロモーターをCumateオペレーター配列により発現調節しています。
  • 非誘導時のバックグラウンド発現が極めて低く抑えられています。
  • 発現誘導物質Cumateは,細胞毒性を有さない低分子化合物です。
  • Cumateの添加量により,誘導レベルを容易に調節できます。
  • 特殊な培地や培養条件は必要ありません。
  • 発現誘導のONとOFFを可逆的に繰り返すことができます(図参照)。
  • GFPやRFPまたはGFP-PuroやRFP-Puroをマーカー遺伝子として,目的遺伝子と同時に発現誘導できます(マーカー遺伝子を恒常発現させるベクターもあります)。

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原理

本システムでは,Cumateオペレーター配列(CuO)に強く結合しているCymRリプレッサーを介して発現のON/OFFが行われます。CymRリプレッサーにより遺伝子の発現が抑制されている状態(図:Cumate Switch OFF)にCumateを加えると,CumateがCymRリプレッサーに結合しCymRリプレッサーがCuOから解離するため,遺伝子発現が起こります(図:Cumate Switch ON)。


Cumate System原理

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Cumateによる可逆的な発現誘導

Cumate System発現誘導例

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SparQ Cumate Inducible Lentivector

cDNAおよびmiRNA用の発現ベクターです。シングルまたはデュアルプロモーターの製品があります。
マーカー遺伝子は,シングルプロモーターの製品ではIRESまたはT2AによりCumate依存的に,デュアルプロモーターの製品ではEF1プロモーターによりCumateの有無に関係なく恒常発現します。マーカー遺伝子はGFPおよびRFPから選択できます。
T2Aを用いた製品(#QM521A-1,#QM522A-1)は,miRNAの発現には適していません。IRESまたはデュアルプロモーターを用いた製品をご使用下さい。


ベクター選択表

プロモーター 目的遺伝子の発現
マーカー
の発現
発現物 マーカー 商品コード
cDNA miRNA
シングル IRES Cumate Switch Promoter (IRES) GFP #QM530A-2
RFP #QM531A-2
T2A (T2A) × GFP #QM521A-1
RFP #QM522A-1
デュアル EF1 GFP #QM511B-1
RFP #QM512B-1
GFP-Puro #QM513B-1
RFP-Puro #QM516B-2

Cumateベクターマップ

[在庫・価格 :2022年05月21日 00時14分現在]

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CymR Repressor Lentivector

CymR Repressor発現用レンチベクターです。CymRリプレッサー発現細胞の樹立に用います。
T2Aによりピューロマイシン耐性遺伝子またはRFPをマーカー遺伝子として発現します。


CymR Repressor Lentivector

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ウイルス粒子にパッケージング済みの製品(#QM350VA-1, #QM200VA-2,#QM300VA-1)の力価は1×106 cfu/mlです。


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Cumate Solution

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Cumate Solution, 1000×

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Cumate Starter Pack

SparQ Cumate Inducible Lentivector(1種類を選択)とCymR Repressor Lentivector(#QM-200VA-2)およびCumate Solutionをセットにしたスターターパックです。

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Cumate Starter Pack
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構成品:SparQ Cumate Inducible Lentivector(1種類を選択),CymR Repressor Lentivector(#QM-200VA-2),Cumate Solution。Iducible Lentivectorは,選択可能なベクターから,1種類を注文時にご指定下さい。選択可能なベクター:#QM500A-1,#QM511B-1,#QM512B-1,#QM513B-1,#QM516B-2,#QM521A-1,#QM522A-1,QM530A-2,#QM531A-2。
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Cumate Starter Pack

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ウイルスベクター関連製品ご購入時のご注意
本製品はウイルスベクター関連製品のため,購入時にご使用者確認書が必要です。ご注文の際は,「ウイルスベクター関連製品 ご使用者確認書」に必要事項をご記入の上,販売店担当者にお渡し下さい。
なお,製品をご使用の際には「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律(カルタヘナ法)」および所属組織における安全管理規定に従い,しかるべき施設で実験を行って下さい。詳細は文部科学省ライフサイエンス課のホームページをご覧下さい。


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All-in-one Cumate Switch Inducible Lentivector

All-in-one Cumate Switch Inducible Lentivector

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pCDH-CuO-MCS-EF1-CymR-T2A-Puro All-in-one Inducible Lentivector

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