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組織・培養細胞の剥離/分離/分散溶液 Accutaseシリーズ

掲載日情報:2024/04/05 現在Webページ番号:2334

接着細胞の剥離や、組織から初代培養細胞を分離、分散させるのに適した調製済み試薬です。ヒトES細胞、ヒト間葉系幹細胞(human mesenchymal stem cell)、ヒト神経幹細胞(human neural stem cell)などにおける使用実績があります。
溶液状でReady-to-useのAccutaseと、凍結乾燥粉末状のAccutaseLZがあります。

Accutaseのサンプルをご用意しています。サンプルをご希望の方は当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

処理前:モノレイヤーの細胞層(100×)
処理後:細胞は剥離している(100×)
処理前:モノレイヤーの細胞層(100×) 処理後:細胞は剥離している(100×)

Accutaseの使用例(図をクリックすると拡大します(🔍))

特長

  • プロテアーゼ活性とコラゲナーゼ活性が最大限に効果を発揮するように組み合わせてあります。
  • 穏やかかつ迅速に作用するので、高い細胞生存率を示します。
  • 哺乳動物細胞や微生物由来の物質は含んでいません。
  • 反応停止や中和操作は不要です。
  • Accutaseを用いて剥離、分散させた細胞は、さまざまなアプリケーションに使用できます。

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製品ラインナップ

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 Accutaseシリーズ Accumax(関連製品)
 ☞ サンプル 
Accutase
 ☞ サンプル 
AccutaseLZ AccutaseGMP
製品外観 Accutase製品外観🔍 AccutaseLZ製品外観🔍 AccutaseGMP製品外観🔍 Accumax製品外観🔍
製品概要 Dulbecco's PBS(0.5 mM EDTA-4Na、フェノールレッド含有)で調製済みのReady-to-useフォーマットです。 凍結乾燥品で、省スペースで保管できます。蒸留水を加えて溶解し、ろ過滅菌を行って調製します。1バイアルで500 mlのAccutaseが調製できます。
調製方法
ISO13485:2106 認定品質管理システムに基づいたGMP製造プロトコルに準拠して製造し、Accutaseと同様の細胞剥離性能を発揮するように配合されています。また、20 nmのフィルターでウイルスろ過済みです。 プロテアーゼ、コラゲナーゼおよびDNaseの活性が組み合わされた調製済みの細胞分離/分散溶液です。
包装 100 ml 500 ml 500 ml 100 ml 500 ml 100 ml 500 ml
商品コード AT104 AT104-500 AT106-500 AT107-100 AT107-500 AM105 AM105-500
性状 溶液 凍結乾燥品 溶液 溶液
GMP準拠
分析証明書
原産地証明書
BSE/TSEステートメント
酵素活性 標準 強め
フェノールレッド 含有 不含
反応停止、中和操作 不要
動物・微生物由来成分 不含


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適用例

  • バイオリアクターによる細胞の大量培養
  • 細胞の継代
  • フローサイトメトリー
  • 細胞表面マーカーの解析
  • 血清飢餓による細胞周期同調
  • がん遺伝子導入による形質転換
  • ウイルス増殖試験
  • 神経冠細胞移動アッセイ
  • 細胞増殖アッセイ
  • 細胞の接触走性アッセイ
  • 腫瘍細胞の遊走アッセイ

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使用実績のある細胞

  • 線維芽細胞      
  • ケラチノサイト    
  • 血管内皮細胞        
  • 血管平滑筋細胞      
  • 肝細胞   
  • 肝前駆細胞   
  • ヒトES細胞(human embryonic stem cell)   
  • ヒト間葉系幹細胞(human mesenchymal stem cell)   
  • ヒト神経幹細胞(human neural stem cell)   
  • ニワトリ初代培養神経細胞  
  • 骨髄幹細胞  
  • マクロファージ     
  • マウス精巣胚細胞  
  • 293    
  • 3T3    
  • A375   
  • BHK   
  • CHO    
  • COS    
  • D54     
  • HeLa  
  • HT1080  
  • L929  
  • M24   
  • NT2   
  • MG63  
  • U251  
  • Sf9   
  • Vero   

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使用例

Accutaseによる細胞の剥離

図をクリックすると拡大します(🔍)

Accutaseによる細胞の剥離

培養用ディッシュを用いてDMEM(10% FBS含有)培地で培養したヒト線維肉腫MG63細胞株を、Accutaseを用いて剥離した。Accutase処理時間を変えて細胞を回収して計数を行い、細胞生存性を測定した。Accutaseでの処理により、迅速に細胞剥離が起こり(処理後5分)、単一細胞に分散し、その後の細胞生存性も高いことがわかる。Accutaseは穏やかに作用するため、45分間処理した細胞でも、97±3%と高い生存性を有していた。

Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性

図をクリックすると拡大します(🔍)

Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性

ヒトES細胞を培養後、Accutaseまたはコラゲナーゼで剥離し、凍結保存した。液体窒素中で2か月間保存後に播種し、1日後に全細胞数と生存細胞数を計数した。Accutaseで剥離処理を行った細胞(緑色)の方が、コラゲナーゼで剥離を行った細胞(青色)よりも、凍結保存後の生存細胞数が多いことがわかる。


Accutaseの使用動画

Semper Lenis "Always Gentle" reattachment of neuronal stem cells passaged with Accutase.

Etaluma-Human Neural Stem Cells in Culture 2

Accutaseにより分散したヒト神経幹細胞をWPI Fluorodishのカバーガラス底に播種し、6日間タイムラプス撮影を行った。

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操作方法概略

Accutase

操作はすべて滅菌条件下で行って下さい。

  1. 接着性細胞を培養している容器から、培地を吸引除去する。
  2. 細胞全体を覆う量のAccutaseを添加する。
  3. 約5~10分間静置する。
  4. 顕微鏡下で細胞を観察し、細胞の形態が球状となって軽く浮遊していることを確認したら、容器の縁を何回かタッピングする(または穏やかに数回ピペッティングを行う)。
  5. 細胞数を計数し、継代する。酵素阻害物質の添加や洗浄は不要。

詳細プロトコル(英語)


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AccutaseLZ(調製方法)

  1. 400 mlの室温または冷蔵蒸留水を用意し、500 mlメスシリンダーに入れる。
  2. AccutaseLZのバイアルのふたを外し、冷蔵蒸留水40 mlを加える。ふたを閉めて1~2分間ボルテックスまたは転倒撹拌を行い、溶解させる。
  3. ピペットを用いてバイアル中のAccutase溶液をメスシリンダーに移す。
  4. 空になったバイアルに25 mlの冷蔵蒸留水を加え、すすいだ後、同様に溶液をメスシリンダーに移す。これをもう一度繰り返す。
  5. メスシリンダーに冷蔵蒸留水を加え、500 mlまでメスアップする。
  6. パラフィルムなどでメスシリンダーに封をして、転倒撹拌を複数回行い混合する。
  7. 0.22 μm のフィルターを用いてろ過滅菌を行う。セルロースメンブレンなど、タンパク質付着性の低いフィルターを用いる。
  8. 調製したAccutase溶液は、冷蔵(2~8℃)で約2か月保存可能。

詳細プロトコル(英語)


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使用文献リスト


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FAQ


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価格

Accutase

[在庫・価格 :2024年07月15日 14時55分現在]

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納期 文献数
Accutase
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 280
  • 使用文献
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説明文
組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2024年3月1日号 p.26
ニュース2023年2月15日号 p.19
ニュース2020年10月15日号 p.9

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Accutase
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 264
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組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.168
ニュース2020年4月1日号 p.4
ニュース2020年3月1日号 p.23

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[在庫・価格 :2024年07月15日 14時55分現在]

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Accutase

文献数: 280

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
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掲載カタログ ニュース2024年3月1日号 p.26
ニュース2023年2月15日号 p.19
ニュース2020年10月15日号 p.9

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Accutase

文献数: 264

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.168
ニュース2020年4月1日号 p.4
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AccutaseLZ

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AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml)
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[在庫・価格 :2024年07月15日 14時55分現在]

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AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml)

文献数: 0

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法規制等
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Accutase GMP

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[在庫・価格 :2024年07月15日 14時55分現在]

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AccutaseGMP

文献数: 0

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AccutaseGMP

文献数: 0

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法規制等
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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