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血球計算盤を使用した細胞数の計測 細胞数の測定方法 [ 参考資料 ]
掲載日情報：2015/10/07 現在Webページ番号：3075
血球計算盤を使用した細胞数の測定方法をご紹介します。細胞数の計測は、細胞培養の一連の操作で、細胞を分散・継代するステップで重要となります。細胞数の計測法の一つとして、血球計算盤を使用し、生存率の測定に Trypan blue などの色素を用いる方法があります。
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細胞数の測定
操作例
- 血球計算盤およびカバーガラスの表面を70％イソプロパノールで洗浄し、余分なイソプロパノールをふき取り風乾する。
- Reagent grade water でカバーガラスの側面をぬらし、血球計算盤に貼りつける。
- 細胞懸濁液をパスツールピペット等でよく撹拌後、すぐに血球計算盤に流し込み、溝の上まで満たす。
※懸濁液の血球計算盤への流し込みは、多すぎても少なすぎてもいけない。 - 1.〜3. の操作を別の血球計算盤を使用して行う（2回測定用）。
- 顕微鏡に血球計算盤を置き、グリッドラインに焦点を合わせる（10×対物レンズ）。
- カウンターを用いて1 mm2 エリア（下図参照）の、細胞数を計測する。
※誤差が生じやすいので、正確に数えるためには少なくとも100〜500細胞を計測する。
計算法 ：
C＝N×104
C＝1ml 当たりの細胞数
N＝計測した細胞数の平均
104＝1 mm2 に対する容量の変換値
全体の数＝C×V
V＝細胞を懸濁した液体の容量
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細胞生存率の測定
細胞のおよその生存数を調べる際、色素による簡単な測定法が広く用いられています。この方法で指示薬として使用する色素は、損傷を受けた細胞膜を透過しますが、生細胞の細胞膜は透過しません。したがって、染色された細胞は死細胞であると推測されます。Trypan blue 以外にも、Erythrosin, Nigrosin 等の色素が使用されます。
※細胞生存率測定用のキットもあります。
＜Trypan blue を用いた場合＞
- 細胞懸濁液に Trypan blue を 1 滴垂らし、1〜2分間放置する。
- 血球計算盤を準備し、“細胞数の測定”の操作例 1.〜5. を行う。
- 1mm2 エリアの全体の細胞数と、染色された（暗色）細胞数を測定する。
生存率（％）＝ (計側した全体の細胞数−染色された細胞数)/計測した全体の細胞数 ×100
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細胞数計測関連製品
ディスポーザブルの簡易型細胞計算盤
Disposable Hemocytometer
微細金型加工技術を応用した、高精度なディスポーザブル細胞計算盤です。1枚の計算盤で4種類の試料を計測できるため、コストパフォーマンスに優れた製品です。
⇒ Disposable Hemocytometerの詳細はこちら。
⇒ 培養細胞数の算出方法［参考資料］のダウンロードはこちら。
[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
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Disposable hemocytometer (4-chambers) |
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Disposable hemocytometer (4-chambers) |
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Disposable hemocytometer (4-chambers) |
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[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
Disposable hemocytometer (4-chambers)
文献数： 0
- 商品コード：521-10
- メーカー：FMG
- 包装：20pieces
- 価格：¥5,800
- 在庫：3個以上
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ディスポーザブル細胞計算盤。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
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| 保存条件 | 法規備考 | ||||||
| 掲載カタログ |
細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.214 ニュース2023年4月1日号 p.17 ニュース2024年3月1日号 p.28
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Disposable hemocytometer (4-chambers)
文献数： 0
- 商品コード：521-10
- メーカー：FMG
- 包装：50pieces
- 価格：¥14,000
- 在庫：3個以上
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ディスポーザブル細胞計算盤。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 法規備考 | ||||||
| 掲載カタログ |
ニュース2023年2月15日号 p.24 ニュース2023年4月1日号 p.17 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.214
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Disposable hemocytometer (4-chambers)
文献数： 0
- 商品コード：521-10
- メーカー：FMG
- 包装：4x50pieces
- 価格：¥47,300
- 在庫：3個以上
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ディスポーザブル細胞計算盤。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 法規備考 | ||||||
| 掲載カタログ |
ニュース2023年2月15日号 p.24 ニュース2024年3月1日号 p.28 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.214
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培養細胞の分離／分散溶液
Accumax
プロテアーゼ、コラゲナーゼおよびDNaseの活性が組み合わされた調製済みの細胞分離／分散溶液です。様々な細胞（ハイブリドーマ、CHO、BHK、293、COS、Sf9など）に使用でき、骨髄幹細胞(bone marrow stem cell)などにおける使用実績があります。
⇒Accumaxの詳細はこちら。
[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
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[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
Accumax
文献数： 265
- 商品コード：AM105
- メーカー：ICT
- 包装：100ml
- 価格：¥15,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |||||
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ニュース2020年4月1日号 p.4 ニュース2024年3月1日号 p.26 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.168
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Accumax
文献数： 280
- 商品コード：AM105-500
- メーカー：ICT
- 包装：500ml
- 価格：¥70,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
再生医療研究細胞培養カタログ2017-2018 p.68 ニュース2020年4月1日号 p.4 ニュース2017年1月合併号 p.12
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組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液
Accutase／Accutase LZ
接着細胞の剥離や、組織から初代培養細胞を分離、分散させるのに適した調製済み試薬です。
⇒Accutase／Accutase LZの詳細はこちら。
[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
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Accutase |
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AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml) |
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[在庫・価格 ：2024年09月08日 00時00分現在]
Accutase
文献数： 280
- 商品コード：AT104
- メーカー：ICT
- 包装：100ml
- 価格：¥6,000
- 在庫：3個以上
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
ニュース2024年3月1日号 p.26 ニュース2023年2月15日号 p.19 ニュース2020年10月15日号 p.9
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Accutase
文献数： 264
- 商品コード：AT104-500
- メーカー：ICT
- 包装：500ml
- 価格：¥27,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.168 ニュース2020年4月1日号 p.4 ニュース2020年3月1日号 p.23
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AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml)
文献数： 0
- 商品コード：AT106-500
- メーカー：ICT
- 包装：1vial
- 価格：¥36,500
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2024年3月1日号 p.26 ニュース2023年2月15日号 p.19
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