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血球計算盤を使用した細胞数の計測 細胞数の測定方法 [ 参考資料 ]

掲載日情報:2015/10/07 現在Webページ番号:3075

Thermoprobeバナー

細胞数の計測は,細胞培養の一連の操作で,細胞を分散・継代するステップで重要となります。細胞数の計測法の一つとして,血球計算盤を使用し,生存率の測定に Trypan blue などの色素を用いる方法があります。

細胞数の測定

操作例

  1. 血球計算盤およびカバーガラスの表面を70%イソプロパノールで洗浄し,余分なイソプロパノールをふき取り風乾する。
  2. Reagent grade water でカバーガラスの側面をぬらし,血球計算盤に貼りつける。
  3. 細胞懸濁液をパスツールピペット等でよく撹拌後,すぐに血球計算盤に流し込み,溝の上まで満たす。
    懸濁液の血球計算盤への流し込みは,多すぎても少なすぎてもいけない。
  4. 1.〜3. の操作を別の血球計算盤を使用して行う(2回測定用)。
  5. 顕微鏡に血球計算盤を置き,グリッドラインに焦点を合わせる(10×対物レンズ)。
  6. カウンターを用いて1 mm2 エリア(下図参照)の,細胞数を計測する。
    誤差が生じやすいので,正確に数えるためには少なくとも100〜500細胞を計測する。

計算法 :

 C=N×104

 C=1ml 当たりの細胞数
 N=計測した細胞数の平均
 104=1 mm2 に対する容量の変換値

 全体の数=C×V

 V=細胞を懸濁した液体の容量

細胞数の測定

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細胞生存率の測定

細胞のおよその生存数を調べる際,色素による簡単な測定法が広く用いられています。この方法で指示薬として使用する色素は,損傷を受けた細胞膜を透過しますが,生細胞の細胞膜は透過しません。したがって,染色された細胞は死細胞であると推測されます。Trypan blue 以外にも,Erythrosin, Nigrosin 等の色素が使用されます。

細胞生存率測定用のキットもあります。

操作例
<Trypan blue を用いた場合>
  1. 細胞懸濁液に Trypan blue を 1 滴垂らし,1〜2分間放置する。
  2. 血球計算盤を準備し,“細胞数の測定”の操作例 1.〜5. を行う。
  3. 1mm2 エリアの全体の細胞数と,染色された(暗色)細胞数を測定する。
 

生存率(%)= (計側した全体の細胞数−染色された細胞数)/計測した全体の細胞数 ×100

細胞数計測関連製品

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ディスポーザブルの簡易型細胞計算盤
Disposable Hemocytometer

微細金型加工技術を応用した,高精度なディスポーザブル細胞計算盤です。1枚の計算盤で4種類の試料を計測できるため,コストパフォーマンスに優れた製品です。
Disposable Hemocytometerの詳細はこちら。

ディスポーザブルの簡易型細胞計算盤「Disposable Hemocytometer」

[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Disposable hemocytometer (4-chambers)
- 0
Disposable hemocytometer (4-chambers)
- 0

[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

Disposable hemocytometer (4-chambers)

文献数:0

  • 商品コード:521-10
  • メーカー:FMG
  • 包装:50pieces
  • 価格:¥12,000
  • 在庫:3個以上
  • 納期:-
  • 法規制等:

Disposable hemocytometer (4-chambers)

文献数:0

  • 商品コード:521-10
  • メーカー:FMG
  • 包装:4x50pieces
  • 価格:¥42,000
  • 在庫:2個
  • 納期:-
  • 法規制等:



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培養細胞の分離/分散溶液
Accumax

プロテアーゼ,コラゲナーゼおよびDNaseの活性が組み合わされた調製済みの細胞分離/分散溶液です。様々な細胞(ハイブリドーマ,CHO,BHK,293,COS,Sf9など)に使用でき,骨髄幹細胞(bone marrow stem cell)などにおける使用実績があります。
Accumaxの詳細はこちら。

培養細胞の分離/分散溶液「Accumax」

[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Accumax
- 265
説明文
培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年1月合併号 p.12

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Accumax
- 280
説明文
培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年1月合併号 p.12

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[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

Accumax

文献数:265

  • 商品コード:AM105
  • メーカー:ICT
  • 包装:100ml
  • 価格:¥8,800
  • 在庫:3個以上
  • 納期:-
  • 法規制等:

説明文 培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年1月合併号 p.12

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Accumax

文献数:280

  • 商品コード:AM105-500
  • メーカー:ICT
  • 包装:500ml
  • 価格:¥36,000
  • 在庫:3個以上
  • 納期:-
  • 法規制等:

説明文 培養細胞分散溶液。細胞塊を穏和な条件下で数分間で分散させ,単一浮遊細胞が容易に得られる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年1月合併号 p.12

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組織・培養細胞の剥離/分離/分散溶液
Accutase/Accutase LZ

接着細胞の剥離や,組織から初代培養細胞を分離,分散させるのに適した調製済み試薬です。
Accutase/Accutase LZの詳細はこちら。

組織・培養細胞の剥離/分離/分散溶液「Accutase/Accutase LZ」

[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Accutase
- 280
説明文
組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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組織・培養細胞の剥離/分離/分散溶液 Accutase/Accutase LZ
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Accutase
10日程度  264
説明文
組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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AccutazeLZ-Lyophilized Accutase (500ml)
10日程度  0
説明文
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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[在庫・価格 :2020年04月04日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

Accutase

文献数:280

  • 商品コード:AT104
  • メーカー:ICT
  • 包装:100ml
  • 価格:¥4,300
  • 在庫:3個以上
  • 納期:-
  • 法規制等:

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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StemXVivo Endoderm / Ectoderm / Mesoderm Kit
組織・培養細胞の剥離/分離/分散溶液 Accutase/Accutase LZ
PSdif-Cardio Cardiomyocyte Differentiation Kit
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Accutase

文献数:264

  • 商品コード:AT104-500
  • メーカー:ICT
  • 包装:500ml
  • 価格:¥13,500
  • 在庫:無(発注済)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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AccutazeLZ-Lyophilized Accutase (500ml)

文献数:0

  • 商品コード:AT106-500
  • メーカー:ICT
  • 包装:1vial
  • 価格:¥17,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

説明文
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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