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抗体染色/除去(剥離)を最大6回行える抗体除去キット VectaPlex Antibody Removal Kit

掲載日情報:2024/05/30 現在Webページ番号:71290

VectaPlex Antibody Removal Kitは、免疫蛍光染色またはチラミドシグナル増幅(TSA)染色において、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織切片から、抗体や非共有結合した試薬を除去するためのready-to-useのキットです。抗体除去反応は室温で行い、染色・除去を複数回繰り返しても組織の形態や抗原性への影響を最小限に抑えることができます。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


FFPE胃組織の個別画像 FFPE胃組織の合成画像
6枚の重ね合わせ画像

ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)胃組織切片の免疫蛍光染色像
CD20(赤色)、CD3(灰色)、CD34(黄色)、AE1/AE3(赤紫色)、Vimentin(緑色)、Desmin(青緑色)で示される6種類のマウス一次抗体、DyLight488標識ウマ抗マウスIgGを使用し得られた染色像(左図)と重ね合わせた複合画像(右図)。最初の一次抗体で染色・イメージング後、本製品を用いて抗体を除去し、次の抗体の染色~除去を繰り返した。各染色にはVECTASHIELD PLUS with DAPIを用い、退色を防ぎながら対比染色を行った。


FFPE扁桃組織の個別画像 FFPE扁桃組織の合成画像
4枚の重ね合わせ画像

ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)扁桃腺組織切片のチラミドシグナル増幅法による蛍光染色像
CD3(赤色)、CD68(緑色)、AE1/AE3(紫色)の3種類のマウス一次抗体およびOpal 3-Plex TSA Kit(Akoya Biosciences)、またはDAPI(青色)を使用し得られた染色像(左図)と重ね合わせた複合画像(右図)。最初の一次抗体で染色・イメージング後、本製品を用いて抗体を除去し、次の抗体の染色~除去を繰り返した。


特長

  • Ready-to-useのキットで、そのまま使用できます。
  • 免疫蛍光染色(IF)、およびチラミドシグナル増幅(TSA、Tyramide Signal Amplification)法を用いた染色に使用できます。
  • 抗体や検出試薬は最大6回まで染色・除去ができます
  • 抗体除去は室温で行います。加熱は必要ありません。
  • 組織の形態や抗原性に対する影響は最小限です。
  • マルチプレックスアッセイに使用できます。
VectaPlexは組織へのダメージが少ない

ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)乳がん組織切片(A)を、電子レンジで6回加熱処理を行った場合(B)、本製品で6回処理を行った場合(C)。それぞれのヘマトキシリン・エオジン(HE)染色像を示す。

本製品は、さまざまなFFPE試料および染色条件で使用できるように開発され、最大6回まで連続して染色と抗体除去ができることを検証済みです。ただし、使用する試料や実験法により除去のパフォーマンスが影響を受ける可能性があります。 このため、対照実験として本製品を使用した場合と使用しない場合のシングルプレックス染色の実施を推奨します。


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キット内容

  • VectaPlex Antibody Removal Reagent A
  • VectaPlex Antibody Removal Reagent B
VectaPlex Kitの外見

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操作法概略

免疫蛍光染色に用いる場合

  1. ターゲットに結合した一次抗体を蛍光標識二次抗体で検出します。
  2. イメージングを行います。
  3. 本製品で、ターゲットに結合した一次抗体と蛍光標識二次抗体を除去します。
  4. 次のステップの免疫蛍光染色イメージングを行います。
  5. 必要な数の抗原を検出するまで繰り返します(最大6回まで)。
VectaPlexを使った免疫蛍光染色手順

チラミドシグナル増幅染色法に用いる場合

  1. チラミドシグナル増幅法を用いた染色操作を行います。
  2. 本製品で、ターゲットに結合した一次抗体を除去します。
  3. 次のステップのチラミドシグナル増幅法による染色操作を行います。
  4. 必要な数の染色を行った後にイメージングを行います。
VectaPlexを使ったチラミド染色手順


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VectaPlex Antibody Removal KitのFAQ





Q-3. 自家蛍光を抑制する目的でVector TrueVIEW® Autofluorescence Quenching Kit(#SP-8400)を使用しています。TrueVIEW®の効果は本キットで除去されてしまいますか?
A-3. 本キットの免疫蛍光染色(IF)ワークフローを用いて、自家蛍光を抑制する目的でTrueVIEW®キットを使用した検討を行いました。本キットを使用すると、すべてではありませんがTrueVIEW®キットの成分が除かれました。しかし、残存のTrueVIEW®試薬の効果があり、全サイクルで添加する必要はなく、自家蛍光を抑制する目的に必要な場合のみTrueVIEW®試薬を添加して下さい。

















Q-11. カバースリップを除去するプロトコルはありますか?
A-11. 水溶性非固化性封入剤であるVECTASHIELD PLUS Antifade Mounting Medium with DAPI(#
H-2000) の使用をおすすめします。各イメージングサイクルの後、カバースリップは PBS中でインキュベートすることで簡単に除去でき、残ったVectaShieldはPBS洗浄で除かれます。





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価格

[在庫・価格 :2024年07月15日 14時55分現在]

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納期 文献数
VectaPlex Antibody Removal Kit
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説明文
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2024年6月1日号 p.17

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VectaPlex Antibody Removal Kit

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2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
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別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年7月15日号 p.32

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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