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EMT/MET経路分析研究に有用なビメンチンレポーター細胞株 EMT Reporter Cell Line - MDA-MB-231 VIM RFP

掲載日情報:2019/06/21 現在Webページ番号:64929

MDA-MB-231 Vim-RFP(ATCC® HTB-26MET™)は,乳がん由来細胞株HTB-26(ATCC® HTB-26™)をCRISPR/Cas9で改変して作製したレポーター細胞株です。赤色蛍光タンパク質(RFP)タグ融合ビメンチン(Vim-RFP)の発現を用いて,上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)をリアルタイムで観察できるように設計されています。
この細胞株は,EMT/MET経路分析のほか,抗EMT薬物スクリーニング,転移性乳がん薬物スクリーニングおよびビメンチン中間径フィラメントの動態観察にも有用です。

RFPタグ融合ビメンチン(Vim-RFP)の発現

MDA-MB-231 Vim-RFP

MDA-MB-231 Vim-RFP(ATCC® HTB-26MET™)細胞における赤色蛍光タンパク質(RFP)タグ融合ビメンチン(Vim-RFP)発現の検証
左図:免疫蛍光法によって検出されたRFP(赤色)。
中央図:免疫蛍光法によって検出されたビメンチン(緑色)。細胞核をNucBlue Live Ready Probes Reagent(青色;Thermo Fisher Scientific社)で対比染色した。
右図:左,中央図の重ね合わせ像。ビメンチンとRFPの共局在化,およびタグ融合ビメンチン(Vim-RFP)の発現を示す。
核はNucBlueで染色した(青色)。

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上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)について

MEMO

上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)について

上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)の際に,一般にビメンチン(Vimentin)の発現が上方制御されます。ビメンチン中間径フィラメント(IF:Vimentin intermediate filament)タンパク質は腫瘍の形成やがんの転移を含むがんの発生と進行に深く関係しています。



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特長

  • 細胞の形態,使用培地,増殖速度などは,親系統(ATCC® HTB-26™)と本質的に同一です。
  • 増殖用培地:10%FBS(ATCC® 30-2020/21™),0.01 mg/ml human recombinant insulin,および10μg/ml Blasticidin S HClを含有したEagle's Minimum Essential 培地(ATCC® 30-2003™)
  • 凍結保存用培地:5% DMSO添加完全培地

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製品の仕様

検査項目 規格
細胞数/vial 約2×106 cells
融解後の平均細胞生存率 ≧70.0%
形態 線維芽細胞様
生物種 ヒト
マイコプラズマ PCR 非増殖
細菌および酵母 非増殖
ウイルス検査 ・Hepatitis B
・Cytomegalovirus
・HIV
・Epstein-Barr virus
・Human papillomavirus
非検出
縦列型反復配列(short tandem repeat; STR)解析
  • CSF1PO: 12,13
  • D13S317: 13
  • D16S539: 12
  • D5S818: 12
  • D7S820: 8,9
  • THO1: 7,9.3
  • TPOX: 8,9
  • vWA: 15, 18
ノックイン(KI)改変の遺伝子型確認 PCR VimとRFP融合部分に対する1,894 kbpの特異的PCR産物の確認
サンガー法シークエンシング VimとRFPの融合部分の配列が一致することを確認

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阻害物質を用いたMETの誘導

■チロシンキナーゼ阻害物質Axitinibを用いたMETの誘導

Axitinibを用いたMETの誘導

本細胞を3日間処理し,細胞核をNucBlue Live ReadyProbes Reagentで対比染色(青色)し,固定した。
A図:コントロール(左図)または5μM Axitinib(右図)
左図は,右図と比較してVim-RFPの明度の低下が見られ,ビメンチン発現の低下を示した。
B~E図:平均蛍光強度をハイカウントイメージングを用いて測定した。Axitinibを用いた場合,温度上昇に伴いVim-RFP発現量が低下し,上皮細胞の占める比率が高くなることが示された。

■MEK1/2阻害物質U0126を用いたMETの誘導

U0126を用いたMETの誘導

本細胞を3日間処理し,細胞核をNucBlue Live ReadyProbes Reagentで対比染色(青色)し,固定した。
A図:コントロール(左図)または100μM U0126(右図)。
左図は,右図と比較してVim-RFPの明度が低下し,ビメンチン発現の減少が示された。
B~E図:平均蛍光強度をハイカウントイメージングを用いて測定した。Axitinibを用いた場合,Vim-RFP発現量が低下し,上皮細胞の占める比率が高くなることが示された。

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価格

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細胞株名 メーカー ATCC® No. 備考 包装 価格 在庫
MDA-MB-231 VIM RFP ACC ※国公立機関・大学にご所属の方
ACC ※企業・営利団体にご所属の方
HTB-26 ACC  


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品名 メーカー ATCC® No. 包装 価格 在庫
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[在庫・価格 :2020年01月25日 00時13分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
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納期 文献数
MDA-MB-231; Vimentin RFP Reporter; Breast Adenocarcinoma; Human
ご照会下さい 0
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[在庫・価格 :2020年01月25日 00時13分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

MDA-MB-231; Vimentin RFP Reporter; Breast Adenocarcinoma; Human

文献数:0

  • 商品コード:HTB-26MET
  • メーカー:ACC
  • 包装:1ml
  • 価格:ご照会ください
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

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MDA-MB-231; Vimentin RFP Reporter; Breast Adenocarcinoma; Human

文献数:0

  • 商品コード:HTB-26MET
  • メーカー:ACC
  • 包装:1ml
  • 価格:¥282,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
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MDA-MB-231; Breast Adenocarcinoma; Human (Homo sapiens)

文献数:0

  • 商品コード:HTB-26
  • メーカー:ACC
  • 包装:1ml
  • 価格:¥104,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

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Fetal Bovine Serum (500 mL)

文献数:0

  • 商品コード:30-2020
  • メーカー:ACC
  • 包装:500ml
  • 価格:ご照会ください
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

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文献数:0

  • 商品コード:30-2021
  • メーカー:ACC
  • 包装:100ml
  • 価格:ご照会ください
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

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Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM)

文献数:0

  • 商品コード:30-2003
  • メーカー:ACC
  • 包装:500ml
  • 価格:¥6,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

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