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がん転移研究に有用なビメンチンレポーター細胞株 EMT Reporter Cell Line - A549 Vimentin-RFP

掲載日情報:2019/05/16 現在Webページ番号:68740

A549 Vim-RFP(ATCC® CCL-185EMT™)は,NSCLC(非小細胞肺がん)由来細胞株A549(ATCC® CCL-185™)をCRISPR/Cas9で改変して作製したレポーター細胞株です。赤色蛍光タンパク質(RFP)タグ融合ビメンチン(Vim-REF)の発現を用いて,上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)をリアルタイムで観察できるように設計されています。この細胞株は,EMT/MET経路分析のほか,新規抗がん剤の開発研究にも有用です。

上皮間葉転換の前後における細胞変化の観察

1. TGF-β1(2.5 ng/ml)添加による上皮間葉転換誘導(5日間)に伴うVim-RFP発現量(赤色)の増加
2. TGF-β1(2.5 ng/ml)添加による上皮間葉転換誘導(5日間)に伴うE-カドヘリン発現量(水色)の減少。核はNucBlueで染色した(青色)。
3. 1, 2をマージしたもの
4. 上皮間葉転換後の細胞の侵襲性増加の観察

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MEMO 上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)について

上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)について (クリックで開閉します)

上皮間葉転換(EMT:Epithelial-to-mesenchymal transition)の際に,一般にビメンチン(Vimentin)の発現が上方制御されます。ビメンチン中間径フィラメント(IF:Vimentinintermediate filament)タンパク質は腫瘍の形成やがんの転移を含むがんの発生と進行に深く関係しています。


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特長

  • 細胞の形態,使用培地,増殖速度などは,親系統(ATCC® CCL-185™)と本質的に同一です。
  • 上皮間葉転換の誘導:TGF-β1(2.5 ng/ml)を添加し,3~5日後の細胞の変化をモニタリングします。
  • 増殖用培地:10%FBS(ATCC® 30-2020/21™)および10μg/mlのBlasticidin S HClを含有したF-12K培地(ATCC® 30-2004™
  • 凍結保存用培地:5% DMSO添加完全培地

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製品の仕様

検査項目 規格
細胞数 約2×106 cells
融解後の平均細胞生存率 ≧70.0%
形態 上皮様
マイコプラズマ PCR 非検出
直接法 非検出
間接法 非検出
生物種 ヒト
細菌および真菌類 32℃におけるiNSTボトル(好気培養) 非増殖
32℃におけるiASTボトル(嫌気培養) 非増殖
ウイルス検査 非検出
縦列型反復配列(short tandem repeat; STR)解析
  • TH01:8,9.3
  • D5S818:11
  • D13S317:11
  • D7S820:8, 11
  • D16S539:11,12
  • CSF1PO:10,12
  • Amelogenin:X,Y
  • vWA:14
  • TPOX:8, 11
ノックイン(KI)改変の遺伝子型確認 PCR VimとRFPの融合部分に対する約1,894 bpの特異的PCR産物の確認
サンガー法シークエンシング VimとRFPの融合部分の配列が一致することを確認

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阻害試験

A83-01を用いたTGF-β1によるEMT誘導の阻害

A83-01を高濃度で用いた場合,上皮細胞の占める比率が高くなり,Vim-RFP発現量低下と相関が見られた。(N=4,データは±SDの平均値による)

PP1を用いたTGF-β1によるEMT誘導の阻害

PP1を高濃度で用いた場合,上皮細胞の占める比率が高くなり,Vim-RFP発現量低下と相関が見られた。(N=4,データは±SDの平均値による)

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細胞株名 メーカー ATCC® No. 備考 包装 価格 在庫
A549 Vimentin RFP Reporter ACC ※国公立機関・大学にご所属の方
ACC ※企業・営利団体にご所属の方
A-549, Lung Carcinoma ACC  


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関連製品

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品名 メーカー ATCC® No. 包装 価格 在庫
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[在庫・価格 :2019年08月24日 00時14分現在]

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A549 Vimentin RFP reporter ; Lung Carcinoma ;CRISPR/CAS9 Modified Cell Line; Human (Homo sapiens)
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A549 Vimentin RFP reporter ; Lung Carcinoma ;CRISPR/CAS9 Modified Cell Line; Human (Homo sapiens)

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  • 商品コード:CCL-185EMT
  • メーカー:ACC
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A549 Vimentin RFP reporter ; Lung Carcinoma ;CRISPR/CAS9 Modified Cell Line; Human (Homo sapiens)

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  • 商品コード:CCL-185EMT
  • メーカー:ACC
  • 包装:1ml
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A-549; Lung Carcinoma; Human (Homo sapiens)

文献数:0

  • 商品コード:CCL-185
  • メーカー:ACC
  • 包装:1ml
  • 価格:¥104,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
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  • 商品コード:30-2021
  • メーカー:ACC
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  • 商品コード:30-2020
  • メーカー:ACC
  • 包装:500ml
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  • 商品コード:30-2004
  • メーカー:ACC
  • 包装:500ml
  • 価格:¥6,000
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