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HDAC/SIRTの活性/阻害の測定キット Epigenase HDAC/SIRT Activity/Inhibition Assay Kit

掲載日情報:2017/03/17 現在Webページ番号:5354

Histone deacetylase(HDAC)またはSirturin(SIRT)の活性/阻害を比色法または蛍光法により迅速かつ高感度で測定するキットです。従来のトリプシンによるペプチド鎖切断を介する方法とは異なり、 HDACで変換された脱アセチル化産物を直接検出することにより、HDAC活性/阻害を測定するため、DMSO、チオール含有化学物質、トリプシンおよび細胞のリシルエンドペプチダーゼによるアッセイの妨害を排除できます。

HDAC/SIRT Assay Kitの操作方法概要

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Epigenase Direct HDAC/SIRT Activity/Inhibition Assay Kitの操作方法概要

核抽出物の調製には、EpiQuik Nuclear Extraction Kit(#OP-0002-1)の使用をお勧めします。

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Histone Deacetylase (HDAC)とSirtuin(SIRT)とは

コアヒストンに含まれる特異的リジン残基のイプシロンアミノ基のアセチル化は、最も強力なエピジェネティック修飾の1つで、複数の細胞プロセスの調節に必須です。ヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)によるヒストンのアセチル化は、ゲノムの活性領域に関連する特に重要なプロセスです。一方でヒストンデアセチラーゼ(HDAC)によるヒストン脱アセチル化は、遺伝子の転写を抑制します。これまでに、少なくとも4つのクラスのHDACが同定されており、クラスⅠ HDACにはHDAC 1、2、3および8が含まれます。クラスⅡ HDACは、HDAC4、5、6、7、9および10で構成されます。Sirtuinとして知られるクラスⅢ HDACは補因子としてNAD +を必要とし、SIRT 1~7から構成されます。HDAC11のみから構成されているクラスⅣ酵素は、クラスⅠおよびⅡの両方の特性を有しています。

HDAC/SIRTとは

Sirtuinは、単にアセチル化リシン残基を加水分解する既知の他の脱アセチル化酵素とは異なり、リジン脱アセチル化とNAD加水分解とを組み合わせて、O-acetyl-ADP-riboseおよびニコチンアミド生成反応を触媒します。Sirtuinは、老化、転写調節、アポトーシス、ストレル応答、飢餓状態におけるエネルギー代謝のほか、がん、糖尿病および種々の神経学的疾患を含むヒト疾患の発症にも関与しています。SIRTの阻害または活性化の検出は、遺伝子活性化およびサイレンシングのエピジェネティックな調節メカニズムの解明や、がんおよび神経疾患の診断や療法の研究に有用です。これまでのHDACおよびSIRT活性または阻害の検出方法は、リシルエンドペプチダーゼまたはトリプシンによる脱アセチル化ヒストン開裂の測定に基づく2種類しかなく、リシルエンドペプチダーゼ、トリプシンインヒビター、DMSOまたはチオール含有化合物による干渉や精度が低いなどの問題点を抱えていました。


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Epigentek社のHDAC関連Assay Kitの種類

Epigentek社では、Histone Deacetylase (HDAC) 関連酵素の網羅的な酵素活性または阻害活性を測定するキットと、HDACの各サブクラスの酵素タンパク質量を測定するキットを有しており、幅広い研究・実験目的に対応しています。

測定対象 測定試料 製品種別 測定因子 検出 測定波長 (nm) 商品コード
48 assays 98 assays
酵素活性阻害物質 核抽出物精製酵素 Epigenase Assay Kit*1 HDAC
(Direct)
比色 450 P-4034-48 P-4034-96
蛍光 530ex/590em P-4035-48 P-4035-96
SIRT
(Universal)
比色 450 P-4036-48 P-4036-96
蛍光 530ex/590em P-4037-48 P-4037-96
EpiQuik Assay Kit BRD2 比色 450 P-4058-48 P-4058-96
酵素タンパク質量 HDAC 1 比色 450 P-4005-48 P-4005-96
HDAC 2 P-4006-48 P-4006-96
HDAC 3 P-4040-48 P-4040-96
HDAC 4 P-4042-48 P-4042-96
HDAC 5 P-4044-48 P-4044-96
HDAC 6 P-4046-48 P-4046-96
HDAC 7 P-4048-48 P-4048-96
HDAC 8 P-4007-48 P-4007-96
HDAC 9 P-4050-48 P-4050-96
HDAC 10 P-4052-48 P-4052-96
HDAC 11 P-4054-48 P-4054-96

*1 Epigenase HDAC Activity/Inhibition Direct Assay Kit(Colorimetric/Fluorometric)は、従来のEpiQuik HDAC Activity/Inhibition Assay Kit, Colorimetric (#P-4002)およびEpiQuik HDAC Activity/Inhibition Assay Kit, Fluorometric (#P-4001)に比べてバックグラウンドシグナルが低減されているため、改良バーションのEpigenase HDAC Activity/Inhibition Direct Assay Kit(Colorimetric/Fluorometric)のご使用をお勧めします。


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Epigentek社のEpiQuik/Epigenase ヒストン研究関連製品

Epigentek社のEpiQuik/Epigenase ヒストン研究関連製品 (クリックで開閉します)

製品群をクリックすると、対応するWebページや製品情報をご覧いただけます。

製品群 各製品群の研究対象分野のバックグラウンド
Histone Acetylation Quantification ヒストンH3/H4を含むヒストンアセチル化は、クロマチン構造の調節および転写因子の遺伝子プロモーターへの動員に関与します。全アセチル化ヒストンまたは特定のリジン残基でのアセチル化レベルの定量は、遺伝子活性化のエピジェネティックな調節を解明し、HATまたはHDAC標的薬物の開発に寄与します。
Histone Acetyltransferase (HAT) Assay ヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)は、遺伝子の転写調節に重要な役割を果たし、コアヒストンタンパク質のアミノ末端近くのリジンのイプシロンアミノ基を選択的にアセチル化することで転写に直接関与します。ヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)は緩やかなクロマチン構造を有するユークロマチンと会合することで、ヒストンにアセチル基を付加し、転写および遺伝子発現を増加させます。HAT活性の減少による異常な遺伝子サイレンシングは、多くの疾患、特にがんの病因との関連が知られています。HAT活性およびその阻害効力の決定は、創薬、抗がん剤の開発および遺伝子転写研究に有用です。
Histone Deacetylase (HDAC) Assay ヒストンデアセチラーゼ(HDAC)は、コアヒストン(H2A、H2B、H3およびH4)からアセチル基を除去することにより遺伝子発現を調節する酵素の一種です。この酵素は、核に存在する染色体を形成しているタンパク質-DNA複合体のクロマチンの構造に影響を与えます。アセチル基を除去することにより、クロマチン構造が締め付けられ、ヘテロクロマチンとなり、遺伝子の転写が減少します。またHDACは、細胞周期調節、細胞増殖およびヒトのがんの発生に密接に関与しています。 HDACの活性および阻害研究によって、ヒストン脱アセチル化の疾患や様々な細胞プロセスに与える影響のよりよい理解につながります。

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使用例

商品コードをクリックすると価格表がご覧いただけます。

Epigenase HDAC Activity/Inhibition Direct Assay Kit

品名 検出 商品コード 組換え体HDAC3の活性測定 TSA阻害活性分析
Epigenase HDAC
Activity/Inhibition Direct Assay Kit
比色 P-4034 #P-4034活性測定 #P-4034阻害活性
蛍光 P-4035 #P-4035活性測定 #P-4035阻害活性

Epigenase Universal SIRT Activity/Inhibition Direct Assay Kit

品名 検出 商品コード 組換え体HDAC3の活性測定 TSA阻害活性分析
Epigenase Universal SIRT
Activity/Inhibition Direct Assay Kit
比色 P-4036 #P-4036活性測定 #P-4036阻害活性
蛍光 P-4037 #P-4037活性測定 #P-4037阻害活性


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特長

  • キットの組成の改善によりバックグラウンドシグナルが大幅に低減したことで、感度および信頼性が高くなり、より正確で一貫性があるデータが得られます。
  • 細胞/組織抽出物および精製HDAC酵素の両方を使用でき、in vivo およびin vitro でHDAC阻害物質の阻害効果を検出できます。
  • トリプシンによるペプチド分解法に比べて約10倍感度が高く、精製HDAC酵素0.5 ngから検出できます。
  • 脱アセチル化ヒストンのスタンダードが含まれているため、HDACの比活性を定量化できます。
  • HDAC阻害のポジティブコントロールとしてHDACクラスⅠおよびクラスⅡの強力な阻害物質のトリコスタチンA(TSA)が含まれています。
  • 96ウェルフォーマットで、ハイスループットな自動化分析にも対応しています。

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製品の種類

品名 Epigenase Activity/Inhibition Direct Assay Kit
HDAC Universal SIRT
検出 比色 蛍光 比色 蛍光
商品コード P-4034 P-4035 P-4036 P-4037
測定物質 HDACs 1~11*2 SIRTs 1~7*3
測定生物種 哺乳動物、植物、菌類、バクテリア、ウイルス
測定試料 細胞/組織からの核抽出物、精製酵素
必要試料量 核抽出物*4 0.5~20μg(最適範囲:5~10μg)
精製酵素 5~500 ng
検出感度 精製酵素 0.5 ng 1 ng
測定範囲 0.2~5 ng/μl
分析時間 3.5時間以内
キット内容 Wash buffer
Assay buffer*5
Substrate*5
Assay standard*5
Capture antibody*5
Detection antibody*5
SIRT co-factor
HDAC inhibitor TSA*5
SIRT inhibitor TSA
Developer solution
Fluoro developer
Fluoro enhancer
Dilution buffer
Stop solution
8-well assay strips
Adhesive covering film

*2:co-factorのNAD+を反応系に添加することで、クラスⅢ HDAC(SIRT 1~7)の検出も可能です。
*3:SIRT2、SIRT4およびSIRT5の測定には細胞質抽出物が必要です。SIRT3の測定にはミトコンドリア画分を使用する必要があります。
*4:核抽出物の調製には、EpiQuik Nuclear Extraction Kit(#OP-0002-1)の使用をお勧めします。
*5:キットにより内容が異なります。


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価格

[在庫・価格 :2024年04月27日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
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  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
HDAC Activity/Inhibition Direct Assay Kit, Colorimetric, Epigenase (48assays)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 67
説明文
測定試料:細胞,組織,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,感度:0.5 ng,種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:Direct Assay,アッセイ数:48 assays
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年11月1日号 p.21
ニュース2019年5月1日号 p.17

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測定試料:細胞,組織,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,感度:0.5 ng,種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:Direct Assay,アッセイ数:96 assays
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,-20℃,暗所保存 法規備考
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種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,測定試料:細胞,組織,感度:0.5 ng,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,検出方法:蛍光,測定波長:530/590 nm,アッセイ法:Direct Assay,アッセイ数:48 assays
別包装品 別包装品あり
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種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,測定試料:細胞,組織,感度:0.5 ng,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,検出方法:蛍光,測定波長:530/590 nm,アッセイ法:Direct Assay,アッセイ数:96 assays
別包装品 別包装品あり
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測定試料:細胞,組織,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,感度:1 ng,種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:Universal Assay,アッセイ数:48 assays
別包装品 別包装品あり
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測定試料:細胞,組織,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,感度:1 ng,種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:Universal Assay,アッセイ数:96 assays
別包装品 別包装品あり
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種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,測定試料:細胞,組織,感度:1 ng,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,検出方法:蛍光,測定波長:530/590 nm,アッセイ法:Universal Assay,アッセイ数:48 assays
別包装品 別包装品あり
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種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,測定試料:細胞,組織,感度:1 ng,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,検出方法:蛍光,測定波長:530/590 nm,アッセイ法:Universal Assay,アッセイ数:96 assays
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HDAC Activity/Inhibition Direct Assay Kit, Colorimetric, Epigenase (48assays)

文献数: 67

説明文 測定試料:細胞,組織,測定範囲:0.2-5.0 ng/μl,感度:0.5 ng,種交差性:Bacteria/Mammalian/Plant,検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:Direct Assay,アッセイ数:48 assays
別包装品 別包装品あり
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別包装品 別包装品あり
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別包装品 別包装品あり
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説明文
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法規制等
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。