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次世代シークエンシング(NGS)用のDNAの精製とサイズ選択が可能な磁気ビーズ sparQ PureMag Beads

掲載日情報:2024/11/22 現在Webページ番号:71971

次世代シークエンシング(NGS)のワークフローにおいて、反応液のクリーンアップとDNAフラグメントのサイズ選択を迅速かつ信頼性高く行える磁気ビーズベースの核酸精製システムです。磁気ビーズの可逆的な核酸結合特性を用いて、NGSライブラリー調製反応からプライマー、プライマーダイマー、未組み込みヌクレオチド、塩、アダプター、アダプターダイマーを迅速に除去し、下流のシークエンシングパフォーマンスを向上させることができます。

sparQ PureMag Beadsの製品外観

製品外観

特長

  • 遠心分離やろ過を行うことなく、100 bp以上のDNAフラグメントを高い回収率で得られます。
  • ビーズとDNA試料の比率を調整するだけで、再現性および一貫した信頼性の高いサイズ選択が可能です。
  • アダプターライゲーションおよびPCR後の反応液から不要な成分を効率的に除去できます。
  • プロトコルをほとんど変更することなく、現在ご使用のNGSワークフローにシームレスに組み込むことができます。
  • 手動(マニュアル)処理と自動液体処理ロボットのいずれにも対応しています。
  • RNA精製の使用実績もあります。

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操作方法概略

sparQ PureMag Beadsの操作方法概略

試料中のDNAを磁気ビーズに結合させた後、磁気スタンドを用いて上清から分離します。試料に対するビーズの比率を変えることで、結合/除去されるDNAのサイズが変わります。

本製品に磁気スタンド/セパレーターは含まれません。別途ご用意下さい。


ダブルサイドサイズ選択の場合

図4. sparQ PureMag Beadsのワークフロー

ダブルサイドサイズ選択は、目的の領域の両側から短いフラグメントと長いフラグメントを除去する際に使用する。フラグメントのサイズは、sparQ PureMag BeadsとDNAの容量比を操作することで、アプリケーションに合わせて簡単に調整できる(図3参照)。



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sparQ PureMag Beadsの検証データ

図1. 他社キットと同等に効率的なDNA回収が可能

図1. 他社キットと同等に効率的なDNA回収が可能
50 bpのDNAラダーをsparQ PureMag Beadsと他社キットそれぞれでビーズとDNAの比率を変えて精製し、2%アガロースゲルで分析した。sparQ PureMag BeadsはDNA精製において、他社キットと同等の性能を示した。



図2. 幅広いインプットDNA量において再現性の高い精製を実現

図2. 幅広いインプットDNA量において再現性の高い精製を実現
異なるロットのsparQ PureMag Beadsで幅広いインプットDNA量において、得られたDNAライブラリーについて再現性高いプロファイルを実現した。ライブラリーはsparQ DNA Library Prep Kitを用いて断片化された微生物ゲノムDNA 100 ngおよび1 ngから作製した。アダプターライゲーションおよびPCR増幅後にsparQ PureMag Beadsを使用し、アダプターダイマーとプライマーダイマーを効果的に除去した。



図3. 断片化ヒトゲノムDNAのダブルサイドサイズ選択前後のBioanalyzerによる解析

図3. 断片化ヒトゲノムDNAのダブルサイドサイズ選択前後のBioanalyzerによる解析
断片化したヒトゲノムDNAのダブルサイドサイズ選択前後のエレクトロフェログラム(電気泳動図)。sparQ PureMag BeadsとDNAの比率を変えることで、さまざまな標的サイズ範囲を実現した。



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アプリケーションノート

Quantabio社が提供する技術情報です。クリックするとpdfファイルがダウンロードできます。


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sparQ PureMag Beadsの参考資料

画像をクリックするとpdfファイルがダウンロードできます。

sparQ PureMag Beadsフライヤー

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sparQ NGS製品ガイド

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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