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Glucagon-like peptide 1 receptorの活性化のモニタリングに最適な細胞株(BPS Bioscience社) GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line

掲載日情報:2024/02/20 現在Webページ番号:70842

ルシフェラーゼを用いたGLP-1R/CREの情報伝達経路のモニタリング、およびGLP-1Rのアゴニストのスクリーニングに最適なHEK293細胞株です。cAMP応答エレメント(CRE)の制御下にルシフェラーゼ遺伝子が組み込まれており、GLP-1Rがアゴニストにより活性化されるとルシフェラーゼ遺伝子の転写が誘導されます。

マイコプラズマが陰性であることを確認していますが、取り扱いには十分にご注意下さい。
本製品は輸送費が別途必要となります。詳細は、当社営業担当までお問い合わせ下さい。
お客様における事故・過失による製品の破損、汚染トラブル対策の為、予備1バイアルを含む2バイアルにてご提供します。
企業のお客様も含め、使用に当たりライセンス料は不要です。

GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Lineの作用機序

GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Lineの作用機序

GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line(#78176)は、用量依存的にルシフェラーゼ活性を誘導することによりアゴニストに応答します。この細胞株の機能は、以下のアゴニストを使用して検証済みです。GLP-1Rのアンタゴニスト名をクリックすると、それぞれに対する用量反応曲線例をご覧いただけます。

ペプチドアゴニスト

小分子アゴニスト

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Glucagon-like peptide 1 receptor(GLP-1R)とは

Glucagon-like peptide 1 receptor(GLP-1R)は、Gタンパク質共役受容体(GPCRまたはセクレチン様受容体)のクラスBファミリーのメンバーであり、主に膵臓のβ細胞および脳ニューロンに見られる膜貫通タンパク質です。GLP-1Rは、ペプチドホルモンのGlucagon-like peptide 1(GLP-1)と、栄養素の摂取後に腸のL細胞から分泌されるグルカゴンによって活性化されます。GLP-1Rは、グルコース刺激によるインスリン分泌、グルコース、脂質代謝、および満腹感創出により、血糖値の制御に重要な役割を果たします。脳におけるその役割は、食欲の制御によるものと考えられています。

2型糖尿病(T2DM)の治療法においては、GLP-1R媒介シグナル伝達経路の制御が注目されており、その結果、GLP-1のFDA承認アゴニストがいくつか開発されました。GLP-1Rアゴニストは、インスリン分泌における役割に加えて、体重管理、心血管疾患の可能性の軽減、β細胞の保護にも貢献します。また、T2DM患者における腫瘍発生における役割も調べられていますが、GLP-1Rとそのアゴニストの機能の理解にはさらなる研究が必要です。

参考文献

  • Zhao, X., et al., "GLP-1 Receptor Agonists: Beyond Their Pancreatic Effects", Front. Endocrinol.(Lausanne), 12, 721135 (2021). [PMID:34497589]

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解析例

フローサイトメトリーを用いたGLP-1Rの細胞表面の発現解析

GLP-1Rの細胞表面の発現

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GLP-1Rの細胞表面の発現

GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 cells緑色)またはControl CRE Luciferase Reporter HEK293 cells青色)を抗ヒトGLP-1R PE標識抗体(R&D Systems、#FAB2814P)で染色し、フローサイトメトリーで分析した。

Y軸は細胞数の%、X軸はPEの蛍光強度を示す。

さまざまなアゴニストの用量反応曲線の作製例

ルシフェラーゼ活性は、ONE-Step Luciferase Assay Systemで測定した。結果は未処理のコントロールに対する発現比で示した。

GLP-1(7-37)とGIPに対する用量反応曲線

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GLP-1(7-37)とGIPに対する用量反応曲線

本細胞をさまざまな濃度のGLP-1(7-37)とGIPで処理した。GLP-1(7-37)処理細胞株はGLP-1Rを活性化し、ルシフェラーゼ活性を誘導したが、GIP処理細胞株では活性の誘導が見られなかった。

Exendin-4に対する用量反応曲線

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Exendin-4に対する用量反応曲線


Lixisenatideに対する用量反応曲線

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Lixisenatideに対する用量反応曲線

Dulaglutideに対する用量反応曲線"

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Dulaglutideに対する用量反応曲線


Semaglutideに対する用量反応曲線

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Semaglutideに対する用量反応曲線

Tirzepatideに対する用量反応曲線

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Tirzepatideに対する用量反応曲線


Retatrutideに対する用量反応曲線

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Retatrutideに対する用量反応曲線

Danuglipronに対する用量反応曲線

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Danuglipronに対する用量反応曲線

GLP-1(7-37)に対する本細胞株の応答から見たFBS存在下におけるペプチドの安定性

GLP-1(7-37)に対する血清の非存在下での用量反応曲線

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GLP-1 (7-37) の段階希釈を調製し、無血清培地でアッセイを実施した。血清の非存在下では、GLP-1 (7-37) のEC50は0.03 nMであった。

GLP-1(7-37)に対する血清の存在下での用量反応曲線

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図Aに示したのと同じGLP-1の段階希釈物(7-37)を調製し、10%FBSを含むThaw Medium 1中でアッセイを実施した。血清の存在下では、GLP-1(7-37)のEC50は0.5 nMに増加した。

Danuglipronに対する本細胞株の応答から見たFBS存在下におけるペプチドの安定性

Danuglipronに対する血清の非存在下での用量反応曲線

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Danuglipronの段階希釈を調製し、無血清アッセイ培地でアッセイを実施した。血清の非存在下では、DanuglipronのEC50は1 nMであった。

Danuglipronに対する血清の存在下での用量反応曲線

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図Aに示したのと同じDanuglipronの段階希釈物を調製し、10%FBSを含むThaw Medium 1中でアッセイを実施した。 血清の存在下では、DanuglipronのEC50は1.7 nMだった。

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関連製品 培地

本細胞の解凍・播種および培養には、以下の培地が別途必要です。

  • 細胞の解凍・播種:Thaw Medium 1(#60187
  • 細胞の培養:Growth Medium 1A(#79528

本製品を用いた細胞アッセイにおけるルシフェラーゼ活性測定に必要なONE-Step Luciferase Assay Systemについてはこちらをご覧下さい。

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細胞株のご購入にあたって

BPS Bioscience社の細胞株のご購入の際には、☞ BPS Bioscience License Disclosureをご確認いただくようお願いいたします。



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価格

GLP-1R/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line

[在庫・価格 :2025年02月10日 18時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
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GLP-1R/CRE (Luc) Reporter - HEK293 Recombinant Cell Line
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説明文
※ライセンス同意書の提出が必要。※輸入諸費用(60,000円)を別途いただく製品です。※細胞チャレンジサービス対象製品。 CREおよびヒト GLP-1R(Glucagon-like peptide 1 receptor)制御下でルシフェラーゼを発現するレポーター細胞株。GLP-1Rの活性化をモニタリングすることができます。マイコプラズマ陰性確認済み。※受注発注品。由来:Human,※推奨培地の商品コード:60187,79528,79796,60690,細胞種:HEK293,細胞数:2 vials of frozen cell pools. Each vial contains 2 x 106 cells in 1 ml of 10% DMSO,産生:HEK293
別名:lucagon-like peptide 1 receptor cell line,GLP-1 cells,GLP-1-R cell line,GLP-1R cells,glucagon like peptide 1 receptor cells
法規制等
保存条件 液体窒素中での保存 法規備考
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GLP-1R/CRE (Luc) Reporter - HEK293 Recombinant Cell Line

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別名:lucagon-like peptide 1 receptor cell line,GLP-1 cells,GLP-1-R cell line,GLP-1R cells,glucagon like peptide 1 receptor cells
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Thaw Medium 1
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Thaw Medium 1
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Growth Medium 1A
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Thaw Medium 1

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説明文 別名:HEK293 Cell Thawing Medium
法規制等
保存条件 4℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年6月1日号 p.5

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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