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EVery miRNome Profiler for Human Serum and Plasma
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EVery miRNome Profiler for Human Serum and Plasma
ヒト血清・血漿エクソソーム由来miRNAプロファイリング用キット EVery miRNome Profiler for Human Serum and Plasma
掲載日情報:2022/10/12 現在Webページ番号:70756
182種類のエクソソーム(EV)由来miRNAに対するプライマーが384-plate wellの各ウェルに含まれた、ヒト血清および血漿中のエクソソーム由来miRNAの定量的RT-PCRによるプロファイリング用キットです。キットで測定できる182種類のエクソソーム由来miRNAは、文献およびSystem Biosciences社(以下SBI社)社内のNGSデータに基いて選択されています。
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使用例
本キットによるSBI社の各種エクソソーム単離キットおよびRNA抽出キットの評価
SBI社のエクソソーム単離キット3種およびRNA抽出キット2種を用いて試料調製を行った。その後、EVery cDNA Synthesis Kit(#EVery200B-1)を用いてcDNA合成を行い、本キットでmiRNAプロファイリングを行った。その際に、☞ EVery miRNA Spike-in Kit(#EVery600B-1)の合成RNA spike-in mixture(Spkn1~4, cel-miR-39-3p)をマニュアルに従って、EV試料またはRNA試料に試料調製時に添加した。miR-23aとmiR-451は、血清中に安定発現するリファレンスmiRNAである。すべてのSBI社のEV単離およびRNA分離用製品から得られた試料で、miRNA発現プロファイリングにおいて安定した結果が示された。
ヒト血清および血漿試料における6種のリファレンスmiRNA候補の発現プロファイリング
正常血清および乳がん血清におけるmiRNA発現プロファイルの差異を示したヒートマップ
正常血清および乳がん血清におけるいくつかのmiRNAの発現の差異の確認
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特長
- バイオマーカーとして用いられているmiRNAの同定、および発現パターンの解析を行えます。
- SBI社の様々な細胞外小胞(EV)単離用製品*1、およびEV由来-RNA抽出用キット*2に対応しています。
- 使用するEV由来RNAは、わずかng量ですみます。
- ハイスループットスクリーニングに最適です。
- 試料の品質、溶血のモニタリング、分離効率、およびプレート間変動を評価するためのコントロールが含まれています。
- それぞれのウェルに10 μlの反応に十分な量の凍結乾燥されたプライマーが含まれています。
- 測定動物種:ヒト
- 測定試料:血清、血漿から抽出したmiRNA(※別途cDNA合成が必要)
- 血清・血漿試料の必要量:250 μl(1プロファイリングあたり)
- 使用回数:8プロファイリング分
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操作方法概略
- ☞ EVery cDNA Synthesis Kit(#EVery200B-1)、またはその他のcDNA合成キットを用いて、エクソソーム由来miRNAから、qPCRに使用できるアンカーテイルを有するcDNAのプールを調製する。
- 本製品の各ウェルに以下のとおりcDNAおよび各種試薬を加えて、qPCR解析を実行する。
EVery miRNome Profilerのセットアップ
コンポーネント名 | 反応スケール | |
---|---|---|
192 assays (1プロファイリング) |
384 assays (2プロファイリング) |
|
2× SYBR Green Master Mix | 1,000 μl | 2,000 μl |
Universal reverse primer | 60 μl | 120 μl |
合成したcDNA template | 8 μl(≧ 20 ng) | 16 μl(≧ 40 ng) |
Nuclease-free water | 932 μl | 1,864 μl |
Total | 2,000 μl | 4,000 μl |
PCRサイクリングの条件
ステップ | 温度 | 時間 | サイクル数 |
---|---|---|---|
前処理(オプション) | 50℃ | 2分 | hold |
初期変性 | 95℃ | 10分 | hold |
変性 | 95℃ | 15秒 | 40 |
アニーリング/伸長反応 | 60℃ | 1分 | |
融解曲線の解析 |
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キット内容
- EVery miRNome profiler plate(384-well)[☞ プレートレイアウト()]
- Optical adhesive film cover
必要機器・試薬
- ☞ Real-time PCR thermal cycler
- ☞ EVery cDNA Synthesis Kit(#EVery200B-1)(※ 推奨)またはその他のcDNA合成キット
- SYBR Green Master Mix
- Nuclease-free water
- cDNA合成時に用いたアダプターと相補性のあるユニバーサルリバースプライマー
適合が確認されたReal-time PCR thermal cycler
メーカー | Real-time PCR thermal cycler |
---|---|
ABI (Thermo Fisher Scientific) |
3130xl Genetic Analyzer, 3500xL Dx Genetic Analyzer, 3730xl DNA Analyzer, 7900HT System GeneAmp 9700, QuantStudio, Veriti Dx Thermal Cycler, Veriti Thermal Cycler, ViiA 7 Dx System ViiA 7 System, QuantStudio Dx, 3130 Genetic Analyzer, 3500 Genetic Analyzer, 3730 DNA Analyzer 3500xL Genetic Analyzer, 3500 Dx Genetic Analyzer |
Bio-Rad | CFX 384 |
Roche | LightCycler 480 |
Qiagen | QIAquant 384 |
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価格
[在庫・価格 :2024年12月10日 00時01分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Every miRNome Profiler for Human Serum and Plasma(8profiles) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 :2024年12月10日 00時01分現在]
Every miRNome Profiler for Human Serum and Plasma(8profiles)
文献数: 0
- 商品コード:EVery500B-1
- メーカー:SBI
- 包装:1kit
- 価格:¥245,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | |||
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法規制等 | |||
保存条件 | 室温,-20℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2023年11月15日号 p.29
|
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製品記事 | |||
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