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EVery miRNome Profiler for Human Serum and Plasma
ヒト血清・血漿エクソソーム由来miRNAプロファイリング用キット EVery miRNome Profiler for Human Serum and Plasma
掲載日情報：2022/10/12 現在Webページ番号：70756
182種類のエクソソーム（EV）由来miRNAに対するプライマーが384-plate wellの各ウェルに含まれた、ヒト血清および血漿中のエクソソーム由来miRNAの定量的RT-PCRによるプロファイリング用キットです。キットで測定できる182種類のエクソソーム由来miRNAは、文献およびSystem Biosciences社（以下SBI社）社内のNGSデータに基いて選択されています。
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使用例
本キットによるSBI社の各種エクソソーム単離キットおよびRNA抽出キットの評価
）SBI社のエクソソーム単離キット3種およびRNA抽出キット2種を用いて試料調製を行った。その後、EVery cDNA Synthesis Kit（#EVery200B-1）を用いてcDNA合成を行い、本キットでmiRNAプロファイリングを行った。その際に、☞ EVery miRNA Spike-in Kit（#EVery600B-1）の合成RNA spike-in mixture（Spkn1～4, cel-miR-39-3p）をマニュアルに従って、EV試料またはRNA試料に試料調製時に添加した。miR-23aとmiR-451は、血清中に安定発現するリファレンスmiRNAである。すべてのSBI社のEV単離およびRNA分離用製品から得られた試料で、miRNA発現プロファイリングにおいて安定した結果が示された。
ヒト血清および血漿試料における6種のリファレンスmiRNA候補の発現プロファイリング
正常血清および乳がん血清におけるmiRNA発現プロファイルの差異を示したヒートマップ
正常血清および乳がん血清におけるいくつかのmiRNAの発現の差異の確認
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特長
- バイオマーカーとして用いられているmiRNAの同定、および発現パターンの解析を行えます。
- SBI社の様々な細胞外小胞（EV）単離用製品*1、およびEV由来-RNA抽出用キット*2に対応しています。
- 使用するEV由来RNAは、わずかng量ですみます。
- ハイスループットスクリーニングに最適です。
- 試料の品質、溶血のモニタリング、分離効率、およびプレート間変動を評価するためのコントロールが含まれています。
- それぞれのウェルに10 μlの反応に十分な量の凍結乾燥されたプライマーが含まれています。
- 測定動物種：ヒト
- 測定試料：血清、血漿から抽出したmiRNA（※別途cDNA合成が必要）
- 血清・血漿試料の必要量：250 μl（1プロファイリングあたり）
- 使用回数：8プロファイリング分
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操作方法概略
- ☞ EVery cDNA Synthesis Kit（#EVery200B-1）、またはその他のcDNA合成キットを用いて、エクソソーム由来miRNAから、qPCRに使用できるアンカーテイルを有するcDNAのプールを調製する。
- 本製品の各ウェルに以下のとおりcDNAおよび各種試薬を加えて、qPCR解析を実行する。
EVery miRNome Profilerのセットアップ
| コンポーネント名 | 反応スケール | |
|---|---|---|
| 192 assays （1プロファイリング） |
384 assays （2プロファイリング） |
|
| 2× SYBR Green Master Mix | 1,000 μl | 2,000 μl |
| Universal reverse primer | 60 μl | 120 μl |
| 合成したcDNA template | 8 μl（≧ 20 ng） | 16 μl（≧ 40 ng） |
| Nuclease-free water | 932 μl | 1,864 μl |
| Total | 2,000 μl | 4,000 μl |
PCRサイクリングの条件
| ステップ | 温度 | 時間 | サイクル数 |
|---|---|---|---|
| 前処理（オプション） | 50℃ | 2分 | hold |
| 初期変性 | 95℃ | 10分 | hold |
| 変性 | 95℃ | 15秒 | 40 |
| アニーリング／伸長反応 | 60℃ | 1分 | |
| 融解曲線の解析 | |||
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キット内容
- EVery miRNome profiler plate（384-well）[☞ プレートレイアウト（
）] - Optical adhesive film cover
必要機器・試薬
- ☞ Real-time PCR thermal cycler
- ☞ EVery cDNA Synthesis Kit（#EVery200B-1）（※ 推奨）またはその他のcDNA合成キット
- SYBR Green Master Mix
- Nuclease-free water
- cDNA合成時に用いたアダプターと相補性のあるユニバーサルリバースプライマー
適合が確認されたReal-time PCR thermal cycler
| メーカー | Real-time PCR thermal cycler |
|---|---|
| ABI （Thermo Fisher Scientific） |
3130xl Genetic Analyzer, 3500xL Dx Genetic Analyzer, 3730xl DNA Analyzer, 7900HT System GeneAmp 9700, QuantStudio, Veriti Dx Thermal Cycler, Veriti Thermal Cycler, ViiA 7 Dx System ViiA 7 System, QuantStudio Dx, 3130 Genetic Analyzer, 3500 Genetic Analyzer, 3730 DNA Analyzer 3500xL Genetic Analyzer, 3500 Dx Genetic Analyzer |
| Bio-Rad | CFX 384 |
| Roche | LightCycler 480 |
| Qiagen | QIAquant 384 |
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価格
[在庫・価格 ：2024年05月08日 00時01分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||
|---|---|---|---|---|---|
|
Every miRNome Profiler for Human Serum and Plasma(8profiles) |
|
0 | |||
[在庫・価格 ：2024年05月08日 00時01分現在]
Every miRNome Profiler for Human Serum and Plasma(8profiles)
文献数： 0
- 商品コード：EVery500B-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥222,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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