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エクソソーム濃縮試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solutionシリーズ

掲載日情報:2015/06/12 現在Webページ番号:4337

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)特集バナー

血清、腹水などの体液試料や細胞培養液から、高純度かつ高収量のExosome(エキソソーム、エクソソーム)を、簡便に濃縮できる試薬です。数多くの使用実績があります。
血清、血漿や腹水試料用のExoQuick、尿、髄液や細胞培養液試料用のExoQuick-TC、GMPグレードのExoQuick-CGがあります。


フナコシニュース エクソソーム特別号2022

Exosome(エクソソーム、エキソソーム)特集 エクソソーム(エキソソーム)カタログ

エクソソーム研究者の皆様にオススメの情報を一冊にまとめました!

ExoQuickシリーズについてはp.12~14で詳しくご紹介しています。


エクソソームとは

エクソソームは生体内の細胞および培養細胞から分泌される30~200 nmの膜小胞で、血液、尿、羊水、腹水などの体液や細胞培養液中に存在します。エクソソーム中に含まれるmiRNAやタンパク質は、分泌する細胞の種類や生理条件により異なります。そのため、エクソソーム中のmiRNAやタンパク質の分析は、各種疾患に関与する新たなバイオマーカーの探索に有用です。エクソソーム中のmiRNAやタンパク質の詳細については、ExoCartaデータベースをご覧下さい。

ウシ由来エクソソームを除去したFBS Exo-FBS Exosome-Depleted FBS

ExoQuick(#EXOQ5A-1)を用いて血清から単離したエクソソームの電子顕微鏡写真


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特長

  • 超遠心、抗体結合磁気ビーズ、クロマトグラムを用いた従来法よりも、簡便かつ効率的にエクソソームを単離できます。
  • 本製品で濃縮したエクソソームから精製したmiRNAは、MicroRNA qPCR Array with QuantiMirや、SeraMir Exosome RNA Amplification Kitによる正確なmiRNAプロファイリングに有用です。また、抽出したタンパク質は、電気泳動などによる解析に有用です。
  • 多数の論文で使用実績があります。

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製品ラインナップ

  ExoQuick ExoQuick-TC
ExoQuick-CG
ExoQuick Plasma
Prep Kit
ExoQuick-LP ExoQuick ULTRA ExoQuick-TC ULTRA
特長 スタンダード ExoQuick-CGはGMPグレード フィブリン低減可能 リポタンパク質低減可能 アルブミン、Ig低減可能 アルブミン、Ig低減可能
血清 - - -
血漿 - - -
腹水 - - - - -
尿 - - - - -
髄液 - - - - -
細胞培養液 - - - -

より純度の高いエクソソームの回収にはExoQuick ULTRAシリーズがオススメです。

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操作方法概略

  1. 試料を3,000×gで15分間遠心分離し、更に細胞や細胞破片を除去する。
  2. 上清を滅菌チューブに移し、ExoQuickまたはExoQuick-TCを加える(表参照)。
  3. 4℃で静置する(表参照)。
  4. 1,500×gで30分間遠心分離すると、エクソソームが薄黄色~白色のペレットとして沈殿する。上清を吸引除去する。
  5. 再度、1,500×gで5分間遠心分離後、残った上清を吸引除去する。
  6. 滅菌した1×PBS、または下流の実験のプロトコルで指定されたバッファーを加えて、エクソソームを再懸濁させる。


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ExoQuick-TCの操作方法動画



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各製品の添加量

試料の種類 製品 試料量 ExoQuick(-TC、-CG)添加量 静置時間
腹水 ExoQuick 250 μl 63 μl 一晩
血清 250 μl 63 μl 30分間
尿 ExoQuick-TC (-CG) 5 ml 1 ml
(1.6 ml)
6時間~一晩
(12時間~一晩)
髄液 5 ml 1 ml
(1.6 ml)
6時間~一晩
(12時間~一晩)
細胞培養液 5 ml 1 ml
(1.6 ml)
6時間~一晩
(12時間~一晩)

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使用例

■他社製品との収量比較

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuick / ExoQuick-TC とA 社製品を用いて、ヒト血清または細胞培養液からエクソソームを回収し、CD63 ELISA Kit(#EXOEL-CD63A-1)を用いてエクソソーム数を測定した。ExoQuick / ExoQuick-TC の方が、エクソソームの収量が多いことがわかる。
上図 試料:ヒト血清(500 μl)
下図 試料: PC-3 前立腺がん細胞を7 日間培養した細胞培養液(エクソソーム除去FBS(Exo-FBS)を含むDMEM 培地を使用)


■腹水からのエクソソーム回収例

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

■腹水からのエクソソーム回収例

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ヒト卵巣がん患者の腹水をExoQuickまたは抗体結合磁気ビーズで濃縮したものおよび、濃縮前のものからRNAを精製し、Bioanalyzer(Agilent社)で解析した。
データ提供:Dr. Douglas Taylor, Louisville 大学、KY


Exosome(エキソソーム、エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuickを用いてヒト血清から単離したエクソソーム画分のタンパク質およびRNAを解析した。
左:単離したエクソソーム画分を電気泳動後、エクソソームのバイオマーカーであるCD63, CD9, CD81, HSP70をウエスタンブロットで検出した。
右:エクソソーム画分(EXO)と上清画分(SUP)からRNAを精製後、15%ポリアクリルアミド RNA用ゲルで電気泳動し、SYBR® GreenでRNAを検出した。

エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuick-TCを用いて、ヒト由来細胞の培養液およびヒト尿試料からエクソソームを濃縮した。得られたエクソソームについて、NanoSight LM10(NanoSight社)を用いて粒径の分布と濃度を測定した。


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ExoQuickのFAQ

ExoQuickのFAQ (クリックで展開します)

Q-1. 組成を教えて下さい。

A-1. 組成に関する情報は開示されていません。



Q-2. 一度凍結した試料からエクソソームを単離可能ですか?

A-2. 可能です。試料を解凍後、通常通りプロトコルに従って操作を行って下さい。



Q-3. 単離したエクソソームの保存方法を教えて下さい。

A-3. エクソソームは非常に安定しているため、-80℃で1年以上保存可能です。凍結融解を避けるために分注して保存して下さい。



Q-4. 血清試料からどの程度の量のエクソソームが単離できますか?

A-4. 条件によりますが250μlの血清から、タンパク質量で5 mg相当のエクソソームが平均的な収量です。



Q-5. 単離したエクソソームを細胞に添加する際に、ポリマーによる影響はありますか?

A-5. エクソソームを回収する際にわずかにポリマーが残存しますが、細胞には影響のないレベルです。



Q-6. 血漿試料からエクソソームを単離する際の注意点はありますか?

A-6. 血漿収集の際にはヘパリンベースではなく、クエン酸やEDTAベースの抗凝固剤の使用を推奨しています。またExoQuick使用前にはトロンビン処理を行って下さい。



Q-7. ExoQuickとExoQuick-TCの違いを教えて下さい。

A-7. ExoQuickは血清や血漿、腹水などエクソソーム濃度の高い試料でご使用下さい。
一方、ExoQuick-TCは希薄でエクソソーム濃度の低い組織培養(細胞培養)培地、尿、CSFなどにご使用いただけます。



Q-8. ExoQuickでタンパク質などの夾雑物を除去できますか?

A-8. ExoQuickはエクソソーム濃縮試薬のため、精製のステップはありません。夾雑タンパク質を除去したい場合は、カラム精製を行うExoQuick ULTRAシリーズをご使用下さい。




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使用文献

使用文献多数(690以上)!

使用文献はこの他にも多数ございます。

  1. Gu, Y., et al., PLoS ONE, 7 (8), e43691 (2012).
  2. Umezu, T., et al., Oncogene, Jul. 16 (2012). [Epub ahead of print]
  3. Chang, Y. H., et al., Mol. Cell. Proteomics, Aug. 15 (2012). [Epub ahead of print]
  4. Kurt, W., et al., FEBS Letters, Aug. 8. (2012). [Online]
  5. Epple, L. M., et al., PLoS ONE, 7 (7), e42064 (2012).
  6. Bala, S., et al., Hepatology, Jun. 9 (2012). [Epub ahead of print]
  7. Akbas, F., et al., Exp. Lung Res., 38 (6), 286~294 (2012).
  8. Alvarez, M. L., et al., Kidney Int., Jul. 11 (2012). [Epub ahead of print]
  9. Zhuang, G., et al., EMBO J., 31 (17), 3513~3523 (2012).
  10. Saludes, J. P., et al., ACS Chem. Biol., Jul. 6 (2012). [Epub ahead of print].
  11. Fabbri, M., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 109 (31), 12278~12279 (2012).
  12. Singh, P. P., et al., J. Immunol., Jun. 20 (2012). [Epub ahead of print]
  13. Kadiu, I., et al., J. Immunol., 189 (2), 744~754 (2012).
  14. Wang, G., et al., J. Biol. Chem., 287 (25), 21384~21395 (2012).
  15. Surgucheva, I., et al., Biochemistry, 51 (23), 4743~4754 (2012).
  16. Toyofuku, T., et al., Genes Dev., 26 (8), 819~829 (2012).
  17. Xiaowei, Z., et al., PLoS ONE, 7 (3), e32765 (2012).
  18. Zhou, Q., et al., Int. J. Biol. Sci., 8, 118~123 (2012).
  19. Yaron, G., et al., Eur. J. Heart Fail., 14 (2), 147~154 (2012).
  20. Haney, M. J., et al., Nanomedicine (Lond.), 7 (6), 815~833 (2012).
  21. Da, Silveira, J. C., et al., Biol. Reprod., 86 (3), 71 (2012).
  22. Hartman, Z. C., et al., Vaccine, 29 (50), 9361~9367 (2011).
  23. Douglas, D., et al., Molecular Biology, 728 (4), 235~246 (2011).
  24. Karolina, D. S., et al., PLoS ONE, 6 (8), e22839 (2011).


サンプルあります!
#EXOQ5A-1#EXOQ20A-1#EXOTC10A-1#EXOTC50A-1は、小包装のサンプル品をご用意しています。ご希望の方は、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。



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価格

血清、腹水

[在庫・価格 :2024年12月11日 14時55分現在]

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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick (75reactions)
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血清,腹水からエキソソームを濃縮する試薬。
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掲載カタログ ニュース2022年10月15日号 p.12
ニュース2023年11月15日号 p.9

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血清,腹水からエキソソームを濃縮する試薬。
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Exo-Glow EV Labeling Kitシリーズ
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ExoQuick PLUS Exosome Purification Kit-Serum and Plasma(10reactions)
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血清,血漿からエクソソームを回収する試薬。タンパク質のキャリーオーバーを低減できる。ExoQuick (2 ml)とマイクロビーズ(10 units)のセット。
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掲載カタログ ニュース2017年11月1日号 p.15

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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick (75reactions)

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説明文 血清,腹水からエキソソームを濃縮する試薬。
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説明文 血清,腹水からエキソソームを濃縮する試薬。
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説明文 血清,血漿からエクソソームを回収する試薬。タンパク質のキャリーオーバーを低減できる。ExoQuick (2 ml)とマイクロビーズ(10 units)のセット。
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血漿

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ExoQuick Plasma prep and Exosome precipitation kit(5ml ExoQuick plus 500ul Thrombin at 500U/mL)
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血漿からエクソソームを回収する試薬。75 reactions。
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ExoQuick Plasma prep and Exosome precipitation kit(5ml ExoQuick plus 500ul Thrombin at 500U/mL)

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説明文 血漿からエクソソームを回収する試薬。75 reactions。
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尿、髄液、細胞培養液

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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (10reactions)
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尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。
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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (50reactions)
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尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。
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Exo-Glow EV Labeling Kitシリーズ
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ExoQuick-CG cGMP-grade Exosome Isolation reagent
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マイクロRNAやタンパク質のバイオマーカー研究に有用なエクソソーム回収試薬。
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ExoQuick-TC PLUS Exosome Purification Kit-Tissue Culture Media(10reactions)
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細胞培養液からエクソソームを回収する試薬。タンパク質のキャリーオーバーを低減できる。ExoQuick-TC(10 ml) と マイクロビーズ (10 units)のセット。
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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (10reactions)

文献数: 2

説明文 尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。
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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (50reactions)

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説明文 尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。
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ExoQuick-CG cGMP-grade Exosome Isolation reagent

文献数: 0

説明文 マイクロRNAやタンパク質のバイオマーカー研究に有用なエクソソーム回収試薬。
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ExoQuick-TC PLUS Exosome Purification Kit-Tissue Culture Media(10reactions)

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説明文 細胞培養液からエクソソームを回収する試薬。タンパク質のキャリーオーバーを低減できる。ExoQuick-TC(10 ml) と マイクロビーズ (10 units)のセット。
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血清・血漿用エクソソーム回収試薬(リポタンパク質低減可能)ExoQuick-LP

血清、血漿にはリポタンパク質が含まれており、リポタンパク質中にはmiRNA が含まれていることが分かっています。回収したエクソソームにリポタンパク質が混入してしまうと、エクソソーム由来miRNA と思って解析したものが、実はリポタンパク質由来miRNA であることがあります。本製品はあらかじめ試料中のリポタンパク質を除去するためのキットです。


■リポタンパク質量の比較(ELISA)

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

血清からエクソソームを回収する際に、本製品に付属のPre-Cleaning Reagent を使用して前処理すると、リポタンパク質の混入を低減できることが分かる。

アオリ文 タイトル

ExoQuick-LP (#EXOLP5A-1) の効果
粒子径とプロット頻度について、ExoQuick-LPによる前処理 (Filter-) を行った場合と未処理 (NonFilter-) の場合の影響を比較した。

[在庫・価格 :2024年12月11日 14時55分現在]

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ExoQuick-LP for lipoprotein pre-clear & exosome isolation
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製品記事 ExoQuick-LP
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[在庫・価格 :2024年12月11日 14時55分現在]

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ExoQuick-LP for lipoprotein pre-clear & exosome isolation

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製品記事 ExoQuick-LP
エクソソーム(Exosome)研究用製品特集
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エクソソームRNA精製試薬 ExoQuick Exosome Isolation and RNA Purification kit

ExoQuickにRNA精製用カラムおよび試薬をセットにした製品です。

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ExoQuick Exosome Isolation and RNA Purification kit(for Serum and Plasma), 20preps
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製品記事 エクソソーム(Exosome)研究用製品特集
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ExoQuick Exosome Isolation and RNA Purification kit(for Tissue Culture Media), 10preps
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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製品記事 エクソソーム(Exosome)研究用製品特集
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[在庫・価格 :2024年12月11日 14時55分現在]

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ExoQuick Exosome Isolation and RNA Purification kit(for Serum and Plasma), 20preps

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ExoQuick Exosome Isolation and RNA Purification kit(for Tissue Culture Media), 10preps

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Check it out !

SeraMir Exosome RNA Amplification Kit

ExoQuickにRNA精製用カラムおよび試薬をセットにした製品です。

体液試料に含まれるエクソソーム中のmiRNAから、定量的RT-PCR用の一本鎖cDNAおよびT7 in vitro転写用の二本鎖cDNAを合成できます。体液試料からエクソソームを分離し、これに含まれるエクソソームRNA(exoRNA)をスピンカラムにより精製した後、両端にタグを付加した定量的PCR用およびin vitro転写用のcDNAを合成します。

詳細についてはフナコシホームページをご覧いただくか、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。