生体液試料からエクソソームを効率的に単離するキット
(SECを用いたエクソソーム単離システム)
SmartSEC EV Isolation System
掲載日情報:2021/03/22 現在Webページ番号:69272
様々な生体液試料から簡便にエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles、細胞外小胞)を単一のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を用いて単離するキットです。血清・血漿試料などから高純度のEVを簡便、迅速、高収率そして高濃度で単離できます。
ポリマーベースの沈降試薬によりエクソソームを沈殿濃縮する☞ ExoQuick ULTRAシリーズもあります。
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- 製品ラインナップ
- 特長
- SmartSECの利点について
- SmartSEC Mini EV Isolation System(#SSEC100A-1)
- SmartSEC Single EV Isolation System(#SSEC200A-1)
- SmartSEC HT EV Isolation System(#SSEC096A-1)
- 価格
- メーカーインタビュー
製品ラインナップ
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品名 | ☞ SmartSEC Mini EV Isolation System |
☞ SmartSEC Single EV Isolation System |
☞ SmartSEC HT EV Isolation System*1、*2 |
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フォーマット | Mini column |
Single column |
96 well plate |
商品コード | SSEC100A-1 | SSEC200A-1 | SSEC096A-1 |
測定試料 | 血清、血漿 アポプラスト液、血リンパ |
血清、血漿、CSF(ヒト) 血リンパ(ジャンボアメフラシ) |
血清、血漿 |
試料量 | 10~100μl | 100~250μl | 250~500μl |
操作時間 | < 30分 | < 30分 | < 1時間 |
使用回数 | 10 reactions | 10 reactions | 96 reactions |
キット内容 |
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*1 キットにはコレクションチューブは含まれていません。別途ご用意下さい。
*2 8 reactionsの☞ 有償サンプル品をご用意しています。1研究室に1回限りご購入いただけます。
*3 フィルターおよびプレートは、手動操作およびANSI/SBS規格の自動分注システムの両方に適応しています。
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特長
- 血清、血漿、または他の生体液から簡便、迅速にEVを単離できます。
- 単離したEVは、質量分析(MS)、ウエスタンブロッティング、ナノ粒子トラッキング解析(NTA)、透過型電子顕微鏡(TEM)、およびRNAシークエンシング(NGS)などに使用できます。
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SmartSECの利点について
SmartSECは、サイズ排除モードとアフィニティ相互作用モードの2つの機能を備えた新世代の混合モード・クロマトグラフィーです。この2つのモードを1つの樹脂ビーズ中で組み合わせることにより、従来のSEC(サイズ排除クロマトグラフィー)のような時間と労力のかかるプロセスを必要としません。SmartSECでは、多孔質ビーズの内側のコアがアフィニティ相互作用モードの機能を有しており、IgGやアルブミンなどの400 kDa(15~20 nm)までのタンパク質不純物を捕捉・保持することができます(図1参照)。ビーズの外側のシェルは不活性なため、非特異的な結合を最小限に抑えることができます。
ビーズコアに入り込んだ低分子タンパク質は捕捉されて留まり、EVは排除されて溶出液に回収される。
SmartSECは、組織培養液から血清や血漿まで、様々な溶液中の不純物に対して、優れた結合能を発揮します。従来のSECでは低濃度のフラクションを複数集める必要があるのに対し、SmartSECカラムは、高濃度のEVを1つのフラクションとして溶出できるように最適化されています(図2参照)。SmartSECシステムの有用性を最大限に引き出すために、 3つのフォーマットで製品化して、幅広い試料タイプに対するニーズに応えました。
図2. SmartSECによるEV分離ワークフローの模式図
プレウォッシュしたSmartSECビーズのカラムへ、血清や血漿などの生体液試料を十分な量の分離用バッファーと共にロードし、室温で30分間、十分に混合・結合させます。インキュベーション後、500×gで1分間遠心分離し、分離されたEVを回収します。溶出したEVは、直ちに下流のあらゆるアプリケーションに使用できます。
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SmartSEC Mini EV Isolation System(#SSEC100A-1)
血清試料から発生生物学のモデル動物由来試料まで、少量(10μl~)の生体液試料からエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles、細胞外小胞)をSEC(サイズ排除クロマトグラフィー)により単離するキットです。わずか10~100μlの試料から約30分間で高品質のEVを単離できます。
SmartSEC Mini EV Isolation Systemの使用例
キイロショウジョウバエの血リンパから精製したEVのウエスタンブロット分析例
プラナリアとシロイヌナズナからのEVの単離例
マウスおよびヒト血清各10 μlからのEV単離例
他社SEC columnとの比較
ヒト血清20μlより本製品を用いて単離した各フラクションのEV収量と、ヒト血清100μlからA社SECカラムを用いて単離した各フラクションのEV収量を比較した。
フラクション番号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
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EV収量 | SmartSEC Mini | 128.0μg | 40.8μg | - | - | - |
A社SECカラム | 10.2μg | 15.1μg | 14.1μg | 19.4μg | 37.2μg |
ヒト血清から単離したEVについてのMSによるタンパク質分析
本製品を用いてヒト血清20μlからEVを単離し、マススペクトログラフィー(MS)により約600種類のタンパク質を同定した。
SmartSEC Mini EV Isolation Systemの操作方法概略
SmartSEC Mini EV Isolation Systemの操作方法概略
- 前洗浄したSmartSEC Mini columnに試料をロードし、室温で30分間インキュベートする。
- 500×gで30秒間遠心分離する。
- 溶出したEVを回収する。
- (オプション)回収率を最大にするには、カラムへのバッファーの追加・遠心・回収を最大2回行う。
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SmartSEC Single EV Isolation System(#SSEC200A-1)
血清、血漿、脳脊髄液(CSF)、および血リンパ(ジャンボアメフラシ)の試料からエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles、細胞外小胞)をSEC(サイズ排除クロマトグラフィー)により単一カラムで単離するキットです。100~250μlの試料から約30分間で高品質のEVを単離できます。
SmartSEC Single EV Isolation Systemの使用例
ウエスタンブロッティングによるEVの収率の比較
ウエスタンブロッティングの分析結果から、SmartSEC SingleはA社SECカラムに比べて精製EVが高収率で得られた。
fNTAによるEVの収率と粒径の比較
fNTAの分析結果から、SmartSEC SingleはA社SECカラムに比べて精製EVが高収率で得られた。
脳脊髄液(CSF)からのニューロンEVの単離
ExoCheck Neuro Arrayの結果より、SmartSEC Singleを用いることによりニューロンとエキソソームの両方のマーカーを含んだEVが得られたことがわかる。これは、SmartSEC Singleで単離されたEVがニューロン起源の小胞に富んでいることを示唆している。
血清および脳脊髄液(CSF)から単離したEVのサイズ
CSFから単離されたEVは、血清から単離されたEVに比べて粒径が小さくなる傾向があることがわかる。
EVの透過型顕微鏡(TEM)解析
SmartSEC Single EV Isolation Systemの操作方法概略
SmartSEC Single columnに100~250μlの清澄化された血清または血漿とColumn buffer、または最大4 mlのその他の生体液を加え、直接洗浄済みカラムにロードし、インキュベートした後に、遠心してEVを溶出します。
- 洗浄済みのSmartSEC Single columnに試料をロードし、室温下で30分間インキュベートする。
- 500×gで1分間遠心分離する。
- フロースルーに単離されたEVが得られる。
追加しました。
SmartSEC HT EV Isolation System(#SSEC096A-1)
血清または血漿からエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles、細胞外小胞)をハイスループットで簡便、迅速に単離することができる96wellプレートベースのキットです。SEC(サイズ排除クロマトグラフィー)の長所をすべて有し、かつ超遠心分離や他社のSECカラムを用いた場合に比べて高純度のEVを高収率で単離することができます。
SmartSEC HT EV Isolation Systemの使用例
様々な方法で単離したEVのウエスタンブロッティングによる分析
500μlの血清(A)および血漿(B)から、本製品、超遠心分離および他社のSECカラムを用いてそれぞれEVを分画、単離し、それぞれの1回目の分画画分から1μgのタンパク質を取り、ウエスタンブロッティング解析を行った。本製品を用いて単離したEVは、超遠心分離および他社SECカラムを用いた場合に比べて夾雑のキャリーオーバー(持ち込み)タンパク質が少ないEVが高収率で回収されていることがわかる。
試料量の違いによる溶出プロファイルの検討
EVの大部分は、最初の2つの画分に溶出する。SEC法では、一般に溶出プロファイルは添加した試料量と溶出液量により異なる。血漿250μlを添加した場合(A)、第2画分に最も多くのEVが溶出される。一方、血漿500μlを添加した場合(B)では、第1画分にEVが多く溶出される。したがって、本製品を初めてご使用される際には、まず第1画分と第2画分をそれぞれ別に分離して分析を行った上で、その結果に基づいて一方の画分のみを用いるか、2つの画分を一緒にして用いるかを選択することが望ましい。
EVの収率の比較
試料 | 試料量 | EVの単離方法 | EVの収率 (μg protein) |
EVの収率 (number of particles) |
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血清 | 250μl | SmartSEC HT | 239 | 1.48×1011 |
超遠心分離 | 4.34 | 0.08×1011 | ||
他社のSECカラム | 101.6 | 0.44×1011 | ||
500μl | SmartSEC HT | 1,220 | 2.50×1011 | |
超遠心分離 | 5.4 | 0.05×1011 | ||
他社のSECカラム | 152.5 | 0.72×1011 | ||
血漿 | 250μl | SmartSEC HT | 159 | 2.62×1011 |
超遠心分離 | 3.77 | 0.014×1011 | ||
他社のSECカラム | 76 | 0.80×1011 | ||
500μl | SmartSEC HT | 2,026 | 3.40×1011 | |
超遠心分離 | 4.4 | 0.03×1011 | ||
他社のSECカラム | 112 | 0.277×1011 |
プレートウェル間の一貫性の検証
500μlの血清(A)と血漿(B)を異なるウェルにロードし、EVを分離して、fNTAで分析した。血清と血漿の両方の試料において、EV粒子総数と粒子サイズ分布は、異なるウェル間においても高い再現性が確認できた。
SmartSEC HT EV Isolation Systemの操作方法概略
SmartSEC HTキットは、適切量のSmartSECレジンがあらかじめ充填された96ウェルフィルタープレート、SmartSEC isolation bufferおよびコレクションプレート2枚より構成されています。フィルタープレートの各ウェルには、250~500μlの血清または血漿を添加することができます。また、SmartSEC HT システムのすべてのステップは、手動操作および自動分注システムに適応します。
- 透明な血清または血漿をSmartSEC HT plateに添加し、室温下、30分間インキュベートする。
- 500×gで2分間遠心分離する(第1画分が得られる)。
- SmartSEC HT isolation bufferを各ウェルに添加し、500×gで2分間遠心分離する(第2画分が得られる)。
※ 各画分の詳細については、使用例をご覧下さい。
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価格
SmartSEC Mini EV Isolation System
[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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SmartSEC Mini EV Isolation System, 10tests |
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[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
SmartSEC Mini EV Isolation System, 10tests
文献数: 0
- 商品コード:SSEC100A-1
- メーカー:SBI
- 包装:1kit
- 価格:¥95,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 様々な生体液試料から簡便にエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles,細胞外小胞)を単一のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を用いて単離するキット。Mini columnフォーマット。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2023年11月15日号 p.12
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製品記事 | 革新的なエクソソーム回収キット(System Biosciences 社) |
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SmartSEC Single EV Isolation System
[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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SmartSEC Single EV Isolation System, 10tests |
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[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
SmartSEC Single EV Isolation System, 10tests
文献数: 0
- 商品コード:SSEC200A-1
- メーカー:SBI
- 包装:1kit
- 価格:¥95,000
- 在庫:1個
- 納期:10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 様々な生体液試料から簡便にエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles,細胞外小胞)を単一のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を用いて単離するキット。Mini columnフォーマット。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.11 ニュース2023年11月15日号 p.12
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製品記事 | 革新的なエクソソーム回収キット(System Biosciences 社) |
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SmartSEC HT EV Isolation System
[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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SmartSEC HT EV Isolation System(for Serum & Plasma), Trial Size, 8tests |
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SmartSEC HT EV Isolation System(for Serum & Plasma), 96tests |
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[在庫・価格 :2025年02月10日 00時00分現在]
SmartSEC HT EV Isolation System(for Serum & Plasma), Trial Size, 8tests
文献数: 0
- 商品コード:SSEC008A-SAM
- メーカー:SBI
- 包装:1kit
- 価格:¥50,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 様々な生体液試料から簡便にエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles,細胞外小胞)を単一のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を用いて単離するキット。96 well plateフォーマットで8 well分。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2023年11月15日号 p.12 ニュース2022年10月15日号 p.11
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製品記事 | Exo-Flow 2.0 EV Analysis Kit(CD9/CD63/CD81) 革新的なエクソソーム回収キット(System Biosciences 社) |
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関連記事 |
SmartSEC HT EV Isolation System(for Serum & Plasma), 96tests
文献数: 0
- 商品コード:SSEC096A-1
- メーカー:SBI
- 包装:1kit
- 価格:ご照会ください
- 在庫:無(未発注)
- 納期:10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 様々な生体液試料から簡便にエクソソームなどのEV(Extracellular vesicles,細胞外小胞)を単一のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を用いて単離するキット。96 well plateフォーマット。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2023年11月15日号 p.12 ニュース2024年10月1日号 p.5
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製品記事 | Exo-Flow 2.0 EV Analysis Kit(CD9/CD63/CD81) 革新的なエクソソーム回収キット(System Biosciences 社) |
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メーカーインタビュー
追加しました。
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