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エクソソームから全RNAを精製するキット EVery EV RNA Isolation Kit

掲載日情報:2022/09/26 現在Webページ番号:69567

エクソソーム(Exosome)などの細胞外小胞(EV、extracellular vesicle)からsmall RNAを含む全RNAを、カラムベースで迅速かつ高純度で抽出・精製できるキットです。少量の試料量および溶出量で行え、高濃度の溶出画分が得られるため、以降の1回当たりの反応で使用できるRNA量を増やすことができます。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

比較例

EVery EV RNA Isolation Kitがあらゆる種類のRNAを捕捉できることの検証のため、以下に示した3例で単離されたRNAを比較しました。Lane 1の結果は、単離されるRNAが高品質であることを示しています。Lane 2の結果は、本製品により、バイアスやサイズに関わらず様々な長さの全RNAを捕捉できることを示しています。また、Lane 3の結果では、スパイクしたmiRNAの強いシグナルから、小さなサイズのRNAでも良好な回収率が得られることを示しています。

各種試料からのRNA回収の比較

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各種試料からのRNA回収の比較

  • Lane 1:10,000 cellsから単離したRNA
    (RIN*1:9.9、28S / 18S RNA:1.5)
  • Lane 2:250 μlの血清からSmartSEC Single(#SSEC100A-1)を用いて単離したエクソソーム
  • Lane 3:0.1 pmolのCel-miR-39を添加したバッファー

*1 RNA integrity number

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)特集バナー

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特長

  • 30分以内に、高収量で、確実にexoRNAの単離を行うことができます。
  • エクソソームに含まれる全RNAを捕捉することで、今まで見逃していたRNAを発見することができます。
  • フェノール法の収率を、より安全なカラムベースの方法で達成できます。
  • ExoQuick、SmartSEC、超遠心単離などの一般的に使用される方法で単離されたエクソソームを用いることができます。
  • キットに含まれるDNaseIを使用し、高純度のRNAを確実に得ることができます。
  • RNA-seqやmiRNAプロファイリングなど、ほとんどのダウンストリームアプリケーションに適応できます。
  • 使用回数:20 reations

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操作方法概略

EVeryRNA workflow

  1. 試薬を添加してエクソソームを溶解後、室温下、10分間インキュベートする。
  2. エタノールを添加して混合し、カラムにロードする。
  3. DNase処理する。
  4. カラムを洗浄する。
  5. RNAを溶出する。

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使用例

ExoQuick UltraおよびSmartSEC Singleとの適合性の検証

ExoQuick UltraおよびSmartSEC Singleとの適合性の検証

miRNA回収率の比較

miRNA回収率の比較

SmartSEC Single(#SSEC100B-1)を用いて血清250 μlから単離したエクソソームに0.1 pmolのCel-miR-39を添加し、本製品またはフェノールベースのキットを用いてRNAを単離した。それぞれ単離したRNAをEVery cDNA Synthesis Kit(#EVery200B-1)を用いて逆転写した後に、Cel-miR-39のコピー数を測定した。本製品は、フェノールベースのキットを用いた場合とほぼ同等のCel-miR-39のコピー数が得られた。

mRNAの単離例

mRNAの単離例

本製品を用いてeGFP過剰発現細胞からmRNAを単離した。eGFP過剰発現細胞からは、相当量のeGFPが回収された。

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キット内容

  • Lysis buffer
  • Lysis additive
  • Glycogen
  • Wash solution
  • Elution solution
  • RNA spin column
  • Collection tube
  • Elution tube
  • RNase free DNase I
  • Enzyme buffer

別途、エタノール(96~100%)およびβ-メルカプトエタノールが必要です。

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関連製品 EVery miRNA Spike-in Kit

内在性miRNAに類似したサイズの合成RNAのSpike-in controlと、qPCR検出用のForward primerのセットです。それぞれのSpike-inが最適な濃度で混合されているため、試料中に存在する低濃度~高濃度の内在性miRNAのコントロールとして有用です。RNA抽出ステップ(Spkn1~3)とcDNA合成ステップ(Spkn4とCel-miR-39)のそれぞれの操作前に試料に添加することにより、各ステップにおける効率の評価、および逆転写とPCR増幅時の阻害物質による影響の検証に役立ちます。

EVery miRNA Spike-in Kit

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ヒト血清・血漿試料からのmiRNA抽出およびcDNA合成についてのEVery miRNA Spike-in Kitを用いた検証

キット内容

  • Spkn1, Spkn2, Spkn3 RNA Spike-in mix
  • Spkn4, cel-miR-39-3p RNA Spike-in mix
  • Spkn1 / Spkn2 / Spkn3 / Spkn4 forward primers
  • cel-miR-39-3p forward primer

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価格

EVery EV RNA Isolation Kit

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
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  • 法規制等
納期 文献数
EVery EV RNA Isolation Kit(20preps)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等 取扱注意
保存条件 室温,-20℃ 法規備考
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EVery EV RNA Isolation Kit(20preps)

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法規制等 取扱注意
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[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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EVery miRNA Spik-in Kit(100assays)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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