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二次元/三次元細胞培養などに最適なハイドロゲル(濃度調製済み) VitroGel Hydrogel Matrix(Ready-to-useタイプ)

掲載日情報:2023/05/08 現在Webページ番号:70312

三次元細胞培養や二次元培養用プレートへのコーティングによる細胞遊走性・浸潤性研究、実験動物への導入にも使用できるアニマルフリーな多糖ベースのハイドロゲルです。
酸素、培地成分、各種分子のゲル内透過性に優れているため、長期培養や創薬研究にも有用です。Ready-to-useタイプとして、幅広い細胞に使用することができます。

VitroGelボトルの外観

VitroGelシリーズの共通の特長

Ready to use
  • pHの事前調整が不要
  • 室温下で安定
  • 細胞と混合するだけの簡単操作
Transparent
  • 優れた透明性
  • 細胞を幅広いイメージングシステムで観察可能
Cell harvesting
  • 三次元細胞培養後に通常の遠心分離で細胞を回収できます。
Injectable
  • インジェクションが可能です。
  • in vivo の研究に最適です。
  • 簡単な操作で、培地またはPBSと混合するだけでゲル化が開始し、わずか20分で安定なゲルが得られます。
  • 酸素・培地成分・各種分子のゲル透過性が高く、長期培養や創薬研究に有用です。
  • 天然の状態により近い環境下で細胞を培養できるため、in vitro からin vivo への移行の際に有用なデータが得られます。
  • 様々な細胞で使用実績があります。
  • 専用のVitroGel Organoid Recovery Solution(別売)を用いることで、酵素を使用することなく高い細胞生存率で簡単に細胞を回収することができます。

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ワークフロー

VitroGelの操作方法概略

VitroGel Hydrogel Matrix(#VHM01S、#VHM01)のワークフロー

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使用例

三次元管腔乳がんモデル-1:線維芽細胞の長期三次元培養例

現在の三次元乳がんモデルでは、単一細胞型ベースのために腫瘍微小環境において線維芽細胞が関与する線維化などの複雑な細胞恒常性を再現することはできませんでした。しかし、VitroGel HydroGel Matrix(#VHM01)を用いることにより、長期培養および共培養機能を備えた高度な三次元管腔乳がんモデルが樹立されました。管腔構造は、乳がんスフェロイドのin vivoでの特徴的な構造で、がんの進行に関与します。

3D管腔乳がんモデル:繊維芽細胞の長期三次元培養および共培養例

VitroGel Hydrogel MatrixでのMCF-7乳がん細胞の長期三次元培養例

上図に長期培養の様々な段階(1、7、14、35日目)でのMCF-7細胞の形態を示した。

  • 1日目~:細胞スフェロイド形成中において、管腔構造()が観察された。
  • 7日目~:一部の細胞で極性の喪失し、管腔構造がより明確になった。
  • 14日目:スフェロイド構造が観察された。
  • 35日目:悪性化したスフェロイドは、不均一な細胞塊を生成し続けた。
Application Note

三次元管腔乳がんモデル-2:線維芽細胞の共培養例

下図の蛍光画像は、組織化された核の形成と管腔構造を取り巻くアクチンフィラメントを示す。VitroGel Hydrogel Matrix(#VHM01)でMCF-7細胞を培養すると三次元管腔構造の形成が見られたが、他社ハイドロゲルで増殖した場合では観察されなかった。MCF-7細胞クラスターとVitroGelマトリックスとの相互作用により、in vivo組織モデルと同様の細胞極性を有する組織化されたスフェロイドの生成が観察された。VitroGelシステムにおける三次元管腔乳がんモデルは、腫瘍の成長、生存、および不均一性を研究するための優れたモデルとなる。

3D管腔乳がんモデル-2:線維芽細胞の共培養例

VitroGel Hydrogel MatrixでのMCF-7乳がん細胞の共培養例

MCF-7細胞をVitroGel Hydrogel Matrixで培養すると、三次元管腔構造()が存在したが、他社ハイドロゲルで培養したMCF-7細胞は、スフェロイド構造の形成過程において三次元管腔構造の形成は見られなかった。

  • 使用機器:Zスタックイメージングシステム(二次元画像投影付属)
  • :DAPI
  • :ActinGreen
Application Note

膠芽腫細胞(U-87 MG)の三次元培養例

膠芽腫細胞(U-87 MG)の3D培養
膠芽腫細胞(U-87 MG)の3D培養
膠芽腫細胞(U-87 MG)の3D培養 膠芽腫細胞(U-87 MG)の3D培養 膠芽腫細胞(U-87 MG)の3D培養

本製品を用いてU-87 MG単一細胞を7日間培養し、直接ライブセルイメージング色素で染色した。細胞は、本製品の中で成長を続け、3Dコロニーを形成した。異なるコロニーを接続する拡張構造で細胞間相互作用が分かる。このことから、本製品を用いることにより、細胞間コミュニケーションを示す3D膠芽腫細胞モデルが実証された。


マウス骨髄細胞(OP9-GFP)の三次元培養例

マウス骨髄細胞(OP9-GFP)の3D培養

図をクリックすると拡大します(拡大図

マウス骨髄細胞(OP9-GFP)の3D培養

図をクリックすると拡大します(拡大図

単一細胞をハイドロゲルマトリックス内で均一に懸濁し、GFP蛍光画像を得た。1日目に伸張した線維芽細胞のような構造を形成し始めた。7日目には、ハイドロゲルマトリックス内に明確な三次元細胞ネットワーク構造が観察された。(Zスタックイメージングシステム使用)

がん細胞培養例

ヒト乳がん細胞(MCF-7)の三次元培養例

ヒト乳がん細胞(MCF-7)培養例 ヒト乳がん細胞(MCF-7)培養例

ヒト前立腺がん細胞(PC3)の三次元培養例

ヒト前立腺がん細胞(PC3)の3D培養

ヒト膵臓がん細胞(PANC-1)の三次元培養例

ヒト膵臓がん細胞(PANC-1)の3D培養

MCF-1、PC3、PANC-1細胞ともに、播種1日目からブドウ状の細胞コロニーの形成が見られ、培養日数の経過に伴いハイドロゲルマトリックス内でミニ腫瘍への成長が観察された(7日後)。



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[在庫・価格 :2024年04月28日 00時00分現在]

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VitroGel Hydrogel Matrix
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動物成分フリーで透明性に優れた多糖ベースのハイドロゲル。使用濃度が調整済み。培養に適した細胞種:幅広い細胞。
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保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年3月1日号 p.12
ニュース2022年3月15日号 p.7

製品記事 VitroGel Hydrogelシリーズ
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VitroGel Hydrogel Matrix
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掲載カタログ ニュース2021年2月15日号 p.7
ニュース2020年10月15日号 p.33

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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