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4種類の活性酸素種(ROS)それぞれに対する抗酸化能を評価できます Antioxidant Capacity Assay Kitシリーズ

掲載日情報:2026/02/05 現在Webページ番号:69759

4種類の活性酸素種「一重項酸素」「スーパーオキシドラジカル」「過酸化水素」「ヒドロキシラジカル」をそれぞれ検出するキットです。試料の抗酸化能の測定や抗酸化作用物質のスクリーニングに有用です。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


活性酸素とは

活性酸素は狭義的に「一重項酸素」「スーパーオキシドラジカル」「過酸化水素」「ヒドロキシラジカル」の4種類からなる酸化力の強い活性酸素種(Reactive Oxygen Species:ROS)で生体内において能動的および受動的に産生されています(下図)。その特性から免疫系において細菌やウイルスなどの外敵を破壊するために能動的に産生されます。また、シグナル因子としても機能することも知られています。一方、紫外線暴露や酸素呼吸の場であるミトコンドリアでは副産物として活性酸素が発生します。しかし、能動的・受動的問わず過剰な活性酸素は生体自身に損傷を与え、がんや生活習慣病、老化の原因となることから抗酸化酵素や抗酸化物質により速やかに消去されバランスを保つ必要があります。

生体における活性酸素の発生過程

図. 生体における活性酸素の発生過程



各活性酸素種の性質はそれぞれ異なり「一重項酸素」および「ヒドロキシラジカル」は不安定かつ反応性が高く細胞内では酸化損傷の主な要因となります。一方、「スーパーオキシドラジカル」および「過酸化水素」は反応性が低いものの比較的安定で生体内では長時間留まり、金属イオンや紫外線刺激により「ヒドロキシラジカル」生成の原因となっています(下表)。生体での発生部位はさまざまで「一重項酸素」は主に光の関与する皮膚などで生成しやすく、他の活性酸素種は呼吸や代謝、炎症過程で発生します。
(株)サクラボサイエンスでは、試料の活性酸素種に対する特異的消去能を評価するために4種の活性酸素種を検出するキットをご用意しています。


表. 各活性酸素種の特徴

活性酵素種安定性反応性生体での主な発生源
一重項酸素不安定高い光/紫外線(皮膚)
スーパーオキシドラジカル安定低い酸素呼吸、炎症、代謝
過酸化水素非常に安定低い炎症、代謝
ヒドロキシラジカル非常に不安定極めて高い光/紫外線、酸素呼吸、炎症、代謝

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製品ラインナップ

「一重項酸素」「スーパーオキシドラジカル」「過酸化水素」「ヒドロキシラジカル」の4種類の活性酸素種を測定するキットがあり、その中でスーパーオキシドラジカル測定キットはKit/Kit 2の2種類の製品があります。また4種の活性酸素種測定キットをセットにした製品(4 ROS Set)もあります。
表中の商品コードをクリックすると価格表をご覧になれます。

一重項酸素 スーパーオキシド
ラジカル
過酸化水素 ヒドロキシラジカル 4 ROS Set
(左記4種のキットのセット)
SL-2010 Kit:SL-2020 SL-2030 SL-2040 Kit:SL-2050
Kit 2:SL-2022 Kit 2:SL-2052

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特長

  • 化学発光による測定のため、試料の色や自家蛍光の影響を受けにくくなっています。
  • 試薬は着色されており、試薬添加の有無を目視で確認できます。
  • 測定試料:化合物、血清、血漿、細胞抽出物、組織抽出物(動植物)
  • 測定時間:0.5~1時間

測定には化学発光を検出できるマイクロプレートリーダーが別途必要です。

着色試薬による添加ミス防止

着色試薬による添加ミスの防止(#SL-2020を使用した例)
ホワイトプレートを用いて化学発光測定を行うため、試薬が無色透明だと添加の有無を確認しにくく、添加漏れの原因となります。本キットでは試薬を着色してあり、目視確認が可能なため、操作ミスを低減できます。


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測定原理

Antioxidant Capacity Assay Kitの測定原理

Antioxidant Capacity Assay Kitの測定原理



反応系中で対象とする活性酸素を発生させます。発生した活性酸素は検証する試料の抗酸化能によって消去されます。その後、対象の活性酸素を特異的に検出する化学発光プローブと反応させることで短時間かつ高感度に活性酸素残量を測定することができます。

スーパーオキシドラジカル測定Kit 2(#SL-2022)の測定原理についてはこちらをご覧下さい。


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操作方法概略

試料と活性酸素溶液(ROS solution)を反応させた後にそれぞれの活性酸素種特異的に反応する化学発光プローブ(Detection solution)を用いて残存する活性酸素を検出することで抗酸化能を評価します。

スーパーオキシドラジカル測定キット(Kit 2、#SL-2022)は3ステップ、一重項酸素測定キット(#SL-2010)は5ステップ、その他のキットは4ステップで測定できます。詳細は各製品のデータシートをご参照下さい。



Antioxidant Capacity Assay Kitの測定方法概略

Antioxidant Capacity Assay Kitの測定方法概略


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スーパーオキシドラジカル測定用キット(Kit/Kit2)の違いについて

従来製品(Kit、#SL-2020)を含む多くのスーパーオキシドラジカル測定キットでは、キサンチンオキシダーゼ(XOD)の反応により発生したスーパーオキシドラジカルの消去能を測定していましたが、測定物質によるキサンチンオキシダーゼ阻害時も間接的にスーパーオキシドラジカル消去能として検出することが問題でした(下図)。
そこでKit 2(#SL-2022)では、メナジオンにより発生したスーパーオキシドラジカルを測定することでスーパーオキシドラジカル消去能だけを検出します。
またKit 2(#SL-2022)は、 Neutrophil NADPH Oxidase Inhibitor Screening Kit(#SL-3010)およびXanthine Oxidase Inhibitor Screening Kit(#SL-4010)の予備検証としてもご利用いただけます。詳細はこちらをご覧下さい。

従来製品(Kit、#SL-2020)の測定原理

従来製品(Kit、#SL-2020)の測定原理

Kit 2(#SL-2022)の測定原理

Kit 2(#SL-2022)の測定原理

図. スーパーオキシドラジカル測定用キットの測定原理比較



カテゴリー物質名Kit
(#SL-2020)
Kit2
(#SL-2022)
抗酸化
物質
N-Acetyl-L-CysteineN.D.1.3 mM
α-Lipoic AcidN.D.2.3 mM
GlutathioneN.D.3.6 mM
Chlorogenic Acid50 μM0.9 μM
Trolox150 μM4.5 μM
Gallic Acid20 μM0.3 μM
Ascorbic Acid100 μM6 μM
XOD
阻害物質
Allopurinol400 nMN.D.
Oxipurinol700 nM≧3 mM
Febuxostat7 nM≧50 μM

各キットにおける抗酸化物質およびXOD阻害物質のIC50
Kit 2(#SL-2022)は、従来製品(Kit、#SL-2020)よりも高感度に測定物質によるスーパーオキシドラジカル消去能を検出でき、かつXODの作用を区別できる。

抗酸化物質

Kit 2(#SL-2022)におけるスーパーオキシドラジカル特異性
メナジオンにより発生した活性酸素はスーパーオキシドラジカルを特異的に消去するSODにより消失するが、過酸化水素を消去するカタラーゼでは消失していないことからスーパーオキシドラジカル特異的な反応を検証している。


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使用例:抗酸化能の評価

抗酸化能の評価として試料の活性酸素消去率やIC50値(50%阻害(消去)濃度)を算出する方法、抗酸化標準物質である没食子酸(Gallic acid)を用いた没食子酸等価活性値(Gallic acid equivalent antioxidant capacity: GAEAC)、Troloxを用いたトロロックス等価活性値(Trolox equivalent antioxidant capacity: TEAC )を算出する方法があります(詳細はデータシートをご覧下さい)。
下表に示すように、同じ抗酸化物質や抽出物であっても活性酸素種によって消去能は異なります。

各キットを用いて測定した代表的抗酸化物質の活性酵素に対するIC50
IC50値が低いほど抗酸化力が高いことを意味する。

抗酸化酵素・物質一重項酸素スーパーオキシドラジカル過酸化水素ヒドロキシラジカル
#SL-2010#SL-2020#SL-2022#SL-2030#SL-2040
Catalase(過酸化水素特異的)N.D.N.D.N.D.30 ng/mlN.D.
SOD(・O2-特異的)N.D.100 ng/ml30 ng/mlN.D.N.D.
N-Acetyl-L-Cysteine200 μMN.D.1.3 mM2 μM150 μM
α-Lipoic Acid20 μMN.D.2.3 mM100 μM300 μM
Glutathione80 μMN.D.3.6 mM1 μM10 μM
Chlorogenic Acid100 μM50 μM0.9 μM1 μM1 μM
Trolox100 μM150 μM4.5 μM3 μM5 μM
Gallic Acid300 μM20 μM0.3 μM1 μM3 μM
Ascorbic Acid180 μM100 μM6 μM5 μM5 μM

各キットを用いた果物・野菜・魚抽出物(水溶性物質)におけるGAEAC値およびTEAC値
GAEAC値およびTEAC値が高いほど抗酸化力が高いことを意味する。

GAEAC(μmol GAE / mg protein)
抽出物一重項
酸素
スーパーオキシド
ラジカル
過酸化
水素
ヒドロキシ
ラジカル
#SL-2010#SL-2020#SL-2030#SL-2040
ミカン6.251.20.10.75
ニンジン1.970.860.010.01
緑茶3.951.50.130.1
サケ10.7130.030.004
トマト0.630.10.010.01
TEAC(μmol TE / mg protein)
抽出物一重項
酸素
スーパーオキシド
ラジカル
過酸化
水素
ヒドロキシ
ラジカル
#SL-2010#SL-2020#SL-2030#SL-2040
ミカン55.20.31.25
ニンジン1.583.710.030.01
緑茶3.166.50.380.17
サケ8.57130.10.01
トマト0.50.430.030.02

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従来法との比較

本キットは従来の活性酸素測定法と比較してESR装置のような高価な機器を必要とせず、マイクロプレートリーダーで抗酸化能が検証ができます。また、危険物質を使用していないため安全に測定することができます。さらに化学発光による測定のため、試料の色や自家蛍光の影響を受けにくいのが特長です。

従来法と本キットの比較

従来法難点本キット
活性酵素種全般スピントラップ法ESR装置が必要発光測定機器
一重項酸素SOAC法溶媒としてクロロホルム使用クロロホルム未使用
スーパーオキシドラジカル発色法試料色が影響試料色の影響を受けにくい
過酸化水素発色法
ヒドロキシラジカルHORAC法

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(株)サクラボサイエンスのアッセイキット

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関連製品

それぞれの画像をクリックすると該当製品の詳細をご覧になれます。

抗酸化物質
(R&D Systems)
ルミノメーター用プレートシール
(Excel Scientific社)
測定S/N比が向上します
CoQ10の定量受託サービス
(カネカテクノリサーチ社)
植物のメタボローム解析受託サービス
(インプランタイノベーションズ社)
抗酸化物質 ルミノメーター用プレートシール CoQ10の定量受託サービス 植物のメタボローム解析受託サービス


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価格

[在庫・価格 :2026年02月22日 00時00分現在]

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Antioxidant Capacity Assay Kit for Singlet Oxygen, 96 tests
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
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試料の一重項酸素に対する抗酸化能を測定できるキット。化学発光による測定のため,試料の色や蛍光の影響を受けにくくなっている。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年12月1日号 p.26
ニュース2024年12月15日号 p.22
ニュース2024年2月1日号 p.14

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試料のスーパーオキシドラジカルに対する抗酸化能を測定できるキット。化学発光による測定のため,試料の色や蛍光の影響を受けにくくなっている。
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試料のヒドロキシラジカルに対する抗酸化能を測定できるキット。化学発光による測定のため,試料の色や蛍光の影響を受けにくくなっている。
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4 ROS Set

4種の活性酸素種測定用キットをセットにした製品です。

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Antioxidant Capacity Assay Kit (4 ROS set), 各96 tests
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(株)サクラボサイエンスの活性酸素種測定キット4種(#SL-2010, #SL-2020, #SL-2030, #SL-2040)のセット。 詳細はweb記事をご覧下さい。
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ニュース2023年12月1日号 p.26
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Antioxidant Capacity Assay Kit 2 (4 ROS set) (SL-2010,2022,2030,2040)
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(株)サクラボサイエンスの活性酸素種測定キット4種(#SL-2010, #SL-2022, #SL-2030, #SL-2040)のセット。 詳細はweb記事をご覧下さい。
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