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ヒト,マウス,マッシュルーム由来チロシナーゼ活性の阻害・促進物質のスクリーニングキット Tyrosinase Inhibitor Screening Assay Kitシリーズ

掲載日情報:2020/10/09 現在Webページ番号:68225


チロシナーゼ活性の阻害・促進物質を比色法(495 nm)によりスクリーニングできるキットです。チロシナーゼの由来生物がヒト,マウス,マッシュルームの3種類,測定できるチロシナーゼ活性がモノフェノラーゼ活性,ジフェノラーゼ活性の2種類(チロシナーゼとは参照)の,合計6種類のキットがあります。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
Tyrosinase Inhibitor Screening Assay Kit外観

チロシナーゼとは

チロシナーゼとは (クリックで展開します)

チロシナーゼ(Tyrosinase,EC1.14.18.1)は細菌から植物,昆虫,動物まで幅広い生物種に存在し,メラニン色素合成における主要代謝酵素です。メラニン色素は脊椎動物では主に皮膚や毛組織の色素細胞(メラノサイト)で合成され紫外線から細胞を保護します。しかし過度な紫外線や物理的ストレスによりメラニン産生が過剰となると皮膚に沈着しシミの原因となります。一方,食用植物においては、傷や長期保存などによりチロシナーゼがメラニン合成を促進し変色(褐変)の原因となります。チロシナーゼ活性を阻害する物質は美白作用や褐変抑制作用をもたらし,促進する物質は白髪を抑制する作用を持つことが報告されています。
メラニン合成過程においてチロシナーゼは主に2つの反応を触媒します。ひとつはモノフェノラーゼ活性で,L-チロシンなどのモノフェノールをL-ドーパキノンのようなキノンへ酸化触媒し,もう一つはジフェノラーゼ活性で,L-DOPAなどのジフェノールをキノンへ酸化触媒します。薬剤に対する感受性は両活性で大きく異なりますが,一般的なチロシナーゼ酵素活性は試薬調製の容易なL-DOPAを基質として測定されることが多く,難溶性のL-チロシンを基質とした測定は不安定で困難でありました。
本キットはマッシュルーム,マウス,ヒト由来チロシナーゼを用いて,L-チロシンもしくはL-DOPAを基質として反応したときのモノフェノラーゼまたはジフェノラーゼ活性を安定的に検証することができます。


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特長

  • メラニン色素合成経路の主要代謝酵素であるチロシナーゼの阻害物質,促進物質をスクリーニングできます。
  • チロシナーゼの由来生物はヒト,マウス,マッシュルームから選択でき,哺乳類由来酵素を用いたキットは業界初です。
  • 基質としてL-チロシンとL-DOPAが選択でき,チロシナーゼの有する2つの触媒機能それぞれの活性を測定できます。
Tyrosinase Activity

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製品ラインナップ

哺乳類チロシナーゼとマッシュルームチロシナーゼは構造や局在が異なり,マウスチロシナーゼとヒトチロシナーゼは酵素機能が異なることから化合物に対する感受性がそれぞれ異なります。
美白作用物質のスクリーニングにはヒトチロシナーゼを,褐変抑制作用物質のスクリーニングにはマッシュルームチロシナーゼを用いたキットを推奨します。お客様の試験目的・計画に応じて適切なキットをお選びく下さい。

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

酵素の由来 測定酵素活性 品 名 商品コード
ヒト Monophenolase activity Human Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Monophenolase activity) SL-7030
Diphenolase activity Human Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Diphenolase activity) SL-7031
マウス Monophenolase activity Mouse Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Monophenolase activity) SL-7020
Diphenolase activity Mouse Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Diphenolase activity) SL-7021
マッシュルーム Monophenolase activity Mushroom Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Monophenolase activity) SL-7010
Diphenolase activity Mushroom Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Diphenolase activity) SL-7011

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操作方法概略

Tyrosinase Inhibitor Screening Assay Kit操作方法概略
  1. プレートのウェルに20μlの試料を添加する。
  2. 各ウェルに20μlのEnzyme solutionを添加し,10分間インキュベートする。
  3. 各ウェルに60μlのSubstrate solutionを添加し,30℃でインキュベートする。
  4. 各ウェルの吸光度(495 nm)を測定する。

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使用例

各酵素,各基質のキットを用いたコウジ酸の阻害効果の検証

コントロール(未処理),0.0032,0.016,0.08,0.4,2,10 mM コウジ酸存在下で発色を行った。

コウジ酸の阻害効果の検証


美白作用および褐変抑制作用を有する代表的な化合物について本キットで測定した50%阻害値(IC50:μM)

化合物名 ヒト マウス マッシュルーム
Monophenolase Diphenolase Monophenolase Diphenolase Monophenolase Diphenolase
Kojic acid 250 600 30 80 80 80
α-Arbutin 150 900 2,000 5,000 1,700 No Inhibition
β-Arbutin 400 3,500 3,800 10,000 2,000 No Inhibition
Hydroquinone 100 720 70 1,000 20 No Inhibition
Ascorbic Acid 350 90 600 115 160 390
Funako-Comment

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キット内容

  • Assay buffer
  • Enzyme
  • Substrate
  • Substrate buffer*1
  • Enhancer*2
  • Inhibitor control
  • 96 well plate

*1 #SL-7030, #SL-7020のみ
*2 #SL-7030, #SL-7020, #SL-7010のみ

以下のものが別途必要となります。

  • 吸光マイクロプレートリーダー(480~510 nmフィルター:推奨495 nm)
  • インキュベーター(25~30℃)
  • ピペット,マルチチャンネルピペット(2~200μl)

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価格

[在庫・価格 :2021年04月17日 00時13分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
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  • 法規制等
納期 文献数
Human Tyrosinase Inhibitor Screening Kit (Monophenolase activity), 96tests
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ヒト由来チロシナーゼのモノフェノラーゼ活性を阻害・促進する化合物をスクリーニングするキット。
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ニュース2021年1月合併号 p.30

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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