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ヒト細胞培養のコーティング剤やECMゲルの作製、バイオプリンターインクに Huma OsteoGelatin(ヒトドナー骨由来ゼラチン)

掲載日情報:2021/10/25 現在Webページ番号:67367

Humabiologics社のHuma OsteoGelatinは、ヒトの骨から抽出したゼラチン(Gelatin)です。
細胞接着や細胞成長の促進に加え、メタクリル化済みゼラチン(Huma OsteoGelMA)をUVライトによってゲル化させ、細胞培養の足場材として使用できます。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
Huma OsteoGelatinはHIV-1, HIV-2, Hepatitis B, Hepatitis Cなどが陰性であることを確認しています。

Huma OsteoGelatin製品イメージ

Huma OsteoGelatin

Huma OsteoGelMA製品イメージ

Huma OsteoGelMA


ゼラチンとは

(クリックで開閉します)

ゼラチン(Gelatin)は、平均分子量が大きい水溶性タンパク質の不均一混合物です。ゼラチンタンパク質はコラーゲンの多い組織を変性することで得られます1。ゼラチンの剛性や圧縮性などの力学的特徴はゼラチンタンパク質の平均分子量と関連しており、「Bloom Number」(ブルーム値:ゼリー強度)として表記されます1。Humabiologics社はヒトゼラチンのみで構成されたブルーム値:90~300 gのヒトゼラチンを供給し、トランスレーショナルリサーチや再生医療研究のニーズにこたえています。

ヒトゼラチンは細胞培養器材表面のコーティングに使用可能で、多くの細胞で細胞接着が促進されることが知られています2。また、生体適合性の高さから、三次元足場材や組織培養用ヒドロゲル、生理活性分子の放出のコントロールに利用されています4, 5。製薬研究ではカプセル剤やタブレット製造のバインダーとして用いられています6。ゼラチンはコラーゲンなどその他の生体試料と組み合わせることが可能で、ヒト由来組織の複合材料を作製することが可能です。
Humabiologics社ヒト由来コラーゲンはこちら

Huma OsteoGelatinの等電点は7.0~9.0で、文献情報より100 gあたり80 mmol程度のカルボキシル基を持つと計算されます2

■参考文献

  1. Gelatin Manufacturers Institute of America Inc, Gelatin Handbook, 51 W 52nd St, New York, New York 10019, US(2012).
  2. Gelatin Manufacturers Institute of America Inc, Standard Methods for the Sampling and Testing of Gelatins, 51 W 52nd St, New York, New York 10019, US(1986).
  3. Davidenko, N., et al., J. Mater. Sci. Mater. Med., 27(10):148(2016). "Evaluation of cell binding to collagen and gelatin: a study of the effect of 2D and 3D architecture and surface chemistry."
  4. Kang, H.W., Tabata Y. , and Ikada Y. , Biomaterials, 20(14):1339~1344(1999). "Fabrication of porous gelatin scaffolds for tissue engineering."
  5. Dong, Z., Wang Q., and Du Y., Journal of Membrane Science, 280(1):37~44(2006). "Alginate/gelatin blend films and their properties for drug controlled release."
  6. Corveleyn, S. and Remon J.P., International Journal of Pharmaceutics, 152(2):215~225(1997). "Formulation and production of rapidly disintegrating tablets by lyophilisation using hydrochlorothiazide as a model drug."
  7. Gautam, S., et al., Materials Science and Engineering: C, 34:402~409(2014). "Surface modification of nanofibrous polycaprolactone/gelatin composite scaffold by collagen type I grafting for skin tissue engineering."


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Humabiologics社製品で用いている組織の由来について

Humabiologics社製品は、American Association of Tissue Banks(AATB)認定済み、米国食品医薬品局(FDA)登録済みで、FDAの21 CFR 1271に準拠した組織バンクであるOrgan Procurement Organizations(OPO)から厳密に調達されています。
Humabiologicsは、高品質の生体材料由来製品を提供することにより、研究ニーズを満たすよう努めています。



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特長

  • ヒトの骨から抽出したゼラチンです。
  • コーティング剤として、細胞接着、成長の促進に使用できます。
  • メタクリル化済みゼラチンをUVでゲル化させ、ECMマトリックスのように使用することが可能です。
  • コラーゲンなどのその他のECMと組み合わせて使用できます。
  • バイオプリンターの材料(バイオインク)としても使用できます。

「Bloom Number:ブルーム数」は、ブルームゲルメーターで測定した既知の濃度の溶液から形成されるゲルの強度を示します。ブルーム数は平均分子量に比例します。詳細は下記文献をご覧下さい。

Gelatin Manufacturers Institute of America Inc, Standard Methods for the Sampling and Testing of Gelatins, 51 W 52nd St, New York, New York 10019, US(1986).

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
PDFマークをクリックするとデータシートのPDFファイルをダウンロードできます。

品名 特長 コーティング濃度 データシート 包装 商品コード
Huma OsteoGelatin, High Bloom
(ヒト骨由来ゼラチン)
ブルーム値(高):~300 g
平均分子量:50,000~100,000
0.1~0.2 mg/cm2* PDFマーク 100 mg BGHL-100mg
PDFマーク 250 mg BGHL-250mg
PDFマーク 500 mg BGHL-500mg
PDFマーク 1 g BGHL-1g
PDFマーク 5 g BGHL-5g
Huma OsteoGelatin, Medium Bloom
(ヒト骨由来ゼラチン)
ブルーム値(中):~225 g
平均分子量:40,000~50,000
PDFマーク 100 mg BGML-100mg
PDFマーク 250 mg BGML-250mg
PDFマーク 500 mg BGML-500mg
PDFマーク 1 g BGML-1g
PDFマーク 5 g BGML-5g
Huma OsteoGelMA-Human Gelatin Methacrylate
(メタクリル化済みゼラチン)
ブルーム値(高):~300 g
平均分子量:50,000~100,000
PDFマーク 1 g BMHL-1g
ブルーム値(中):~300 g
平均分子量:40,000~50,000
PDFマーク 1 g BMML-1g

一般的な使用例です。特定のアプリケーションや細胞タイプに基づいて最適化する必要があります。


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使用例

ヒト間葉幹細胞の培養の画像

Huma OsteoGelatinでコーティングした培養容器で、ヒト出産組織由来間葉幹細胞を培養した例


バイオプリンターでプリントした画像

メタクリル化ゼラチンをバイオインクとしてバイオプリンターでプリントした例
各種構造を作製可能であるほか、ヒト肝細胞を混合した例では96%以上の細胞生存率であった。


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使用方法例

以下は一般的な使用例です。特定のアプリケーションや細胞タイプに基づいて最適化する必要があります。

培養容器コーティング

  1. Huma OsteoGelatinを脱イオン水で撹拌しながら溶解する。
    高濃度の場合37℃で30分緩やかに撹拌するなど、溶解条件の検討が必要な場合があります。
    よく使用される濃度:100~200μg/cm2
  2. 0.22μmのフィルターか121℃、20分のオートクレーブで滅菌する。
  3. 無菌条件下で培養容器表面ゼラチン溶液を添加し、全体になじませる。
  4. 蓋をして37℃で2時間以上置く。
  5. 培養容器表面をひっかかないように余剰の溶液を除く。
  6. 細胞培養インキュベーターに移し、蓋を開けて風乾する。この時30分のUV露光を行うことで滅菌が可能。
  7. 直ちにゲルを使用するか、2~10℃で保管する。

ゼラチンクロスリンク(バイオプリンター)

  1. Huma OsteoGelMAを60℃の1×PBSまたは1×培地に溶解する(終濃度5%以上を推奨)。
  2. Irgacure 2959やLAPなどの光重合開始剤を添加する。
  3. 無菌環境下で、シリンジフィルターを使用してろ過滅菌する。
  4. 37℃のインキュベーターに入れて冷却する。
  5. 細胞を溶液に加える。
  6. メーカーの指示に従って、細胞、Huma OsteoGelMA、光重合開始剤の混合溶液をバイオプリンターのシリンジに入れる。
  7. バイオプリンターをセットアップし、印刷条件、目的のアプリケーション、バイオプリンターメーカーの指示に基づいてパラメータを最適化する。
    最適化が必要なパラメータには、ノズル径、圧力、ノズル温度、プリントベッド温度、プリント速度、架橋光源の距離と光源強度などがあります。


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メーカーインタビュー

Humabiologics
Humabiologics 社 は、ヒト組織から抽出された細胞外基質を提供するアメリカのメーカーです。
創業者で CEO の Mohammad Albanna博士にお話を伺いました。
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価格

[在庫・価格 :2024年05月30日 20時55分現在]

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Huma OsteoGelatin- Human Gelatin, Lyophilized, High Bloom ~300g
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ヒト骨由来ゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ブルーム値(高):~300 g,平均分子量:50,000~100,000
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ニュース2022年3月15日号 p.5

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ヒト骨由来ゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ブルーム値(中):~225 g,平均分子量:40,000~50,000
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ヒト骨由来ゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ブルーム値(中):~225 g,平均分子量:40,000~50,000
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ヒト骨由来ゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ブルーム値(中):~225 g,平均分子量:40,000~50,000
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ヒト骨由来のメタクリル化済みゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ゼリー強度:高
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ヒト骨由来のメタクリル化済みゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ゼリー強度:中
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Huma OsteoGelatin- Human Gelatin, Lyophilized, High Bloom ~300g

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Huma OsteoGelatin- Human Gelatin, Lyophilized, High Bloom ~300g

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説明文 ヒト骨由来ゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ブルーム値(中):~225 g,平均分子量:40,000~50,000
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説明文 ヒト骨由来のメタクリル化済みゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ゼリー強度:高
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説明文 ヒト骨由来のメタクリル化済みゼラチン。コーティング剤として細胞接着,成長の促進に利用できる。ゼリー強度:中
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保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年3月1日号 p.13
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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