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細胞培養に利用可能なヒト皮膚由来タイプ1コラーゲン HumaDerm Human Skin Collagen Type I(可溶性/不溶性)

掲載日情報:2021/10/25 現在Webページ番号:67365

Humabiologics社のHumaDermはヒトの皮膚から抽出したタイプ1コラーゲンです。
適切な溶媒に溶解し、細胞培養器材のコーティング用途に使用できます。また、培養培地と混合しゲル化させることでハイドロゲルマトリックスとしても使用できます。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
HumaDerm Human Skin Collagen Type IはHIV-1, HIV-2, Hepatitis B, Hepatitis Cなどが陰性であることを確認しています。

HumaDermタイプ1コラーゲン製品イメージ

コラーゲンとは

(クリックで開閉します)

コラーゲンは生体内で最も多く含まれるタンパク質であり、生体適合性や生体吸収性が高い点から、広く医療応用されています。生体中のコラーゲンは、分子同士が会合した線維を形成して存在し、湿重量当たり15~30%という高い存在量で各種組織を構成しています。

中でもタイプ1コラーゲンはヒトにおける主要コラーゲンであり、皮膚や骨、腱、線維性結合組織の主要マトリックスタンパク質です1。現在、3種類のコラーゲンが同定されており、それらは3つのポリペプチドからなる3ヘリックス構造をとります2。コラーゲンのタイプはアミノ酸配列のわずかな違いから分けられており、タイプ1コラーゲンは1つのα2(I) と2つのα1(I)からなるヘテロトライマーを形成しています3

多様な細胞において細胞表面レセプターがコラーゲンを認識し、フィルムやスキャフォールドを構成しているコラーゲン素材への細胞接着を促進します。特によく知られたレセプターはインテグリンα1β1とα2β1です4。Mesenchymal Stem Cells(MSCs), Fibroblasts, Endothelial Cells, Chondrocytes, Osteoblasts, Lymphocytesなどの多くの細胞がインテグリンを発現しており、平滑筋細胞は上皮系細胞を介してコラーゲンと相互作用しています3, 5~9

タイプ1コラーゲンはSDS-PAGEにおいて3つの構成要素が現れることが知られており、αは100 kDa(one α1+one α2)、βは200 kDa(two α1+α1α2)、γは300 kDa(two α1+one α2)の分子量を示します。

HumaDermはこれらすべての構成要素を含んでおり、切断されたペプチド断片が少ないという特長を持ちます。HumaDermは組織表面コーティングや細胞接着の補助、細胞成長の補助、ハイドロゲル作製など多くの用途に使用できます。

■参考文献

  1. Bornstein, P. and Sage, H., Annu. Rev. Biochem., 49:957~1003(1980). "Structurally distinct collagen types."
  2. Tanzer, M.L., Science, 180(4086):561~566(1973). "Cross-linking of collagen."
  3. Heino, J., Bioessays, 29(10):1001~1010(2007). "The collagen family members as cell adhesion proteins."
  4. Barczyk, M., Carracedo, S. and Gullberg, D. Cell Tissue Res., 339(1):269~280(2010). "Integrins."
  5. Heino, J., Matrix Biol., 19(4):319~323(2000). "The collagen receptor integrins have distinct ligand recognition and signaling functions."
  6. Ivaska, J., et al., Connective tissue, 30, 273~283(1998). "Cell adhesion to collagen. Is one collagen receptor different from another?"
  7. Goessler, U.R., et al., J. Cell Mol. Med., 13(6):1175~1184(2009). "In vitro analysis of integrin expression in stem cells from bone marrow and cord blood during chondrogenic differentiation."
  8. Ebert, E.C. and A.I. Roberts, Cell Immunol., 167(1):108~114(1996). "Human intestinal intraepithelial lymphocytes bind to mucosal mesenchymal cells through VLA4 and CD11A."
  9. Gilcrease, M.Z., Cancer Lett., 247(1):1~25(2007). "Integrin signaling in epithelial cells."


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Humabiologics社製品で用いている組織の由来について

Humabiologics社製品は、American Association of Tissue Banks(AATB)認定済み、米国食品医薬品局(FDA)登録済みで、FDAの21 CFR 1271に準拠した組織バンクであるOrgan Procurement Organizations(OPO)から厳密に調達されています。
Humabiologicsは、高品質の生体材料由来製品を提供することにより、研究ニーズを満たすよう努めています。


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特長

  • ヒト皮膚から抽出したタイプ1コラーゲンです。
  • 希釈してコーティング剤としても使用できます。
  • 高濃度でゲル化させ、ECMマトリックスのように使用することが可能です。
  • 可溶性および不溶性コラーゲン製品があります。

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
PDFマークをクリックするとデータシートのPDFファイルをダウンロードできます。

品名 特長 コーティング
濃度
ゲル化濃度 仕様 データシート 包装 商品コード
HumaDerm-
Human Skin Collagen Type I
可溶性 0.01~0.10 mg/ml* 終濃度≧0.5 mg/ml
(pH≒7.5)
凍結乾燥品 PDFマーク 25 mg SCL-25mg
PDFマーク 50 mg SCL-50mg
PDFマーク 100 mg SCL-100mg
溶液品(濃度:3 mg/ml) PDFマーク 10 mL SCS3-10ml
PDFマーク 20 mL SCS3-20ml
溶液品(濃度:6 mg/ml) PDFマーク 10 mL SCS6-10ml
HumaDerm Insoluble-
Human Skin Collagen Type I
不溶性 凍結乾燥品 PDFマーク 1 g SCIL-1g
PDFマーク 5 g SCIL-5g

一般的な使用例です。特定のアプリケーションや細胞タイプに基づいて最適化する必要があります。


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使用例

■ヒト骨髄幹細胞を各コーティング剤を塗布した培養容器を用いて培養を行った例

ヒト骨髄幹細胞の画像 ヒト骨髄幹細胞の増殖率グラフ

HumaDermが最も高い細胞増殖率を示した。ヒト胎盤由来コラーゲンとヒト皮膚由来コラーゲンを比較しても細胞増殖率が大きく異なっている。


■ヒト内皮細胞、線維芽細胞、血管周皮細胞の培養例

組織内に血管が形成された画像

ラットコラーゲンとHumaDermをそれぞれゲル化させ、ヒト内皮細胞、線維芽細胞、血管周皮細胞で作られたオルガノイドを培養した。HumaDermで培養したオルガノイド内に血管が形成された。


■ゲルの強度の比較例

ゲルの強度の比較例

ヒト由来コラーゲンと組換え体ヒトコラーゲンを用いてゲルを作製して比較したところ、ゲルの強度が大きく異なっていた。


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使用文献

  • Kishore V., et. al., J. Biomater. Appl., 35, 912(2021). PMID:32957839, DOI:10.1177/0885328220959162

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使用方法例

以下は一般的な使用例です。特定のアプリケーションや細胞タイプに基づいて最適化する必要があります。

培養容器コーティング

  1. HumaDermを10~20 mM HCl pH 1.9~2.1に溶解し0.1 mg/mlとする。
  2. HumaDerm溶液を最適な濃度に希釈し、培養容器表面に添加し、全体になじませる。
    よく使用される濃度:10~100μg/ml
  3. 蓋をして37℃で2時間以上置く。
  4. 培養容器表面をひっかかないように余剰の溶液を除く。
  5. 細胞培養インキュベーターで終夜静置する。
  6. PBSか培地で洗浄し、洗浄後直ちに使用する。

ハイドロゲル作製

全ての操作は氷上、もしくはコールドルームで行い、試薬は使用30分前から冷却しておきます。

  1. HumaDermを10~20 mM HCl pH 1.9~2.1に溶解し最適な濃度とする。
    最適な濃度は使用目的によって異なります。HumaDermは終濃度0.5 mg/ml以上でゲル化することを確認しています。
  2. 抗生物質等を添加した10×培養培地、もしくは10×PBSを調製する。
  3. 調製した10×溶媒とHumaDerm溶液を1:9で緩やかに混合する。
  4. pHを7.0~8.0に調整する。
  5. 37℃で30~120分インキュベートし、ゲル化させる。
    ゲル化までの時間はHumaDermの終濃度に依存します。


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関連製品

画像をクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。

ECM Solution Vial

ヒト由来ECM

ゼラチンVial

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変性コラーゲンのイメージ

変性コラーゲン検出試薬



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メーカーインタビュー

Humabiologics
Humabiologics 社 は、ヒト組織から抽出された細胞外基質を提供するアメリカのメーカーです。
創業者で CEO の Mohammad Albanna博士にお話を伺いました。
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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 08時15分現在]

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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Lyophilized
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ヒト皮膚から抽出されたタイプ1コラーゲン(可溶性)。細胞培養器材のコーティング用途に利用できる。凍結乾燥品。
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ニュース2022年3月15日号 p.5

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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Lyophilized
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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Solution, 3mg/mL
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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Solution, 6mg/mL
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ヒト皮膚から抽出されたタイプ1コラーゲン(可溶性)。細胞培養器材のコーティング用途に利用できる。溶液品(6 mg/ml)。
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HumaDerm Insoluble- Human Skin Collagen Type I, Lyophilized
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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Solution, 3mg/mL

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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Solution, 3mg/mL

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HumaDerm- Human Skin Collagen Type I, Solution, 6mg/mL

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(テクニカルサポート 試薬担当)

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