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m6Aメチラーゼ(メチルトランスフェラーゼ)の活性/阻害を測定するキット Epigenase m6A Methylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric)

掲載日情報:2020/12/16 現在Webページ番号:67228

核抽出物またはMETTL3 / METTL14などのm6Aメチラーゼを用いて、全M6Aメチラーゼ(メチルトランスフェラーゼ)の活性または阻害活性を、ELISAに類似した方法により簡便、迅速かつ高感度で比色定量できるキットです。キットに含まれるAssay standardにより、m6Aメチラーゼの比活性を定量することができます。

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m6Aメチラーゼの活性測定

m6Aメチラーゼの活性測定例
本製品を用いて、異なる濃度の組換え体ヒトMETTL3/14のm6Aメチラーゼ活性を測定した。

m6Aメチラーゼとは

m6A(N6-メチルアデノシン:N6-methyladenosine)は、真核生物、原核生物、およびウイルスにも見られる最も一般的かつ豊富に存在するRNA分子の修飾です。m6Aは、DNAの複製と損傷、RNAのスプライシング、転位、転写、および細胞防御の調節において重要な役割を果たしています。

ヒト細胞におけるm6A修飾は、METTTL3/14, WTAP, RBM15/15B, KIAA1429などのm6Aメチラーゼ(メチルトランスフェラーゼ )(writers)によって触媒され、 FTO, ALKBH5およびTET様酵素などのα-ケトグルタル酸(α-KG)およびFe2+依存性脱メチル化酵素(デメチラーゼ)(erasers)によって除去されます。
m6Aメチラーゼおよびデメチラーゼは、発生および代謝から生殖能力に至るまでの多くの生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たし、がんおよびウイルス感染を含む複数の疾患の病因に関与することが示されています。DNA上の動的かつ可逆的な化学的m6A修飾は、難解な生物学的意義の新規のエピジェネティックマーカーとしても役立つ可能性があります。

m6Aの可逆的メチル化反応

m6Aの可逆的メチル化反応



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特長

  • バックグラウンドが最小化されており、簡便で精度、信頼性に優れた測定結果が得られます。
  • 細胞/組織の核抽出物と精製タンパク質を用い、in vivoまたはin vitroの測定に適応しています。
  • 96ストリップウェルフォーマットで、ハイスループットアッセイにも最適です。
  • 必要試料量:核抽出物:2~20μg(5~10μg)、精製酵素:20 ng~1μg (50~500 ng)
  • 測定時間:5時間
  • 測定波長:450 nm(補正波長 655 nm)
  • 測定生物種:哺乳動物、植物、真菌類、細菌など
  • 測定試料:培養細胞または組織(新鮮/凍結)などからの核抽出物または精製酵素

核抽出物の調製にはEpiQuik Nuclear Extraction Kit(#OP-0002-1)の使用をお勧めします。詳細は「EpiQuik Nuclear/Whole Cell Extraction Kit」をご覧下さい。

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測定原理

ウェル上にコートされた基質m6Aに活性型m6Aメチラーゼを結合させ、メチル化します。メチル化m6Aを抗m6A抗体で捕捉し、比色定量します。得られた割合または定量値は、酵素活性に対し比例します。

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検量線

m6Aメチラーゼの検量線例

m6Aメチラーゼの検量線例

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キット内容

  • Wash buffer
  • Methylase buffer
  • m6A methylase substrate
  • S-adenosylmethionine
  • Binding solution
  • Assay standard
  • Capture antibody
  • Detection antibody
  • Enhancer solution
  • Developer solution
  • Stop solution
  • 8 well assay strip with frame

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価格

[在庫・価格 :2024年07月20日 12時35分現在]

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Epigenase m6A Methylase Activity/Inhibition Assay Kit(Colorimetric)
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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