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三次元培養細胞に適したDNA導入試薬 3D-FectIN / 3D-Fect

掲載日情報:2016/07/11 現在Webページ番号:64792

三次元培養細胞に適したDNA導入試薬です。スキャフォールド用の3D-Fectと、ハイドロゲル用の3D-FectINがあります。いずれも、血管新生、腺房形成、神経突起伸長、組織再生、腫瘍浸潤、神経分化などの研究に有用です。

トランスフェクション試薬をお探しの方必見! トランスフェクション試薬選択ガイドはこちらをご覧下さい。

3D-FectinとPepGel PGmatrix

COS7細胞を、3D-FectinとPepGel PGmatrix(0.5% w/v)との組み合わせにより、1μgのRFPまたはpVECTOR-GFP plasmid(#PL00120)(比3:1)でトランスフェクションし、72時間後に細胞の画像を取得した。

特長/キット(商品)内容

  3D-FectIN 3D-Fect
導入可能な細胞株 細胞株、初代培養細胞(こちらで最新情報をご確認いただけます)
生分解性
導入可能な核酸の種類 siRNA、shRNA、プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に使用可
血清存在下での核酸導入
3D細胞培養様式 3D-FectIN 3D-Fect
使用可能な3D細胞培養基材 3D-培養用ハイドロゲル
(PepGel PGmatrix、コラーゲン、ヒアルロン酸、PEG、フィブリン、ラミニンなど)
スキャフォールド
(スポンジ、マトリックス、インサート、など)
タンパク質発現の持続性
キット(商品)内容
3Dトランスフェクション試薬 ●(3D-FectIN) ●(3D-Fect)
使用回数/
商品コード
(適用培地)
250μl 65~125
transfections
65
transfections
TN30250 TF20250
500μl 125~250
transfections
125
transfections
TN30500 TF20500
1,000μl 250~500
transfections
250
transfections
TN31000 TF21000

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操作方法概略

  3D-FectIN 3D-Fect
1 3D-FectIN_1 3D-Fect_1
2 室温で20分間インキュベートする。
3 3D-FectIN_3
複合体をハイドロゲルに添加する。
3D-Fect_3
複合体を3Dスキャフォールドに添加する。
4 3D-FectIN_4
重合反応させる(30 min、37℃)。
3D-Fect_4
37℃で1時間撹拌する。
5 3D-FectIN_5
細胞をハイドロゲルに添加する。
3D-Fect_5
細胞を3Dスキャフォールドに添加する。
6 3D-FectIN_6
アッセイする(24/72H)。
3D-Fect_6
アッセイする(24/72H)。

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使用量

品名 培養基材 培養基材の
サイズ/量(μl)
接着細胞数
/細胞懸濁液量 (μl)2
DNA量
(μg)
Transfection
試薬量 (μl)
培養スケール
3D-FectIN 3D ハイドロゲル 50μl 0.1~0.5×105 cells 2 4~8 25μl
100μl 0.5~2×105 cells 4 8~16 50μl
200μl 1~4×105 cells 8 16~32 100μl
3D-Fect スキャフォールド 0.05 cm3
(0.5×0.5×0.2)
0.1~1×105 cells 1 3, 4 500μl
0.125 cm3
(0.5×0.5×0.5)
0.25~2×105 cells 3 9, 12
0.5 cm3
(1×1×0.5)
1~10×105 cells 15 45, 60 1,000μl

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使用例

3D-FectinとGFP plasmid DNA

HMEC-1(30,000 cells/well)を、GFP plasmid DNA(pVectOZ GFP, #PL00120)2μgと3D-FectIN 8μlとによって形成した複合体をあらかじめ加えたコラーゲンベースのハイドロゲル(Matrigel、BD Biosciences社)にトランスフェクションした。写真は、トランスフェクション48時間後のホワイトフィールドと蛍光顕微鏡での撮影像。

3D-FectinとGFP plasmid DNA

神経幹細胞(NSC、20,000 cells/well)によって構成されるNeurosphereを、96ウェルプレート1ウェル当たりRFP plasmid DNA 1 μgと3D-FectIN transfection reagent 1μlで形成した複合体をあらかじめ添加したコラーゲンベースのハイドロゲル(Matrigel、BD Biosciences社)中でトランスフェクションした。写真は、トランスフェクション48時間後のホワイトフィールドと蛍光顕微鏡での撮影像。

3D-FectinとGFP plasmid DNA

生マクロファージ(30,000 cells/well)を、96ウェルプレートのウェル当たり3D-FectIN transfection reagentの2μgとRFPプラスミドDNA 8μlで形成した複合体をあらかじめ添加したコラーゲン由来のハイドロゲル中でトランスフェクションした。写真は、トランスフェクション48時間後のホワイトフィールドと蛍光顕微鏡での撮影像。

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3D-FectINを用いた3Dスキャフォールドにおけるトランスフェクションの成功例

Cell Lines Cell Type Species Transgene
expression level
293, 293T Kidney Human +++
A549 Non-small cell lung carcinoma Human ++
BEAS-2B Bronchial Epithelial Human ++
CHO, CHO-K1 Ovary (epithelial like) Chinese Hamster ++
COS-1, COS-7 Kidney Green Monkey ++
hASC Adipocyte Stromal Cells Human +
HEK293 Kidney Human +++
HeLa, HeLa-S3 Cervix carcinoma Human ++
HMEC-1 Microvascular endothelial Human ++
MCF-7 Breast adenocarcinoma Human ++
MDCK Kidney Dog ++
NIH-3T3 Fibroblasts Mouse ++
NSC Neural stem cells Mouse +++
RAW Macrophage Mouse +
SH-SY5Y Neuroblastoma Human ++
Vero Kidney Green Monkey +++

こちらで最新情報をご確認いただけます。

トランスフェクションの成功例

96ウェルプレート中でSEAPプラスミドDNA(pVectOZ SEAP:#PL00150、分泌性ヒト胚性アルカリホスファターゼをコード)2μgと3D-FectIN transfection reagent 8μlとの複合体を形成したコラーゲン誘導ハイドロゲル中で、上記の4種類の細胞(30,000 cells/well)にトランスフェクションを行った。トランスフェクション2日目に、培養液中に分泌されたアルカリホスファターゼの濃度を測定した。

HEK-293Tの成功例

HEK-293T(30,000 cells/well)を、96ウェルプレートのウェル当たりRFPプラスミドDNA 2μgの3D-FectIN transfection reagent 8μlで形成した複合体をコラーゲン由来ハイドロゲル中でプロトコルに従ってトランスフェクションした。他の試薬は、個々のメーカーの説明書に従って試験した。48時間後に、蛍光の発現によりトランスフェクションのモニターを行った。

NIH-3T3およびCOS-7の成功例

NIH-3T3およびCOS-7(30,000 cells/well)を、96ウェルプレートの1ウェル当たり3D-fectIN transfection reagentの2μlとRFPプラスミドDNA 8μgによって形成した複合体を予め添加したコラーゲン由来ハイドロゲル中でプロトコルに従ってトランスフェクションした。他の試薬は、個々のメーカーの説明書に従って試験した。トランスフェクション後2日目に、培養液中に分泌されたアルカリホスファターゼの濃度を測定した。

下の画像をクリックすると、この他の実施例を含むレポートをダウンロードいただけます。

NIH-3T3およびCOS-7の成功例

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価格

3D-FectIN

[在庫・価格 :2024年04月25日 20時55分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
3D-FectIN Transfection Reagent, for Hydrogel
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 4
説明文
siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:65~125 transfections。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.12

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3D-FectIN Transfection Reagent, for Hydrogel
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siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:125~250 transfections。
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siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:250~500 transfections。
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3D-FectIN Transfection Reagent, for Hydrogel

文献数: 4

説明文 siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:65~125 transfections。
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3D-FectIN Transfection Reagent, for Hydrogel

文献数: 4

説明文 siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:125~250 transfections。
別包装品 別包装品あり
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3D-FectIN

文献数: 4

説明文 siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:3D-培養用ハイドロゲル,使用回数:250~500 transfections。
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3D-Fect

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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold
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siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:スキャフォールド,使用回数:65 transfections。
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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold
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siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:スキャフォールド,使用回数:125 transfections。
別包装品 別包装品あり
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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold
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siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:スキャフォールド,使用回数:250 transfections。
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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold

文献数: 1

説明文 siRNA,shRNA,プラスミドDNAなど全ての種類の核酸に導入可能なDNA導入試薬。使用可能な3D細胞培養基材:スキャフォールド,使用回数:65 transfections。
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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold

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3D-Fect Transfection Reagent, for Scaffold

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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