生細胞のcAMP検出用蛍光バイオセンサー cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assay
掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:64420
cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayは、cAMPと特異的に結合することにより蛍光強度が上昇または減衰する蛍光タンパク質を応用した蛍光バイオセンサーです。この蛍光バイオセンサーは、蛍光プレートリーダーまたは蛍光顕微鏡による画像解析システムを用いて、従来困難であった生細胞におけるcAMPの動的挙動の継時測定、局在性の観察およびマルチプレックスアッセイを簡便に行うことができます。
目的細胞へのバイオセンサー導入に用いるバキュロウイルスベクターにBacMamを使用する従来型に加え、HEK293細胞やCHO細胞に対する導入効率が大幅に向上した改良型のバキュロウイルスベクターBig Sky BacMamを使用する製品もあります。
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- cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayとは
- cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayの主なラインナップ
- 特長
- 画像解析におけるcADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayの種類の選択基準
- アプリケーション例
- 操作方法概略
- 動画
- 他社cAMPライブセルモニタリングシステムとの比較
- キット内容
- 価格
- 関連製品:MOM社2ndメッセンジャー測定用蛍光バイオセンサー
cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayとは
BacMamベクターとBig Sky BacMamベクターの比較
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cADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayの主なラインナップ
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| Target factor | 標的経路 | プロモーター | 細胞種 | ベクター | 色 | 蛍光シグナル | 測定方法 | 商品コード | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Plate | Imaging | ||||||||
| cAMP | Gs | CMV | Non-neuronal / whole cell | Big Sky BacMam | Green | Upward | ● | ● | U0250G |
| Downward | ● | ● | D0250G | ||||||
| Red | Upward | ● | ● | U0250R | |||||
| Non-neuronal / primary-cilia | BacMam | Green | Downward | - | ● | D0201G | |||
| Gi | Non-neuronal / whole cell | Big Sky BacMam | Green | Downward | ● | ● | X0250G | ||
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特長
- 安定性の高い蛍光により、細胞内におけるcAMPの継時変化の測定が行えます。
- 添加するバキュロウイルス量に応じて、センサー発現量を簡単に調節することが可能です。
- 自動蛍光プレートリーダーおよびイメージングシステムに対応しています。
- 簡便なシングルステップアッセイです。補酵素や細胞溶解の操作は不要です。
- 異なる蛍光センサー製品を組み合わせて用いることにより、Gs、GqおよびGiの複数のシグナル伝達経路の多重測定を簡便に行うことができます。
- 多くの細胞株、初代培養細胞に用いることができます。
- 測定回数:4×96 wellプレート分の試薬が含まれています。
- 測定波長:
Green 励起485~505 nm/蛍光515~535 nm
Red 励起550~590 nm/蛍光600~700 nm
上図:cADDisの模式図(Downward型センサー)。Downward型cADDis cAMPセンサーはcAMPに結合していない場合緑色蛍光を発する。Gs型GPCRであるb2-ARのアゴニストisoproterenolを添加すると、b2-ARに結合したGsが活性化され、Adenylyl cyclaseに作用し、cAMPが産生される。cAMPの産生に伴い、cADDis cAMPセンサーがcAMPに反応して、蛍光が消光する。
中図:実際にHEK293細胞でDownward型cADDis cAMPセンサーを発現させたときの細胞の蛍光観察像。
下図:蛍光像の変化を蛍光プレートリーダーで測定。縦軸(Delta F/F0)は各時間における蛍光強度Fをt=0における蛍光強度F0で割った値の変化量。
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画像解析におけるcADDis cAMP BacMam/Big Sky BacMam Assayの種類の選択基準
Upward Kitを利用した場合にはcAMP分子の局在と蛍光シグナルが同調するため、cAMPの局在性を直接観察することができます。しかし、もともとの蛍光バックグラウンドが高い場合では、蛍光シグナルの増幅の確認が困難になるためにDownward Kitの使用をご検討下さい。Downward Kitを使用した場合、cAMP分子の局在に対応して蛍光シグナルが消光することから、もともとの蛍光バックグラウンドが高くUpward Kitでの解析が困難な場合に有効です。この場合、細胞全体の蛍光シグナルの初期値から差分を取った減衰値によりcAMPの局在性の解析を行うことが可能です。
| センサーの種類 | 蛍光シグナル | 用途・選択基準 |
|---|---|---|
| Upward Kit | 上昇 | 蛍光バックグラウンドが低い場合に使用可能 |
| Downward Kit | 減衰 | 蛍光バックグラウンドが高い場合に有用 |
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アプリケーション例
※ 本項のデータは従来のBacMam(販売終了品)にて取得。
1. Isoproterenol誘導cAMP産生: カイネティック分析、量依存的応答曲線とアッセイ信頼性解析
A:HEK293細胞にDownward型cADDis cAMPセンサーを発現させ、isoproterenolを各濃度で添加した際の蛍光強度の変化を経時的にプロットした。Isoproterenolの濃度依存的に蛍光強度の変化が見られた。
B:AのデータをもとにIsoproterenol濃度と蛍光強度の変化をプロットした。
C:再現性の評価とハイスループットスクリーニングにおける信頼性の指標であるZ’factorの算出。Z’ factor=0.95
2. 2種類の蛍光バイオセンサーを用いたGs/Gqシグナル伝達経路特異的応答の同時測定
3. Giシグナル: カイネティック分析、量依存的応答曲線とアッセイ信頼性解析
A:HEK293細胞にUpward型cADDis cAMPセンサーとGi型のGPCRであるドーパミンD2受容体を共発現させ、Quinpiroleを各濃度で添加した際の蛍光強度の変化をプロットした。Quinpiroleの濃度依存的に蛍光強度の変化が見られた。
B:AのデータをもとにQuinpirole濃度と蛍光強度の変化をプロットした。
C:再現性の評価とハイスループットスクリーニングにおける信頼性の指標であるZ’ factorの算出。Z’ factor=0.85
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操作方法概略
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動画
ライブセルアッセイプロトコール
使用例
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他社cAMPライブセルモニタリングシステムとの比較
| ポイント | MOM社cADDis cAMP BacMam Assay | A社ライブセルイメージングシステム |
|---|---|---|
| センサータンパク質 | cAMP結合タンパク質融合蛍光タンパク質 cAMPにより蛍光強度が変化 | cAMP結合タンパク質融合ルシフェラーゼ cAMPによりルシフェラーゼが活性化 |
| 検出系 | 蛍光シグナル - 蛍光プレートリーダー - 各種蛍光顕微鏡(細胞内局在の観察) | ルシフェリン発光ルミノメーター |
| 遺伝子導入、標的細胞 | BacMam:さまざまな細胞で高発現 | プラスミド:細胞種が限定 |
| 薬剤応答濃度限界 | nM | sub-uM |
| アゴニスト添加後の データサンプリング | 秒単位 | 分単位 |
| マルチプレックス | 対応 | 非対応 |
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キット内容
- cADDis cAMP sensor BacMam*1
- Sodium butyrate*2
- Receptor BacMam*1、*3
- IsoproterenolまたはQuinpirole Hydrochloride*3
*1:キットにより内容が異なります。
*2:他のHDAC阻害物質もご使用いただけます。
*3:#D0201Gには含まれません。
※ 測定には、96 wellマイクロプレート、蛍光プレートリーダーまたは蛍光顕微鏡(蛍光イメージングシステム)が別途必要です。
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価格
[在庫・価格 :2026年05月16日 15時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml) |
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Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml) |
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Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (30ml) |
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Green Downward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml) |
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Green Downward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml) |
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Green Downward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (30ml) |
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml) |
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml) |
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam |
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Green Cilia-Targeted cAMP in BacMam(400 assay, 10mL) |
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Green Gi cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml) |
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Green Gi cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml) |
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Green Gi cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (30ml) |
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[在庫・価格 :2026年05月16日 15時55分現在]
Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml)
文献数: 0
- 商品コード:U0250G
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥231,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 4℃,-20℃,暗所保存 | 法規備考 | |
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Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml)
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- 商品コード:U0250G
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥462,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
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Green Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (30ml)
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- 商品コード:U0250G
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:ご照会ください
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
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Green Downward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml)
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- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥231,000
- 在庫:無(未発注)
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Green Downward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml)
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- メーカー:MOM
- 包装:1kit
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- 在庫:無(未発注)
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- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:ご照会ください
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml)
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- 商品コード:U0250R
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥231,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml)
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- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥462,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
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Red Upward cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam
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- メーカー:MOM
- 包装:30ml
- 価格:ご照会ください
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
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Green Cilia-Targeted cAMP in BacMam(400 assay, 10mL)
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- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥256,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
| 説明文 | 。 一次繊毛において,cAMPと特異的に結合することにより蛍光強度が減衰する蛍光バイオセンサー。蛍光プレートリーダーまたは蛍光顕微鏡を用いた画像解析により,一次繊毛におけるcAMPの動的挙動を簡便かつ継時的に測定することができる。測定波長:励起 450~490 nm,蛍光 510~550 nm。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年10月15日号 p.19 ニュース2017年8月1日号 p.7
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Green Gi cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (5ml)
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- 商品コード:X0250G
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥231,000
- 在庫:無(未発注)
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- 法規制等:
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| 法規制等 | |||
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Green Gi cADDis cAMP Assay - Big Sky BacMam (15ml)
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- 商品コード:X0250G
- メーカー:MOM
- 包装:1kit
- 価格:¥462,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
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- 包装:1kit
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- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:カルタヘナ該当品
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 4℃,-20℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Plate | Imaging | |||||||
| DAG | Gq | CMV | Non-neuronal / whole cell | Green | Upward | ● | ● | U0350G |
| Downward | ● | ● | D0350G | |||||
| Red | Upward | ● | ● | U0350R | ||||
| Downward | ● | ● | D0350R | |||||
| PIP2 | Gq | CMV | Non-neuronal / whole cell | Green | Downward | ● | ● | D0450G |
| Red | ● | ● | D0450R | |||||
| Ca2+ | Gq | CMV | Non-neuronal / whole cell | Green | Upward | ● | ● | U0650G |
| Red | ● | ● | U0650R | |||||
| Cellular stress | Endoplasmic Reticulum (ER) and ER Unfolded Protein Response |
CMV | HEK293 cells (Adherent cells and iPSC-derived lines) |
Green Upword Cell Stress Sensor with constitutive red fluorescent protein for ratiometric measurement. | Upward | ● | ● | U0921G |
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製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。




