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三次元で細胞浸潤を測定するキット Oris 3D Embedded Cell Invasion Assay Kit

掲載日情報:2020/01/25 現在Webページ番号:64217

三次元 (3D) の細胞浸潤を測定するキットです。96ウェルプレートにはCollagen Ⅰがコートされており,中央部に専用ストッパー(Cell seeding stopper)がセットされています。

Oris 3D Embedded Cell Invasion Assay kitの箱

Oris 3D Embedded Cell Invasion Assay Kit

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特長

  • 96個の専用ストッパー(Oris Cell Seeding Stopper)が物理的障壁となって検出領域(細胞フリーゾーン)を確保するので,明確な細胞浸潤分析が可能です。
  • 細胞浸潤をリアルタイムまたはエンドポイントで測定できます。
  • キットに含まれるOris Detection Maskを使用することで,96ウェル中の検出領域のみに光を当てて測定することも可能です。
  • 96ウェルプレートに2×24個のOris Cell Seeding Stopper入りのスターターキット(#EIAST)のご用意もあります。
  • 96ウェル中の検出領域のみに光を当てることも可能です。

Oris detection Mask

Oris detection Maskのセット例

検出には,倒立顕微鏡,蛍光プレートリーダーまたはハイコンテント機器が別途必要です。

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操作方法概略

Oris 3D Embedded Cell Invasion Assay概略

  1. プレートの中央に専用ストッパー(Oris cell seeding stopper)をセットする。
  2. 中性コラーゲンⅠ溶液内に細胞を播種し,37℃でコラーゲンを重合する。
  3. ストッパーを取り除き,検出領域を作製する。
  4. コラーゲンⅠ溶液を加えて,37℃でコラーゲンを重合させる。
  5. 薬剤の含有・不含の培地を加え,37℃でインキュベートする。
  6. 検出領域内に浸潤した細胞を, 顕微鏡またはハイコンテント機器を用いて測定する。

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使用例

三次元細胞培養分布

ウェル中の DAPI 染色した細胞について,プレート底面の上部0~600μmの7焦点面のイメージングを取り込んだ。

三次元で細胞浸潤を測定するキットの使用例1
  • 左:「Image.」を用いて検出領域を決定し,各データポイント当たり4ウェルの明度閾値を用いて細胞数を計測。
  • 右:「Image.」による各高さにおける焦点細胞のイメージの再構成画像。


MMP阻害物質GM6001の細胞浸潤アッセイのにおける阻害作用の比較

HT1080細胞を用い,3Dでは5日後,2Dでは1日後に固定しそれぞれDAPIおよびTRITC-phalloidinで染色してイメージングを行った。3Dではそれぞれプレート底面から0~500μmを100μmおきに6階層の細胞数を計測し,2Dでは検出領域内の細胞の面積閉鎖率(%)を計測した。
3DではMMP阻害物質 GM6001によるHT1080細胞の細胞浸潤を阻害が確認できたが,2Dでは阻害しない

三次元で細胞浸潤を測定するキットの使用例2
  • :二次元 (2D,Oris Cell Migration Assay Kit)
  • :三次元 (3D,Oris 3D Embedded Assay Kit)


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キット内容

  • Oris collagen I coated, 96-well plate with Oris cell seeding stopper
  • Oris detection mask
  • Oris collagen Ⅰ(rat tail)
  • Oris stopper tool

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使用文献

  • X. Zhang, et al., "Actin cytoskeleton reorganization of hepatic stellate", Cell Adh. Migr.,13(1), 170~182 (2019). citation-pdf
  • L. Bertier, et al., "Downregulation of invadopodium formation", Biomed. Pharm., 102, 230~241 (2018). citation-pdf
  • P. Masuzzo, et al., "Analysis of high-throughput single-cell migration data", Sci. Reps.,,7(1),42383 (2017). citation-pdf

ASCBポスターダウンロード

下の画像をクリックすると,ASCBにおいて発表されたポスタの内容をご覧いただけます。

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価格

Oris 3D Embedded Cell Invasion Assay Kit

[在庫・価格 :2021年05月08日 00時13分現在]

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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