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全層皮膚の三次元培養スターターキット CELLnTEC社 3D FT Starter Kit

掲載日情報:2020/01/30 現在Webページ番号:63766

全層皮膚の三次元培養に開発された特殊培地と、初代ヒトケラチノサイト細胞、初代ヒト真皮線維芽細胞、培養用インサートなどがセットになったスターターキットです(#PRFT-CELLS-24au)。細胞を含まないキットもあります(#PRFT-24)。

付属の細胞はHIV-1、HBV、HCVが陰性であることを確認していますが、取り扱いには十分にご注意下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

全層皮膚の三次元培養スターターキットの使用例

FT Starter Kit with Cells (#PRFT-CELLS-24au) の使用例

3D FT Starter Kitを用いて皮膚の三次元培養モデルを作製した。
表皮と真皮の層が形成されていることが分かる。




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製品の種類

品名(キットコンポーネント)をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 3D FT Starter Kit
With Cells
3D FT Starter Kit
No Cells
キット内容 商品コード PRFT-CELLS-24au PRFT-24
Human Epidermal Leratinocyte Progenitor 1 vial HPEKp
Human Dermal Fibroblasts 1 vial HDFp
CnT-Prime Epithelial Culture Medium 500 ml CnT-PR
CnT-Prime Fibroblast Culture Medium 500 ml CnT-PR-Fau
CnT-Prime FTAL full thickness air-lift culture medium 500 ml CnT-PR-FTAL5
Spacer plate 12-well plates CnT-SP
FT insert 24 sheets

CELLnTEC社  3D FT Starter Kitのキット内容

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特長

  • 全層皮膚モデルを形成する場合、従来の方法では、真皮層形成のためI型コラーゲンゲルを用いていましたが、高コストや操作が煩雑という問題がありました。しかし、3D FT Starter Kitに含まれる新たなhigh-ECM培地を用いることにより、コラーゲンゲルを使用することなく全層皮膚モデルの形成が可能となります。線維芽細胞より分泌される皮膚基質は、天然の複合ECMタンパク質を形成します。
  • 迅速かつ再現性の高い培養が可能です。
  • キットにはin vitroにおいて、前駆細胞のニッチ環境を正確に再現した上皮細胞用の培地(#CnT-PR)、線維芽細胞用培地(#CnT-PR-Fau)、三次元培養用培地(#CnT-PR-FTAL5)が含まれています。

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操作方法概略

線維芽細胞(真皮層)の培養

  1. 線維芽細胞(凍結バイアル)を37℃で解凍後 CnT-PR-F培地で再懸濁し、培養皿へ播種する。6~24時間以内に培地交換を行い、残存するDMSOを完全に取り除く。
  2. 培地交換を週3回、継代を2回行う。
  3. 90%コンフルエントに達したら Accutase を用いて細胞を剥離する。
  4. FT insertに播種し、9~10日間培養する。培地交換は、週3回行う。

接着細胞の剥離や、組織から初代培養細胞を分離、分散させるのに適した試薬です。


ケラチノサイト培養、および FT insertへの播種

  1. 線維芽細胞をFT insertへ播種した日にケラチノサイト(凍結バイアル)を37℃で解凍後、CnT-PR培地で再懸濁し、培養皿へ播種する。6~24時間以内に培地交換を行い、残存していたDMSOを完全に除く。
  2. 5日間 CnT-PR培地で培養した後に継代し、さらに5日間培養する。培地交換は2~3日毎に行う。
  3. Accutaseを用いて剥離させ、CnT-PR-FTAL培地へ再懸濁する。
  4. 3.のケラチノサイト懸濁液を FT insertで培養している線維芽細胞の上へ播種し、CnT-PR-FTALを加える。
  5. インサート内側の液面と同じ高さになるようインサート外側へ CnT-PR-FTALを加えて、3日間培養する。
  6. ケラチノサイトをインサートへ播種後3日目に、滅菌したSpacer plateを12well plateへ設置する。
  7. 6.のプレートのwellへ FT incert(線維芽細胞、ケラチノサイト)を移し、インサート内メンブレンと同じ高さになるよう外側へCnT-PR-FTAL培地(約2ml)を加え、incert内メンブレンは空気に曝す。
  8. 12日間培養する。培地交換は、週3回行う。

wellが深い 12well plate(例:Greiner社製 #665110)をご利用の際には、設置する必要はありません。
詳細は、3D Keratinocyte Starter Kitプロトコル(PDF)をご覧下さい。

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関連製品

Spacer Plate

標準的な12-well培養プレート上にセットすることにより、well当たりの培地量を増量し、培地交換の頻度を減らすことができる、再利用が可能なプレートです。

Spacer Plate

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Air-lift培養における培地量と培地交換頻度

Air-lift培養では、各wellの培地量が重要となります。培地量が少ない場合には、週末を含めて頻繁な培地交換が必要となります。しかし、deep wellプレートはかなり割高で、また大容量(3~5 ml)の培地が必要となります。Spacer plateを用いることにより、標準的な12-well培養プレートの上部にセットするだけで簡便に培地量を増すことができ、また使用前にアルコールに浸漬殺菌することにより再利用が可能です。


■Spacer Plateの特長

  • 標準的な12-well培養プレートの上部にセットするだけで、ウェルに加えられる培地量を増加することができるため、週3回の培地交換でAir-lift培養が可能になります。
  • アルコールに浸漬殺菌することにより、再利用が可能です。

Accutase(Ready-to-useの細胞剥離液)

プロテアーゼとコラゲナーゼをブレンドしたReady-to-useの細胞剥離液です。無脊椎動物(カニ)由来で、哺乳類および細菌由来のタンパク質を含みません。トリプシンの直接の代替品として有用です。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
3D FT Starter Kit (no cells)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 再生医療研究細胞培養カタログ2017-2018 p.37
ニュース2022年8月合併号 p.18
ニュース2022年3月15日号 p.10

製品記事 上皮細胞用の増殖/維持/分化/共培養用培地
CELLnTEC社 ユニバーサル培地選択ガイド
三次元培養(3D culture)製品特集
関連記事 CELLnTEC社細胞培養についてのFAQ
皮膚科学研究用の細胞/培地/培地添加物(CELLnTEC社)
3D FT Starter Kit(with cells)(Aust Serum)
ご照会下さい ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
※受注発注品。
法規制等
保存条件 室温,-20℃,液体窒素中での保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年8月合併号 p.18
ニュース2022年3月15日号 p.10

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[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

3D FT Starter Kit (no cells)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 再生医療研究細胞培養カタログ2017-2018 p.37
ニュース2022年8月合併号 p.18
ニュース2022年3月15日号 p.10

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文献数: 0

説明文 ※受注発注品。
法規制等
保存条件 室温,-20℃,液体窒素中での保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年8月合併号 p.18
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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