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Human PD-1 Quantikine QuicKit ELISA Kit
ワンステップ、約90分でヒトPD-1を定量できるELISAキット Human PD-1 Quantikine QuicKit ELISA Kit
掲載日情報：2022/04/22 現在Webページ番号：70242
ヒト試料中のPD-1をサンドイッチ法により比色定量するELISAキットです。
捕捉用抗体と検出用抗体を混合し、抗体カクテルとして使用するワンステップのELISAで、わずか約90分で測定まで行えます。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
※ R&D SystemsのQuicKitシリーズの詳細については、
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標準曲線の例
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Human PD-1 ELISA Kitの標準曲線例
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Programmed Death-1（PD-1）とは
PD-1の発現と誘導
Programmed Death-1（PD-1）は、CD279としても知られ、広く研究されている免疫チェックポイント阻害物質のレセプターです。末梢の免疫寛容におけるPD-1の役割から、PD-1の発現の増加は免疫回避機構であり、それによりがんの増殖と転移が可能になると考えられます1,2。PD-1は、PDCD1遺伝子によってコードされています3。PD-1糖タンパク質は、免疫グロブリン（Ig）スーパーファミリーに属する単量体の50～55 kDaのⅠ型膜貫通タンパク質です4。PD-1は、CD4+およびCD8+ T細胞、B細胞、マクロファージ、一部の樹状細胞サブセット、NK細胞で発現し、T細胞レセプター（TCR）シグナル伝達、インターロイキン2（IL-2）、IL-7、1型インターフェロンによって誘導されます3, 5, 6。PD-1発現の誘導にホルボール12-ミリステート13アセテート、イオノマイシン、コンカナバリンA、CD3/CD28抗体などの様々な試薬が実験的に使用され、特にin vivoではリンパ球性脈絡髄膜炎ウイルスが使用されています6。
PD-1の翻訳後修飾と分解
PD-1の発現は、翻訳後も調節されます2。PD-1細胞外ドメインは、小胞体でアスパラギン（N）残基N49およびN72の部分でグリコシル化され、その後PD-1はゴルジ体に移行して同じ部位がコアフコシラーゼFUT8によってフコース化されます。脱フコース化されたPD-1の表面発現の減少によりT細胞が強力な抗がん反応を示すことから、この翻訳後修飾は、新しい治療標的となっています。PD-1は、リジン（K）残基K48の部分でE3リガーゼF-Box 38（FBX028）によってポリユビキチン化され2,7、プロテアソームを介して分解されます。
PD-1の作用
PD-1は、Programmed Death Ligand 1（PD-L1 / CD274 / B7-H1）および2（PD-L2 / CD273 / B7-DC）のレセプターとして機能します8,9。PD-1とPD-L1の細胞外ドメインの相互作用は、構造変化を誘導し、その結果、Srcファミリーキナーゼによる細胞質免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（ITIM）および免疫受容体チロシンベーススイッチモチーフ（ITSM）のリン酸化が起こります4。T細胞活性化シグナルを弱めるために、下流のシグナル伝達カスケードの脱リン酸化を介してチロシンホスファターゼ2（SHP-2）とSHP-1を含むSrc homology 2が動員されます。
参考文献
- Beatty, G.L. and Gladney, W.L., "Immune escape mechanisms as a guide for cancer immunotherapy", Clin. Cancer. Res., 21(4), 687～692 (2015). [PMID：25501578]
- Patsoukis, N., et al., "Revisiting the PD-1 pathway", Sci. Adv., 6(38), (2020). [PMID：32948597]
- Jubel, J.M., et al., "The Role of PD-1 in Acute and Chronic Infection", Front. Immunol., 11, 487 (2020). [PMID：32265932]
- Sun, C., et al., "Regulation and Function of the PD-L1 Checkpoint", Immunity., 48(3), 434～452 (2020). [PMID：29562194]
- Agata, Y., et al., "Expression of the PD-1 antigen on the surface of stimulated mouse T and B lymphocytes", Int. Immunol., 8(5), 765～772 (1996). [PMID：8671665]
- Bally, A.P.R., et al., "Genetic and Epigenetic Regulation of PD-1 Expression", J. Immunol., 196(6), 2431～2437 (2016). [PMID：26945088]
- Meng, X., et al., "FBXO38 mediates PD-1 ubiquitination and regulates anti-tumour immunity of T cells", Nature, 564(7734), 130～135 (2018). [PMID：30487606]
- Freeman, G.J., et al., "Engagement of the PD-1 immunoinhibitory receptor by a novel B7 family member leads to negative regulation of lymphocyte activation", J. Exp. Med., 192(7), 1027～1034 (2000). [PMID：11015443]
- Latchman, Y., et al., "PD-L2 is a second ligand for PD-1 and inhibits T cell activation", Nat. Immunol., 2(3), 261～268 (2001). [PMID：11224527]
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操作方法概略
キットに含まれるマイクロプレートはあらかじめ抗タグ抗体でコーティングされています。また、タグ標識済み捕捉用抗体とHRP標識検出用抗体を混合し、抗体カクテルとして使用します。試料（またはスタンダード、コントロール）をウェルに添加した後、続けて抗体カクテルを添加します。プレート上の抗タグ抗体とタグ標識済み捕捉用抗体が結合し、標的因子が抗体に捕捉されます。そこにHRP標識検出用抗体が結合してサンドイッチの構造となります。プレートを洗浄後、基質を添加して発色反応を行います。反応停止後にプレートリーダーで測定します。
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特長
- 測定原理：ELISA（サンドイッチ法）
- フォーマット：96 wellプレート
- 測定試料：血清、血漿（EDTA、ヘパリン処理）、細胞培養上清、細胞ライセート
- 測定方法：比色
- 測定波長：450 nm（補正波長540 nmまたは570 nm）
- 測定範囲：25～1,600 pg/ml
- 感度：4.59 pg/ml
- 測定時間：約90分間
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キット内容
- QuicKit coated microplate
- Human PD-1 standard
- Human PD-1 capture Ab concentrate
- Human PD-1 detection Ab concentrate
- Assay diluent RD1-54
- Calibrator diluent RDS-17
- Wash buffer concentrate
- Color reagent A/B
- Stop solution
- Plate sealer
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価格表
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
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Human PD-1 Quantikine QuicKit ELISA |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
Human PD-1 Quantikine QuicKit ELISA
文献数： 0
- 商品コード：QK1086
- メーカー：RSD
- 包装：1kit
- 価格：¥123,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
Human Quantikine QuicKit ELISA Kitシリーズ |
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R&D Systems Quantikine ELISA Kit／DuoSet Kit特集 |
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別売りコントロール
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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Human PD-1 Quantikine QuicKit Contol Group 296 |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
Human PD-1 Quantikine QuicKit Contol Group 296
文献数： 0
- 商品コード：QC296
- メーカー：RSD
- 包装：1set
- 価格：¥35,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
Human Quantikine QuicKit ELISA Kitシリーズ |
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