HOME> 試薬> 細胞情報伝達> ユビキチン化・SUMO化> ユビキチン化・SUMO化> Signal-Seeker SUMOylation 1 Detection Kit
HOME> 試薬> タンパク質/酵素> タンパク質解析> タンパク質の抽出・精製> Signal-Seeker SUMOylation 1 Detection Kit

SUMO1化されたタンパク質を効率的に濃縮するキット Signal-Seeker SUMOylation 1 Detection Kit

掲載日情報:2018/12/26 現在Webページ番号:68594

細胞/組織ライセートから、抗SUMO1抗体結合アフィニティービーズを用いてSUMO1(Small ubiquitin-like modifier-1)化されたタンパク質を効率的に濃縮し、ウエスタンブロッティングにより検出するキットです。キットには、分析に必要な溶解バッファー、阻害物質および高品質の抗体およびビーズなどの試薬が含まれています。

SUMO1化総タンパク質の免疫沈降による分析例

ウエスタンブロッティングの画像 #ASM11-Beads

BlastR lysis and filter systemを用いてHAP1細胞の野生株(WT)とSUMO1ノックアウト株(KO)から細胞ライセートを調製した。細胞ライセートをSignal-Seeker SUMO1アフィニティービーズ(#ASM11-Beads)、IP control beads (#CIG-03)、抗SUMO1抗体とプロテインGビーズの組み合わせ(Competitor A、B)および他社抗SUMO1抗体結合アフィニティービーズ(Competiror C)とインキュベートして免疫沈降を行った。それぞれで得られた試料をSDS-PAGE後にPVDF膜にトランスファーし、抗SUMO1抗体(#ASM01, ×5,000)、二次抗体としてMouse Trueblot ULTRA-HRP(Rockland社、×1,000)および5%ミルクを用いてウエスタンブロッティングを行った。#ASM11-Beadsを用いた場合、野生株(WT)では抗体の重鎖および軽鎖をほとんど含まないSUMO1化タンパク質を高感度で検出でき、SUMO1ノックアウト変異株(KO)ではSUMO1の生成が認められなかった。一方、抗SUMO1抗体とプロテインGビーズの組み合わせでは、WT、KOの場合(A、B)いずれも重鎖および軽鎖の混入が観察された。また他社アフィニティービーズを用いた場合(C)では重鎖、軽鎖の混入はほとんど見られなかったが、WTにおけるSUMO1化タンパク質の検出感度がSignal-Seeker SUMO1アフィニティービーズ(#ASM11-Beads)に比べて有意に劣ることがわかる。

免疫沈降(IP)の画像#ASM11-Beads

上の例と同様にSUMO1アフィニティービーズ(#ASM11-Beads)を用いて免疫沈降(IP)を行った。得られた試料中のSUMO1化タンパク質を抗SUMO1抗体(#ASM01、×5,000)および抗マウス二次抗体(×20,000)を用いて視覚化した。注目すべきは、アフィニティービーズではなく未修飾抗体を用いてIPを行った場合、重鎖と軽鎖の干渉によって30~64 kDa領域のSUMO1化タンパク質がマスクされることである。


この他の使用例については、こちらをご覧下さい。

目次に戻る

SUMOとは

SUMOとは (クリックで開閉します)

哺乳動物細胞においては、SUMO (Small ubiquitin-like modifier)ファミリーは4つのアイソフォーム(SUMO1~4)より成り、12 kDaの翻訳後修飾(PTM)タンパク質として機能します。SUMO2およびSUMO3はほぼ同一構造より成り、3つのアミノ酸残基のみが異なっています。SUMO1は、SMT3C、Sentrin、GMP1、UBL1およびPIC1としても知られ、SUMO2 / 3とは48%の同一性があります1。SUMO4はSUMO2 / 3とは約85%が同一であるものの、SUMO4が結合する基質については明らかになっていません2

タンパク質のSUMO化:SUMOylationは、標的タンパク質中の共通配列ΨKXE(ここで、Ψは疎水性アミノ酸を表し、Xは任意のアミノ酸を表す)内のアクセプターとなるリジン残基へ結合する翻訳後修飾(PTM:posttranslational modification)です。ユビキチン化と同様に、SUMO化はSUMOを標的基質に共有結合させるために3つの酵素系(E1、E2およびE3)を必要とします。共有結合したSUMOは、プロセスであるセントリン特異的プロテアーゼ(SENPs:sentrin-specific proteases )によって除去され、脱SUMO化と呼ばれます3

SUMO化は、非常に動的で可逆的なタンパク質翻訳後修飾で、標的タンパク質の活性、細胞内局在、安定性および機能を調節を通して主要な細胞経路のほぼすべての調節を担っています4。しかし、SUMO化は、ユビキチン化やアセチル化のような他のタンパク質翻訳後修飾に比べて最近に発見されたSUMOによるタンパク質修飾を研究するツールは十分に確立されていませんでした。Cytoskeleton社は、こうした背景をもとに内在性SUMO1を検出するための最初の包括的キットとして本製品を製品化しました。

参考文献

  1. Guo, C., et al., IUBMB Life, 66, 71~77 (2014).
  2. Owerbach, D., et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 337, 517~520 (2005).
  3. Yang, W., et al., Proteomics, 15, 1181~1191 (2015).
  4. Kira, B., et al., Cancer Lett., 316, 113~125 (2012).

目次に戻る

特長

  • 測定試料:細胞/組織ライセート
  • アッセイ数:10 assays(#BK165-S), 30 assays(#BK165)

目次に戻る

適用

  • 標的タンパク質の調節に関与するSUMO1化、および脱SUMO化酵素の薬理学的研究
  • 異なる成長因子・化合物による処理など様々な条件下におけるSUMO1化の研究
  • SUMO1化標的タンパク質とその下流のエフェクターとの相互作用の研究
  • 標的タンパク質のSUMO1化と他のタンパク質翻訳後修飾間のクロストークの研究

動画によるSignal-Seekerシリーズ適用ガイド

下の画像をクリックすると、Signal-Seekerシリーズの適用分野に関するガイドビデオをご覧いただけます。

目次に戻る

操作方法概略



目次に戻る

使用例

SUMO1修飾タンパク質の免疫沈降

HAP1野生型(WT)またはSUMO1ノックアウト(KO)細胞より、BlastR lysis and filter systemを用いて細胞ライセートを得た。各細胞ライセート 1 mgをSUMO1アフィニティービーズ(#ASM11-beads)、コントロールビーズ(#CIG03)、および抗SUMO1抗体とプロテインGビーズの組み合わせでそれぞれインキュベートして、SUMO1修飾タンパク質を濃縮した。得られた試料をSDS-PAGEにより分離し、PVDF膜にトランスファーした。一次抗体はすべてウサギポリクローナル抗体を用い、IP抗体由来の重鎖および軽鎖フラグメントに交差しないようにした。抗ウサギ-HRP標識二次抗体は、1:10,000で使用した。


ウエスタンブロッティングによるRanGAP1のSUMO1修飾状況の解析

ウエスタンブロッティングによるschmd1のSUMO1修飾状況の解析

目次に戻る

キット内容

キットコンポーネントのリンクをクリックすると、単品別売品の場合の価格表をご覧いただけます。リンクがないキットコンポーネントは、原則として単品でご購入することができません。


目次に戻る

動画によるSignal-Seekerシリーズ製品ガイド

下の画像をクリックすると、Signal-Seekerシリーズのガイドビデオをご覧いただけます。

目次に戻る

Signal-Seekerシリーズ製品ラインナップ

Signal-Seekerシリーズ製品ラインナップ (クリックで開閉します)

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 測定試料 商品コード 測定/処理回数 製品概要
Signal-Seeker
Ubiquitination Detection Kit
細胞
/組織ライセート
BK161-S 10 assays アフィニティービーズを用いてユビキチン化されたタンパク質を効率的に濃縮し、ウエスタンブロッティングにより検出するキット
BK161 30 assays
Signal-Seeker
SUMOylation 1 Detection Kit
細胞
/組織ライセート
BK165-S 10 assays アフィニティービーズを用いてSUMO1(Small ubiquitin-like modifier-1)化されたタンパク質を効率的に濃縮し、ウエスタンブロッティングにより検出するキット
BK165 30 assays
Signal-Seeker
SUMOylation 2/3 Detection Kit
細胞
/組織ライセート
BK162-S 10 assays アフィニティービーズを用いてSUMO-2/3(Small ubiquitin-like modifier-2/3)化されたタンパク質を効率的に濃縮し、ウエスタンブロッティングにより検出するキット
BK162 30 assays
Signal-Seeker
BlastR
Rapid Lysate Prep Kit
全細胞種 BLR01 50 preps 免疫沈降やSDS-PAGEにおいて問題となるゲノムDNAを含まない細胞ライセートを、独自の変性BlastRバッファーを使用することにより迅速かつ定量的に調製できるキット

目次に戻る

製品フライヤー

下の画像をクリックすると、本製品のフライヤーをダウンロードできます(PDFファイル)。



目次に戻る

価格

Segnal-Seeker SUMOylation 1 Detection Kit

[在庫・価格 :2024年03月29日 10時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Signal-Seeker SUMOylation-1 Detection Kit (10 assays)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年7月1日号 p.24
ニュース2021年7月1日号 p.14

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事
Signal-Seeker SUMOylation-1 Detection Kit (30 assays)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年7月1日号 p.24
ニュース2021年7月1日号 p.14

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事

[在庫・価格 :2024年03月29日 10時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

Signal-Seeker SUMOylation-1 Detection Kit (10 assays)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年7月1日号 p.24
ニュース2021年7月1日号 p.14

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事

Signal-Seeker SUMOylation-1 Detection Kit (30 assays)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年7月1日号 p.24
ニュース2021年7月1日号 p.14

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事


関連製品

[在庫・価格 :2024年03月29日 10時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
SUMOylation-1 Affinity Beads
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seekerシリーズ
関連記事
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody (Sample size)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 法規備考
抗原種 免疫動物 クラス 標識 Unlabeled
交差性 適用
クロナリティ フォーマット 性状 吸収処理
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 4℃,乾燥状態(デシケータ内)で保存 法規備考
抗原種 免疫動物 クラス 標識 Unlabeled
交差性 適用
クロナリティ フォーマット 性状 吸収処理
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事

[在庫・価格 :2024年03月29日 10時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

SUMOylation-1 Affinity Beads

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seekerシリーズ
関連記事

Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody (Sample size)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 法規備考
抗原種 免疫動物
交差性 適用
標識 Unlabeled 性状
吸収処理 クラス
クロナリティ フォーマット
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事

Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃,乾燥状態(デシケータ内)で保存 法規備考
抗原種 免疫動物
交差性 適用
標識 Unlabeled 性状
吸収処理 クラス
クロナリティ フォーマット
掲載カタログ

製品記事 Signal-Seeker Phosphotyrosine / SUMOylation /Ubiquitination Detection Kit
Signal-Seekerシリーズ
ユビキチン・プロテアソーム特集
関連記事

目次に戻る

お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。