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トランスフェクション試薬を使わずに細胞へ導入できるsiRNA Accell siRNA

掲載日情報:2019/10/29 現在Webページ番号:67901

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トランスフェクション試薬を使わずに細胞へ導入できるsiRNAです。Accell siRNAは,特殊な化学修飾が施されたヌクレオチドを用いており,Accell siRNA Delivery Mediaと混ぜて細胞を培養するだけで遺伝子発現をノックダウンできます。トランスフェクション試薬による細胞毒性を回避でき,配列デザインと化学修飾によりオフターゲット効果を最大限抑えているため,目的の遺伝子をより特異的にノックダウンします。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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次のような方におすすめです。

■トランスフェクションが上手くいかずお困りの方
従来,導入が難しかった初代培養細胞,神経細胞,免疫細胞などでも遺伝子発現のノックダウンができます。

■トランスフェクション試薬による細胞へのダメージにお困りの方
脂質系トランスフェクション試薬に由来する細胞毒性がないので,細胞へのダメージを抑えられます。

■ノックダウン期間を延ばしたい方
ヌクレアーゼに対する安定性を高める修飾がされているため,より長い期間のノックダウンが可能です。Accell siRNAを混ぜたDelivery Mediaでの培地交換を繰り返せば,細胞へのダメージを抑えつつ,更にノックダウン期間を延ばせます。


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導入事例集
DharmaconのCRISPR-Cas9ゲノム編集やsiRNA,RNAiライブラリーの導入事例を集めた1冊です。
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フライヤー

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使用例

小脳培養切片

小脳培養切片へのAccell siRNA導入
Accell siRNAの神経細胞への取り込みを確認するため,小脳の切片(厚さ250μm)を作成し,培養した。Accell Red Non-targeting siRNAと共に切片を3時間および72時間培養後,蛍光顕微鏡(Leica DM IRE2, filter TX2)により観察した。Accell siRNAの取り込みは,投与から3時間後に確認された。最も強い蛍光シグナルは,プルキンエ細胞および顆粒細胞層において観察された。72時間の培養により小脳切片における蛍光シグナルはより強くなったことから,培養時間の延長はAccell siRNA導入効率を上げることが分かった。なお,Accell delivery media にGibco B-27 Serum-free supplement(Thermo Fisher Scientific社)を添加することにより,Accell siRNAの取り込みが阻害されることなく細胞生存率が高まることを確認した。

小脳切片におけるターゲット遺伝子の発現抑制

小脳切片におけるターゲット遺伝子の発現抑制
P8マウスの新鮮な小脳切片(厚さ250μm)を,Cyclophilin Bをターゲットとする1μM のAccell siRNA (Accell PPIB;#D-001920-02)または1μMのAccell Non-targeting siRNA #1(NTC;#D-001910-01)と共に,Gibco B-27 serum-free supplement(Thermo Fisher Scientific社)を添加したAccell delivery media (#B-005000)中で培養した。Accell siRNA導入48・72・96時間後に切片をサンプリングし,小脳切片からRIPAバッファーを用いて細胞抽出液を調製した。サンプルあたり50μgのタンパク質を用いてウエスタンブロット解析を行った。

Accell siRNAの心筋細胞への導入と遺伝子サイレンシング

Accell siRNAの心筋細胞への導入と遺伝子サイレンシング
Accell GAPD Control siRNA(#D-001930-03),Accell GAPD Control Pool(#D-001930-30),Accell Green Non-targeting siRNA(#D-001950-01)を,neonatal rat ventricular myocyte(NRVM) mediaまたはAccell delivery mediaと共に用いて72時間インキュベートした後,mRNA発現量を調べた。

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操作方法概略

操作法概略

A Accell siRNAとAccell siRNA delivery mediaを混合する。
B 培地をAccell delivery mixに置き換えて,72時間培養する。

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特長

  • トランスフェクション試薬が不要のため,幅広い条件で使用可能(通常は細胞密度のみ検討)です。
  • 初代培養細胞,神経細胞,免疫細胞などさまざまな細胞へsiRNAを導入可能です。
  • 脂質系トランスフェクション試薬に由来する細胞毒性はありません。
  • デザイン済みsiRNAはご購入時にターゲット配列情報をご提供します。

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Accell siRNAで発現抑制が確認されている細胞

ARPE-19(human retinal epithelial cells)Bone marrow cells
BxPC3(pancreatic tumor cell lines)Bronchial smooth muscle cells(BSMC)
C1 tumor derived cellsCardiomyocytes
Caco-2(colon colorectal adenocarcinoma)CD4+ primary human T cells
E18(Rat cortical neurons)CD14+ primary monocytes
GH3(rat somatolactotrophs pituitary cell line)Cerebellar granule neurons(CGN)
H9 stem cell linesCortical neurons
HCT-116(colorectal carcinoma)Endometrial cells
HUVECEndothelial cells
JJN3(plasma cell leukemia)Extravillous trophoblasts(EVT)
MEC1(human chronic B cell leukemia)Hepatocytes
MN-1(mouse motor neuron)Immortalized B cells
MS1(mouse pancreatic islet endothelia cells)Keratinocytes
NOD CD4+ CD25- splenic cellsLymphocytes
OVCA 420 (ovarian carcinoma)Macrophages
PGA-1(lymphocyctic leukemia B cell line)Mantle cell lymphoma cells(MCL)
RAW264.7 macrophagesMonocytes
SHSY5Y(neuroblastoma)Mouse embryonic fibroblasts(MEF)
SNB19(glioma)Natural killer(NK)cell line
T47D(ductal breast epithelial tumor cell line)Neurons (primary rat)
T98(glioma)Oligodendrocyte precursors
THP-1 monocytesPancreatic tumor cell lines
U266(peripheral blood B lymphocyte myeloma)Peripheral blood mononuclear cells(PBMC)
U937(leukemic monocyte lymphoma)Vascular smooth muscle cells(VSMC)
β-islet cells


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製品フォーマット

Accell siRNA

品名 生物種 フォーマット 容量 製品概要
Accell Human
Mouse
Rat
SMARTpool 5,10,20,50 nmol SMARTpool
1つの遺伝子に対して配列デザインの異なる4種類のsiRNAを,Pool(混合物)として1本のチューブに入れた製品。
Set of 4 2×4,5×4,10×4 nmol Set of 4
1つの遺伝子に対して配列デザインの異なる4種類のsiRNAをそれぞれ個別のチューブに入れ,チューブ4本で1セットとした製品。
Set of 4 Upgrade 20×4 nmol Set of 4
Set of 4と同じ内容の製品です。同一のターゲット遺伝子に対するSMARTpoolを購入した方のための,価格を抑えたアップグレード用製品。
SMARTpool 購入時のご注文番号が必要です。詳しくはお問合せ下さい。
Individual siRNAs 2,5,10,20,50 nmol Individual
Set of 4で用いている4種類のsiRNAを,1種類(チューブ1本)ごとの個別とした製品です。


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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。容量によって商品コード中の末尾は異なり,下記のいずれかの数字が入ります。
2 nmol:0002
5 nmol:0005
10 nmol:0010
20 nmol:0020
50 nmol:0050

製品フォーマット 容量 生物種
Human Mouse Rat
SMARTpool 5,10,20,50 nmol E-HUMAN-XX- E-MOUSE-XX- E-RAT-XX-
Set of 4 2,5,10,20 nmol EQ-HUMAN-XX- EQ-MOUSE-XX- EQ-RAT-XX-
Set of 4 Upgrade 2,5,10,20 nmol EU-HUMAN-XX- EU-MOUSE-XX- EU-RAT-XX-
Individual siRNAs 2,5,10,20,50 nmol A-HUMAN-XX- A-MOUSE-XX- A-RAT-XX-

Horizon Discovery社のご注文Webサイト⇒ 「Accell siRNA」

AccellポジティブコントロールsiRNA

ヒト・マウス・ラットでノックダウン評価済みのsiRNAです。Accell siRNAは独自の化学修飾により,トランスフェクション試薬を使わずに細胞へ導入できるsiRNAです。RNAi実験の実験条件を検討する上で有用です。
品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。商品コード中の「X」には,Human=1,Mouse=2,Rat=3のいずれかの数字が入ります。

品名 製品概要 容量 商品コード
Accell Cyclophilin B Control siRNA Cyclophilin Bをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA 5 nmol D-001920-0X-05
20 nmol D-001920-0X-20
50 nmol D-001920-0X-50
Accell Cyclophilin B Control Pool Cyclophilin Bをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA混合物(Pool) 5 nmol D-001920-X0-05
20 nmol D-001920-X0-20
50 nmol D-001920-X0-50
Accell GAPD Control siRNA GAPDをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA 5 nmol D-001930-0X-05
20 nmol D-001920-0X-20
50 nmol D-001930-0X-50
Accell GAPD Control Pool GAPDをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA混合物(Pool) 5 nmol D-001930-X0-05
20 nmol D-001930-X0-20
50 nmol D-001920-X0-50
Accell Green Cyclophilin B Control siRNA Cyclophlin Bをターゲットとしたノックダウン評価済みの6-FAM蛍光標識siRNA(励起波長494 nm/蛍光波長520 nm) 5 nmol D-001970-0X-05
20 nmol D-001970-0X-20
50 nmol D-001970-0X-50
Accell Red Cyclophilin B Control siRNA Cyclophlin Bをターゲットとしたノックダウン評価済みのDY-547蛍光標識siRNA混合物(励起波長557 nm/蛍光波長570 nm) 5 nmol D-001975-0X-05
20 nmol D-001975-0X-20
50 nmol D-001975-0X-50
Accell eGFP Control siRNA eGFPをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA 5 nmol D-001940-01-05
20 nmol D-001940-01-20
50 nmol D-001940-01-50
Accell eGFP Control Pool eGFPをターゲットとし,ノックダウン確認済みのsiRNA混合物(Pool) 5 nmol D-001940-10-05
20 nmol D-001940-10-20
50 nmol D-001940-10-50

AccellネガティブコントロールsiRNA

ヒト・マウス・ラットの既知遺伝子配列と類似しない配列デザインのネガティブコントロールsiRNAです。RNAi実験におけるノックダウン効果のベースラインとして使用します。
品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。商品コード中の「X」には,Human=1,Mouse=2,Rat=3のいずれかの数字が入ります。

品名 製品概要 容量 商品コード
Accell Non-targeting siRNA #1~#4 ヒト・マウス・ラットの既知遺伝子配列と類似しない配列のsiRNA 5 nmol D-001910-0X-05
20 nmol D-001920-0X-20
50 nmol D-001910-0X-50
Accell Non-targeting Pool Accell Non-targeting siRNA #1~#4の混合物(Pool) 5 nmol D-001910-X0-05
20 nmol D-001910-X0-20
50 nmol D-001910-X0-50
Accell Green Non-targeting siRNA ヒト・マウス・ラットの既知遺伝子配列と類似しない配列デザインの6-FAM蛍光標識siRNA(励起波長494 nm/蛍光波長520 nm) 5 nmol D-001950-0X-05
20 nmol D-001950-0X-20
50 nmol D-001950-0X-50
Accell Red Non-targeting siRNA ヒト・マウス・ラットの既知遺伝子配列と類似しない配列デザインのDY-547蛍光標識siRNA(励起波長557 nm/蛍光波長570 nm) 5 nmol D-001960-0X-05
20 nmol D-001960-0X-20
50 nmol D-001960-0X-50

Accell Control siRNA Kit

Accell siRNAの評価に便利な試薬(下記)をパッケージにしたキットです。
品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

■キット内容

  • ポジティブコントロール(2種:Cyclophilin B Control siRNA,GAPD Control siRNA)(5 nmol)
  • ネガティブコントロール(2種:Non-targeting siRNA #1,Green or Red Accell Non-Targeting siRNA)(5 nmol)
  • 5× siRNA buffer(1.5 ml)
  • Accell siRNA delivery media(100 ml)
品名生物種商品コード
Accell Control siRNA Kits (Green) Human K-005000-G1-01
Mouse K-005000-G1-02
Rat K-005000-G1-03
Accell Control siRNA Kits (Red) Human K-005000-R1-01
Mouse K-005000-R1-02
Rat K-005000-R1-03


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Accell siRNA 専用培地:Accell siRNA Delivery Media

Accell siRNAの細胞導入に必要な無血清専用培地です。Accell siRNAを混ぜたDelivery Mediaでの培地交換を繰り返せば,細胞へのダメージを抑えつつ,ノックダウン期間を延ばせます。
品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名容量商品コード
Accell siRNA Delivery Media 100 ml B-005000-100
500 ml B-005000-500

[在庫・価格 :2020年07月11日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Accell siRNA Delivery Media
ご照会下さい 0
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法規制等
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法規制等
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※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

Accell siRNA Delivery Media

文献数:0

  • 商品コード:B-005000-100
  • メーカー:DHA
  • 包装:100ml
  • 価格:¥3,100
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

説明文
法規制等
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文献数:0

  • 商品コード:B-005000-500
  • メーカー:DHA
  • 包装:500ml
  • 価格:¥7,100
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:ご照会下さい
  • 法規制等:

説明文
法規制等
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