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病態モデルの作製にもおすすめ Active Human Recombinant Tau Mutant Protein

掲載日情報:2023/04/06 現在Webページ番号:67047

StressMarq Biosciences社ではタウ リコンビナント タンパク質(Tau Recombinant Protein)の全長、断片ともに、Monomer(単量体)およびPFF体(Pre-formed fibril)を取り扱っています。
アルツハイマー病などの神経変性疾患や、細胞シグナル伝達などの研究に有用です。
その他の神経科学(Neuroscience)製品については「神経科学(Neuroscience)研究用 抗体/タンパク質」をご覧下さい。
Tauとα-Synucleinから成るCo-Polymer Fibril(Mixed Fibril / PFF)についてはこちらをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


Active Human Recombinant Tau Mutant Proteinイメージ

タウ(Tau)とは

タウ タンパク質は主に神経細胞の軸索に局在し、ニューロン内の微小管の細胞骨格を安定化する機能をもちます。タウオパチーとよばれる神経変性疾患では、タウは微小管から離れ、神経原線維変化(NFT:neurofibrillary tangle)と呼ばれる不溶性の凝集体を脳内で形成します。

タウ タンパク質はヒトの17番染色体上にあるMAPT遺伝子によってコードされています。また、成人におけるタウには選択的スプライシングによる6種類のアイソフォームがあり、微小管結合部分(MBD: microtubule binding domain)に繰り返し配列を4つもつ4R型が3種類、繰り返し配列を3つもつ3R型が3種類あります。

タウ タンパク質の301番目のプロリンの変異によって機能が変化することも明らかになっています。これはエクソン10に位置し、4R型のアイソフォームにのみ存在します。ロイシンへの変異(P301L)ではβシート形成と2つのフィラメントのらせん(PHF:Paired helical filament)化を促進し、セリンへの変異(P301S)では微小管への結合能が欠損することが明らかになっています。

タウの病変へのメカニズムとして提唱されている説の一つに、プリオン様増殖(prion-like propagation:タンパク質がミスフォールドされた状態で伝播してしまうこと)があります。その仮説を裏付ける先行研究に、PFF体(Pre-formed fibril、既形成原線維)のタウ タンパク質は、培養細胞および生体内でタウモノマーを凝集しNFT化を促進するという報告があります1, 2。また、断片型であるK18(MBD4R部分のみの配列を持つタウペプチド)も、凝集効果は低いものの、マウスにおける完全長タウとの同時発現では、可逆的な凝集を誘導するとの研究も報告されています3, 4

タウオパチーのメカニズム
タウオパチーのメカニズム:微小管との結合を維持できないタウタンパク質が凝集し、NFTを形成する

参考文献
  1. Iba, M., et al., J. Neurosci., 33(3): 1024-1037 (2013).
  2. Hyman, B. Neuron, 82(6), 1189-1190 (2014).
  3. Guo, J. L., and Lee, V. M. FEBS Letters, 587(6), 717-723 (2013).
  4. Ozcelik, S.,et al., Mol. Psychiatry, 21(12), 1790-1798 (2016).


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特長

  • タウ全長で4回繰り返し配列を有する2N4R型と3回の繰り返し配列を有するON3R型、微小管結合ドメイン(MBD)4回繰り返し配列のみの断片であるK18型、および断片dGAE(a.a. 297-391)の4種類のアイソフォームの製品があります。
  • 2N4R型はP301S、K18型はP301L、dGAEにはC322Aのアミノ酸置換された変異体のラインナップがあります。
  • 単量体と、PFF体、フィラメント(#SPR-463)があります。
  • PHF化促進能の検討を、チオフラビンT(Thioflavin T:以下Tft)を用いて行っています(下図参照)。
  • 動物種:ヒトまたはマウス
  • 発現系:E. coli、またはBaculovirus
  • タグ標識:なし
  • 精製方法:イオン交換
  • 適用実験*1:ウエスタンブロッティング、SDS-PAGE、in vivo assay, in vitro assay

*1 製品により異なります。

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タウ タンパク質の製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

タンパク質名 動物種 配列 産生 商品コード
Monomer PFF Filaments
Tau 0N3R (Fetal) Human 全長(a.a. 1~352) E. coli SPR-490 SPR-491
Tau 2N4R Human 全長(a.a. 1~441) E. coli SPR-479 SPR-480
Baculovirus SPR-496 SPR-498
Tau 2N4R, P301S Human 全長(a.a. 1~441) E. coli SPR-327 SPR-329*2 SPR-463
Baculovirus SPR-473 SPR-471
Mouse 全長(a.a. 1~430) E. coli SPR-474 SPR-475
Tau dGAE Human 部分長(a.a. 297~391) E. coli SPR-444 SPR-461
Tau dGAE (AD-mim) Human 部分長(a.a. 297~391) E. coli SPR-501 SPR-502
Tau dGAE, C322A Human 部分長(a.a. 297~391) E. coli SPR-445 SPR-462
Tau K18, K280 Deletion Human 部分長(MBD領域) E. coli SPR-476 SPR-477
Tau K18, P301L Human 部分長(MBD領域) E. coli SPR-328 SPR-330
*2 ATTO 488が標識された製品もあります(#SPR-329B-A488)。

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使用例

SDS-PAGE例

品名 Active Human Recombinant Tau Protein
商品コード SPR-327 SPR-328 SPR-329 SPR-330
アイソフォーム 2N4R型 K18型 2N4R型 K18型
配列 全長 部分長(MBD領域) 全長 部分長(MBD領域)
構造 Monomer
Monomerイメージ
PFF
PFFイメージ
変異型 P301S P301L P301S P301L
分子量 ~45.8 kDa ~15.1 kDa ~45.8 kDa ~15.1 kDa
SDS-PAGE #SPR-327のSDS-PAGE画像 #SPR-328のSDS-PAGE画像 #SPR-329のSDS-PAGE画像 #SPR-330のSDS-PAGE画像

タウらせん(PHF)化の確認

Thioflavin Tとβシートの結合の蛍光検出結果

タウらせん(PHF)化の確認

Thioflavin T(Tft)は、βシートに富む構造に結合する蛍光色素(励起波長450 nm/蛍光波長485 nm)で、結合すると蛍光強度が増加する。
ヒトタウPFF体(#SPR-329または#SPR-330)存在下で、ヒトタウ単量体(#SPR-327)から凝集体形成が促進されたことが分かる(紺色から水色・黄橙色に変化)。

ThioFlavin T Assay のプロトコールは、StressMarq Biosciences社Webページの「Protocol for ThioFlavin T Assay」をご確認下さい。

PFF体の電子顕微鏡(TEM)像

PPF体は、タウ単量体がフィブリル化したものです。モノマーとフィブリルには、完全長(2N4R/Tau441)と断片型(4R/K18、dGAE)があり、どちらのタイプのPFFもタウの凝集を誘導します。タウの線維化には ヘパリンや線状のアニオン性足場を用います。いくつかの種類(dGAE WT、C322A、K18 ΔK280)は足場なしで線維化できます。

P301L K18 PFFs (#SPR-330)

Recombinant Tau441 (2N4R), P301S mutant(#SPR-329)のTEM像(左図)

non-Tg Mouse

Recombinant Tau (K18), P301L mutant PFF(#SPR-330)のTEM像(右図)


in vivoでの封入体形成

P301L K18 PFFs (#SPR-330)

試料:P301Lマウスの海馬
P301L K18 PFFs(#SPR-330)を投与。

non-Tg Mouse

試料:P301Lマウスの海馬
non-Tgマウスの脳幹ホモジネートを投与。


P301L K18 PFFs(#SPR-330)を投与したP301Lマウスの海馬(左図)と、non-Tgマウスの脳幹ホモジネート(BSH)を投与したP301Lマウスの海馬(右図)のIHC分析を行った。
PFF体(#SPR-330)を投与したマウス(左図)では、神経原線維様の封入体が確認できた(矢印)が、コントロール(右図)では見られなかった。


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動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Monomer
Genbank No: 4137
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構造:Monomer,由来:Human,産生:Baculovirus,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
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構造:Monomer,由来:Mouse,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
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Tau441(2N4R), Active, P301S Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant

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説明文 動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Monomer
Genbank No: 4137
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Tau-430(2N4R) P290S Mutant, Mouse, Recombinant Protein, Monomer(Human P301S Equivalent)

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2N4R P301S型 PFF

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動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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Tau441(2N4R), Active, P301S Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant, ATTO 488
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構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,純度:>95%
別名:PFF
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Tau441(2N4R), Active, P301S Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant
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構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:Baculovirus,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
別名:PFF
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構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Mouse,産生:E. coli,M.W.:~45 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
別名:PFF
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Tau441(2N4R), Active, P301S Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant

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説明文 動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs)
別名:PFF
Genbank No: 4137
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Protein Accession No: P10636
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Tau441(2N4R), Active, P301S Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant, ATTO 488

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説明文 構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,純度:>95%
別名:PFF
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説明文 構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:Baculovirus,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
別名:PFF
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別名:PFF
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由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Filaments ,M.W.:45.84 kDa,タグ:No tag
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由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),M.W.:10.165 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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掲載カタログ ニュース2023年8月合併号 p.45
ニュース2022年6月15日号 p.42

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Tau Fragment(dGAE), Active, Protein Monomer, Human, Recombinant

文献数: 1

説明文 由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Monomer,M.W.:10.165 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE)
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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掲載カタログ ニュース2023年8月合併号 p.44
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Tau Fragment(dGAE), Active, PFFs, Human, Recombinant

文献数: 1

説明文 由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),M.W.:10.165 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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dGAE C322A型

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Tau Fragment(dGAE), Active, C322A Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant
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由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Monomer,M.W.:10.133 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE, C322A mutant)
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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Tau Fragment(dGAE), Active, C322A Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant
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由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),M.W.:10.133 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE,C322A mutant)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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Tau Fragment(dGAE), Active, C322A Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant

文献数: 0

説明文 由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Monomer,M.W.:10.133 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE, C322A mutant)
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
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Tau Fragment(dGAE), Active, C322A Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant

文献数: 0

説明文 由来:Human,産生:E. coli,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),M.W.:10.133 kDa,タグ:No tag,Fragment領域:AA297-391 (dGAE,C322A mutant)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Gene Accession No: NP_005901.2
Protein Accession No: P10636
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K18 ΔK280型

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Tau(K18), Active, delta K280 Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant
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構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~15 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
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Tau(K18), Active, delta K280 Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant
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構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~15 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
別名:PFF
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Tau(K18), Active, delta K280 Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant

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説明文 構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~15 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
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Tau(K18), Active, delta K280 Mutant Protein PFFs, Human, Recombinant

文献数: 0

説明文 構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs),由来:Human,産生:E. coli,M.W.:~15 kDa,タグ:No tag,純度:>95%
別名:PFF
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K18 P301L型

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Tau(K18), Active, P301L Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant
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動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Monomer
Genbank No: 4137
Protein Accession No: P10636
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Tau(K18), Active, P301L Mutant PFFs, Human, Recombinant
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~15.1 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Protein Accession No: P10636
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Tau(K18), Active, P301L Mutant Protein Monomer, Human, Recombinant

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説明文 動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~45.8 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Monomer
Genbank No: 4137
Protein Accession No: P10636
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Tau(K18), Active, P301L Mutant PFFs, Human, Recombinant

文献数: 0

説明文 動物種:Human,産生:E. coli,M.W.:~15.1 kDa,タグ:No tag,由来:Human,純度:>95%,構造:Protein Preformed Fibrils (PFFs)
別名:PFF
Genbank No: 4137
Protein Accession No: P10636
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