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次世代シークエンシング用のDNAライブラリーを作製するキット EpiNext DNA Library Preparation Kit for Illumina

掲載日情報:2014/06/05 現在Webページ番号:9034

あらかじめ断片化したdsDNAを試料とし、次世代シークエンシング用のDNAライブラリーを作製するキットです。作製したライブラリーはIllumina社の次世代シークエンサーによるgenomic DNA-seq、ChIP-seq、MeDIP / hMeDIP-seq、targeted re-sequencingなどに使用できます。より少量のDNAからライブラリーを作製できるHigh-Sensitivity Kit(#P-1053)もあります。

解析にはIllumina社の次世代シークエンサーが必要です。

特長

  • 試料として、細胞・組織由来の断片化dsDNAや、ChIP反応、MeDIP / hMeDIP反応、exon captureで得られたdsDNAを用います*1
  • 断片化したdsDNAを試料とし、末端の平滑化とdA tailを付加します。その後アダプターをライゲーションし、DNAフラグメントのサイズ分画と精製を行って、PCRにより増幅します。
  • High-Sensitivity Kit(#P-1053)は、平滑末端化とdA tailの付加をワンステップで行えます(End Polishing)。より少量のDNA試料(0.2 ng)からライブラリーを構築できます。
  • キットには、Illumina社の次世代シークエンサー解析用アダプターが含まれており、バーコード配列を含まないライブラリー(Singleplexed)と含むライブラリー(Multiplexed)のいずれも構築可能です。
  • DNAフラグメントのサイズ分画、精製はMQ beadsを用いるため、試料のロスがなく、迅速に操作できます。
  • 試料量:
    5 ng~1 μg DNA(最適量:100~200 ng)(#P-1051)*2
    0.2~100 ng(最適量:10~50 ng)(High-Sensitivity Kit:#P-1053)

*1dsDNAはあらかじめ断片化する必要があります。次世代シークエンシング用のクロマチン/DNAせん断などの幅広い用途に使用できる破砕装置「EpiSonic Multi-Functional Bioprocessor 1100」をお勧めします。

*2サイズ分画後、PCRによる増幅を行わない場合は、出発材料として500 ng 以上のDNAが必要です。

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操作方法概略

■EpiNext DNA Library Preparation Kit (#P-1051)

EpiNext DNA Library Preparation Kit(#P-1051)の操作方法概略

■EpiNext High-Sensitivity DNA Library Preparation Kit (#P-1053)

EpiNext High-Sensitivity DNA Library Preparation Kit (#P-1053)の操作方法概略

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キット内容

■キット共通

  • Ligation buffer
  • T4 DNA ligase
  • Adaptors
  • MQ binding beads
  • HiFi PCR master mix
  • Primer U / I
  • Elution buffer

■#P-1051のみ

  • End repair buffer
  • End repair enzyme mix
  • dA-tailing buffer
  • Klenow fragment (3'→5' exo)

■#P-1053(High-Sensitivity Kit)のみ

  • End polishing buffer
  • End polishing enzyme mix
  • End polishing enhancer

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価格

[在庫・価格 :2024年04月27日 11時35分現在]

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(テクニカルサポート 試薬担当)

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