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新規高機能プロテインAクロマトグラフィー用担体 KANEKA KanCapA™

掲載日情報:2020/09/17 現在Webページ番号:8458

分子デザインにより改変したFc領域に特異的に結合する新規プロテインAクロマトグラフィー用のセルロース担体です。 優れたアルカリ耐性を有し,抗体の動的結合容量が高い値を示します。バイオ医薬品の研究開発に有用です。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

KanCapA™ Ligandについて

 天然型のProteinA のC末端ドメインは,抗体のFc領域だけでなく,Fab領域にも結合します。Protein Aが抗体のFc領域とFab領域の両方に結合している場合,抗体を溶出するには,酸性度の高い溶液が必要となります。KanCapA™は,変異したProtein AのCドメインを五量体化させたタンパク質で,高アルカリ耐性を有し,Fab(Fragment Antigen Binding)への結合能が減少しています。そのためマイルドな条件での抗体の溶出が可能となります。

天然型Protein AとKanCapA™の違い

天然型Protein AとKanCapA™の違い



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KANEKA KanCap™シリーズ

品名をクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。

品名 KANEKA KanCap™シリーズ
KANEKA KanCapA™ 3G KANEKA KanCapA™ KANEKA KanCap™G KANEKA KanCap™L
担体タイプ 改変型Protein A
(高純度・高収率タイプ)
改変型Protein A
(標準タイプ)
改変型Protein G 改変型Protein L


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KANEKA KanCap™製品タイプ

製品タイプ プレパックカラム RoboColumn Handy Column バルクレジン
仕様 KanCap™を充填したアフィニティ精製用カラム 精製用カラムを8個並べたタイプ 少容量精製用カラム 担体のみのタイプ
プレパックカラム
1 ml:8 mm I.D.×20 mmH
5 ml:8 mm I.D.×100 mmH
RoboColumn Handy Column
1 ml:7 mm I.D.×25 mmH
5 ml:16 mm I.D.×25 mmH
バルクレジン


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特長

  • アルカリ耐性が高く(図1),繰り返し洗浄できます。しかもProtein Aが剥離がありません。
  • マイルドなpH条件で抗体を溶出できます(図2)。
  • 抗体の動的結合容量が高い値を示します(図3)。
  • 速い流量での操作が可能で,スケールアップも容易です(図4)。

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充填カラムの評価例

KANAKA KanCapAのアルカリ性洗浄の繰り返し試験

図1:Life cycle study 0.1 Mまたは0.5 MのNaOHでアルカリ性洗浄の繰り返し試験(左図)。0.1 M水酸化ナトリウムで繰り返し試験を行ったときの収率およびProtein Aの浸出(右図)接触時間:15分,検出限界未満(1 ppm未満)のリガンド浸出は1 ppとしてプロット。


KANAKA KanCapAの溶出プロファイルの比較

図2:溶出プロファイルの比較 5 mg/mlのレジンに IgG をロード。 溶出条件:pH 3.5 または 3.0,Strip solution:1 M Acetic acid. KanCapA™は, Fab結合部位がないため,狭いpH範囲でMabのすべてのタイプ(Mab A,Mab B,IgG)を溶出することができます。


KANAKA KanCapAの動的結合容量

図3: 動的結合容量の滞留時間依存性KanCapA™は4~6分の滞留時間で高い動的結合容量を示す。


KANAKA KanCapAの圧力/流速の関係充填床の圧力

図4:様々なサイズのカラムにKanCapA™を充填したときの圧力/流速の関係充填床の圧力は,全圧からシステム圧力を差し引くことによって計算した。


表1 充填カラムの充填効率の評価(1%アセトンのパルスインジェクション)

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仕様

Packing methodI.D. (cm)Height (mm)Plates/mAsymmetry
Flow packing4.42005,7101.14
Axial compression71996,0631.06
Flow packing102015,2761.18
Flow packing302005,2081.17
Axial compression452334,7121.09

測定条件

  • 試料:1%(v/v)アセトン
  • インジェクションボリューム:カラム容量の1%
  • 流速:60 cm/h

図4および表1は,充填カラムの圧力/流量特性および充填効率を示す(内径4.4~45 cm,高さ20 cm)。 10%グリセロール溶液を細胞培養溶液の代わりとしてシミュレートした結果,合理的な圧力上昇を示した。 KanCap™を充填したカラムは,優れた圧力/流量特性を示す。


マトリックス高架橋セルロース

平均粒径*1

65~85 μm
リガンド改変型Protein A(アルカリ耐性)
結合還元的アミノ化

動的結合容量*2

≧35 mg (human polyclonal IgG/ml packed resin)
安定性アフィニティクロマトグラフィー汎用試薬で安定
pH範囲pH2~13
洗浄条件0.1~0.5 M 水酸化ナトリウム
流速≦100 cm/h (1 mlカラム), ≦500 cm/h (5 mlカラム,バルクレジン)
滞留時間≧3 min(推奨:4~6 min)

保存条件*3

20%エタノールの懸濁液の状態で1~10℃で保存

*1 平均粒径は,累積体積分布の中間粒径です。*2 5%動的結合容量は,前端分析(滞留時間3分)で測定しています。*3 凍結禁止

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価格

バルクレジンタイプ

[在庫・価格 :2021年04月23日 10時51分現在]

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新規高性能プロテインAクロマトグラフィー担体。
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KANEKA KanCapA

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1 mlカラムプレパックタイプ

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KANEKA KanCapA RoboColumn 600ul

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KANEKA KanCapA Handy Column 1mL
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KANEKA KanCapA Handy Column 5mL
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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