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鉄の還元反応を利用した抗酸化物質定量用キット DetectX FRAP Colorimetric Detection Kit

掲載日情報:2020/10/26 現在Webページ番号:7770

鉄の還元反応を利用して、試料中に含まれる抗酸化物質を比色により定量するキットです。

検量線例

の検量線例

塩化第一鉄(FeCl2)の検量線例

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活性酸素種(ROS、Reactive Oxygen Species)とフリーラジカル

概要

活性酸素種(ROS、Reactive Oxygen Species)1,2は、通常の有酸素代謝の結果として産生されます3。これらの「フリーラジカル」は、通常、一連の抗酸化物質によって生体内で除去または他の物質に変換されます。抗酸化物質は、通常化学的に安定した原子および分子であり、電子エンベロープ内に1つ(または、まれにそれ以上の数)の自由電子/電子があります。ほとんどすべての生体分子(主に生体膜、タンパク質、および核酸)は、反応性フリーラジカルによって攻撃を受ける可能性があります。フリーラジカルは、多くの病理学的プロセスの原因または病理学的段階の結果として産生され、生物学的システムと細胞に重大な二次的損傷を引き起こすことがあります1~5

疾病との関連

フリーラジカルは、パーキンソン病やアルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、慢性疲労症候群などのいくつかの重篤な疾患との関連性が証明されています。しかし、短期間の酸化ストレス、つまり活性酸素種の形成と除去の間の不均衡は、ミトホルミシス(Mitohormesis)として知られるプロセスで起こる老化の予防に重要である可能性があります。平均して、人口の65~70%は、フリーラジカルにより起こる酸化ストレスの影響を過度に受けています。生物の防御システムは、特定の酵素(特にスーパーオキシドジスムターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、カタラーゼ、グルタチオンレダクターゼ)、および抗酸化作用のある非酵素化合物(β-トコフェロール、L-アスコルビン酸, グルタチオン、コエンザイムQ10、フラボノイド、アルブミン、その他の分子)に基づいています。また、活性酸素種の過剰産生は、炎症、早期老化障害、およびがん、糖尿病、アテローム性動脈硬化症を含むいくつかの病状につながる可能性があります。生物は、酸化ストレスから身を守るために複雑な抗酸化システムを開発しましたが、過剰なROSはそのシステムを圧倒し、なおも深刻な損傷を引き起こす可能性があります。

抗酸化力の測定

1996年、IrisBenzieとSeanStrainは、抗酸化力を測定するための簡単なアッセイを発表しました6。当初この測定方法は、血清および血漿中の抗酸化能を測定するためのアッセイとして示されましたが、特定の食品7、茶8、および真菌の抗酸化力にまで拡張されました。

参考文献

  1. Halliwell, B., "Free radicals and antioxidants: a personal view.", Nutr. Rev., 53, 253~265 (1994).
  2. Gutteridge, JMC., "Biological origin of free radicals, and mechanisms of antioxidant protection.", Chem.-Biol. Interact., 91, 133~140 (1994).
  3. Gutteridge, JMC., "Lipid Peroxidation and Antioxidants as Biomarkers of Tissue Damage.", Clin. Chem., 18, 125~126 (1995).
  4. Frei, B, Stocker, R, and Ames, BM., "Antioxidant defenses and lipid peroxidation in human blood plasma.", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 9748~9752 (1988).
  5. Frei, B, England, L, and Ames, BN., "Ascorbate is an outstanding antioxidant in human blood plasma Ascorbate is an outstanding antioxidant in human blood plasma.", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86, 6377~6381 (1989).
  6. Benzie, IFF., and Strain, JJ., "The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as a Measure of Antioxidant Power: The FRAP Assay.", Anal. Biochem, 239, 70~76 (1996).
  7. Szeto, YT., Tomlinson, B., and Benzie IFF., "Total antioxidant and ascorbic acid content of fresh fruitsand vegetables: implications for dietary planning and food preservation.", Br. J. Nutr., 87, 55~59 (2002).
  8. Benzie, IFF., and Szeto, YT., "Total Antioxidant Capacity of Teas by the Ferric Reducing/Antioxidant Power Assay.", J. Agric. Food Chem., 47, 633~636 (1999).

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測定原理

本製品は、すべての種の抗酸化能力を測定します。室温下で、試料にキットに含まれるFRAP(FRAP reagent A+B)を加え30分間インキュベートすると、抗酸化力に対応して塩化第一鉄(FeCl2)が生成し、その濃度に応じて青色の発色性物質(OD 560nm)を生成します。

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特長

  • 測定試料:血清、血漿(EDTA、ヘパリン処理)、尿、食品抽出物、細胞ライセートなど
  • フォーマット:2×96 well plate
  • 測定方法:比色
  • 測定波長:560 nm
  • 測定時間:約30分
  • 測定範囲:31.25~1,000μM
  • 感度:8.06μM
  • 検出限界:5.91μM
  • オンラインツール(MyAssays)のテンプレートへ測定結果を入力することで、濃度計算が簡単に行えます。*

* MyAssays

MyAssays

プレートリーダーで測定した生データをコピー&ペーストし、さらにプレートにおける試料のレイアウトや実験条件、標準試料濃度や希釈率などの数値を入力することで、未知試料の濃度を迅速に求められる便利なツールです。Arbor Assays社では、それぞれのアッセイキットに対応したMyAssayを提供しています。ご利用は無料ですが、最初にメンバー登録が必要です。該当WEBページは右図をクリックして下さい。

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キット内容

  • Clear half area 96 well plate(2 plates)
  • Ferrous chloride standard
  • Assay buffer concentrate
  • Ascorbic acid control
  • FRAP reagent A / B

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Arbor Assays社アッセイキットデモビデオ

右のバナーをクリックすると、Arbor Assays社アッセイキットを使用する上での様々なヒントを解説しているビデオをご覧いただけます。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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納期 文献数
FRAP, Ferric Reducing Antioxidant Power, Detection Kit(2Plates)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 22
説明文
抗酸化物質の定量キット。測定範囲:31.25 -1000 UM,検出方法:呈色,感度:8.06 uM,測定試料:Serum, plasma, Urine, Teas, Fruit juices, Beer, Cider, cell Lysates, Herbal, fruit extracts,種交差性:全種,必要試料量:20 uL,測定波長:560 nm,アッセイ数:2x96 well plate,総インキュベーション時間:30 min @ RT,アッセイ法:Detection,測定因子:FRAP™
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ

製品記事 DetectX アッセイキットシリーズ(Arbor Assays社)
DetectX Stress Assay Kitシリーズ
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FRAP, Ferric Reducing Antioxidant Power, Detection Kit(2Plates)

文献数: 22

説明文 抗酸化物質の定量キット。測定範囲:31.25 -1000 UM,検出方法:呈色,感度:8.06 uM,測定試料:Serum, plasma, Urine, Teas, Fruit juices, Beer, Cider, cell Lysates, Herbal, fruit extracts,種交差性:全種,必要試料量:20 uL,測定波長:560 nm,アッセイ数:2x96 well plate,総インキュベーション時間:30 min @ RT,アッセイ法:Detection,測定因子:FRAP™
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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