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PCR阻害物質の影響を受けにくいPCRマスターミックス AccuStartⅡ PCR ToughMix
掲載日情報：2025/08/20 現在Webページ番号：72759
環境試料や動植物組織などに由来するPCR阻害物質を含むDNA試料から増幅を行える2×のPCRマスターミックスです。
※ TaqManなどの蛍光プローブ法に最適な定量的PCR（qPCR）用マスターミックスについてはこちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
ポリフェノールへの耐性
ポリフェノールを豊富に含有する植物抽出物を添加（左から0.2、0.06、0.02、0.006、0.002 μl）した25 μlの反応液において、1×104コピーのテトラサイクリン耐性遺伝子をテンプレートとして1 kbのPCR産物を推奨プロトコルに従って増幅した。PCR条件は、94℃で3分間の活性化後、94℃、15秒；60℃、20秒；72℃、1分を30サイクル行った。反応後、反応液の1/5量を0.1%アガロース、0.5×TBEゲル（エチジウムブロマイド0.25 mg/ml含有）で電気泳動した。
いずれの量の植物抽出物を添加しても本製品では影響を受けなかったことが示された一方、従来のPCRマスターミックスではわずか0.002 μlの植物抽出物を添加するとPCRが阻害された（データ未掲載）。
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特長
- 環境試料や動植物組織などに由来するPCR阻害物質を含むDNA試料からのPCRに最適です。
- マスターミックスに含まれている改変型Taq DNA polymeraseには高親和性のモノクローナル抗体が結合しているため、PCRの最初の変性ステップを行うまで不活性となっています。そのため、反応液調製を室温で行え、特異的で効率的なプライマー伸長が可能になります。
- 通常のTaq DNA polymeraseと同様に5'→3'エキソヌクレアーゼ活性を有しており、3'→5'エキソヌクレアーゼ活性は有していません。
- エンドヌクレアーゼやエキソヌクレアーゼの混入はありません。
- PCR産物は3'末端にdAオーバーハングを付加されるため、TAクローニングへの使用が可能です。
- 付属のGelTrack loading dye＊を反応液に加えてPCRを行うと、PCR産物をそのまま電気泳動に使用でき、PCR後の交差汚染のリスクが低減されます。
＊ #95142-100には付属していません。
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使用例
各種PCR阻害物質への耐性
各種PCR阻害物質を含む20 μlの反応液において、1×104コピーのテトラサイクリン耐性遺伝子をテンプレートとして1 kbのPCR産物を推奨プロトコルに従って増幅した。PCR条件は、94℃で3分間の活性化後、94℃、15秒；60℃、20秒；72℃、1分を30サイクル行った。反応後、反応液の1/5量を0.1%アガロース、0.5×TBEゲル（エチジウムブロマイド0.25 mg/ml含有）で電気泳動した。
PCR阻害物質の含有量（それぞれ左から）
ヘモグロビン：316、100、31.6、10、3.16 ng/μl
腐植酸（フミン酸）：31.6、10、3.16、1、0.316 ng/μl
ヘマチン：100、31.6、10、3.16、1 μM
メラニン：10、3.16、1、0.316、0.1 ng/μl
C：PCR阻害物質不含（コントロール）
L：1 kb plus DNA Ladder（Thermo Fisher Scientific社）
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Quantabio社PCRマスターミックスの一覧
品名をクリックすると各製品の詳細をご覧いただけます。
| 品名 | AccuStartⅡ PCR SuperMix | sparQ HiFi PCR Master Mix | AccuStartⅡ PCR ToughMix | repliQa HiFi ToughMix | AccuStart Long Range SuperMix | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 用途 | 通常のPCR | 高いFidelity | PCR阻害物質への耐性 | 高いFidelity、 PCR阻害物質への耐性 |
長鎖PCR | |
| マスターミックスの濃度 | 2× | 2× | 2× | 2× | 4× | |
| PCR産物のサイズ | 最大4 kb | 最大4 kb | 最大4 kb | 最大24 kb | 最大24 kb | |
| 伸長速度 | 60 sec/kb | 30 sec/kb | 60 sec/kb | 1～10 sec/kb | 30～60 sec/kb | |
| マルチプレックスPCR | － | － | － | － | 最大6標的 | |
| Taqと比較したFidelity | 1× | 80× | 1× | 90× | 10～12× | |
| dUの利用 | × | × | × | ○ | ○ | |
| 5'→3'エキソヌクレアーゼ活性 | ○ | N/A | ○ | N/A | N/A | |
| 3'→5'エキソヌクレアーゼ活性 | N/A | ○ | N/A | ○ | ○ | |
| PCR産物の末端形状 | 3' dAオーバーハング | 平滑末端 | 3' dAオーバーハング | 平滑末端 | 平滑末端／ Tオーバーハング | |
| 適 用 |
ルーチンのPCR | ★ | － | ★ | ★ | ★ |
| 高いFidelityを要するPCR | － | ★ | － | ★★ | ★ | |
| 粗精製試料からのPCR | － | － | ★ | ★★ | － | |
| 高速PCR | － | － | － | ★★ | － | |
| 長鎖PCR | － | － | － | ★ | ★★ | |
| 高収量 | ★ | － | － | ★★ | ★ | |
| NGSライブラリーの増幅 | － | ★★ | － | ★ | － | |
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キット内容
| 構成品名 | 組成 |
|---|---|
| AccuStartⅡ GelTrack PCR ToughMix | 2× mix containing optimized concentrations of MgCl2, dNTPs, reaction buffer, hot-start DNA polymerase, stabilizers and gel loading dyes |
| GelTrack loading dye＊ | 50× concentrated mixture of RT-PCR compatible, blue and yellow electrophoresis-tracking dyes |
＊ #95142-100には付属していません。
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価格
[在庫・価格 ：2025年08月26日 00時01分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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納期 | 文献数 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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AccuStart II PCR ToughMix (100reactions) |
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2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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AccuStart II PCR ToughMix, 800R |
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2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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AccuStart II PCR ToughMix, 4000R |
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2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[在庫・価格 ：2025年08月26日 00時01分現在]
AccuStart II PCR ToughMix (100reactions)
文献数： 0
- 商品コード：95142-100
- メーカー：QTB
- 包装：1kit
- 価格：¥23,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 阻害物質耐性を持つPCRマスターミックス製品。(#95142-100には電気泳動用色素は含まれません。)。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 | |||
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AccuStart II PCR ToughMix, 800R
文献数： 0
- 商品コード：95142-800
- メーカー：QTB
- 包装：1kit
- 価格：¥175,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
AccuStart II PCR ToughMix, 4000R
文献数： 0
- 商品コード：95142-04K
- メーカー：QTB
- 包装：1kit
- 価格：¥426,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
追加しました。
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